光柵式酶標儀雖然才出現(xiàn)短短十余年,但是發(fā)展非常迅猛,已經(jīng)是主流的酶標儀.它采用光柵進行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,就可以獲得任意波長的光,波長連續(xù)可調(diào),一般遞增量為1nm,同時具有帶寬可選的功能。光柵式酶標儀使用方便靈活,可以通過軟件選擇任意波長的光,而且可以進行全波長的掃描,通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰,從而可以達到檢測未知樣品的目的,在實驗室中很受歡迎,可以進行更多實驗的檢測,因此在國內(nèi)的普及程度很高。
濾光片式酶標儀采用濾光片來進行波長的選擇。甘肅性能穩(wěn)定酶標儀試用
TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長450nm處有比較大消光系數(shù),如果HRP量少,H:O:和TMB過量時,則形成藍色的陽離子根。降低pH,即可使藍色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此,450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件,可以同時安裝6~8片濾光片,所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個波長,有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,影響不大。除了這兩個基本濾光片外,考慮到雙波長比色的需要,還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片,其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時,有的實驗室希望用酶標儀作微量生化測定,故酶標儀生產(chǎn)廠家對其生產(chǎn)的酶標儀擴展了紫外檢測功能,此時需要一個340 nm波長濾光片。此時,酶標儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。
酶標儀的工作原理:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
K3 Plus酶標儀可以通過USB接口連接打印機接口對讀數(shù)進行處理。
國內(nèi)多家機構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標儀的重要性。甘肅性能穩(wěn)定酶標儀試用
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