超微量分光光度計(jì)在核酸定量和分析中的應(yīng)用:
分光光度測(cè)定法是一項(xiàng)定量和分析生物成分的成熟技術(shù)。其中,核酸是生物實(shí)驗(yàn)室**常檢測(cè)的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對(duì)許多下游實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應(yīng)用朗伯比爾定律通過(guò)它們的相關(guān)消光系數(shù)和樣品光程計(jì)算出來(lái)。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過(guò)樣品,而另一邊的光電檢測(cè)器則測(cè)定有多少光被吸收。通過(guò)對(duì)照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。上海雙檢測(cè)模式超微量分光光度計(jì)紫外檢測(cè)
Micro Drop比色皿檢測(cè)基本操作:
1. 準(zhǔn)備好兩個(gè)比色皿,一個(gè)加入空白檢測(cè)液,一個(gè)加入樣品,保證加入的液體量足夠,能蓋過(guò)光束,光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請(qǐng)按照比色皿生產(chǎn)廠(chǎng)家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂,把比色皿插入到儀器中,插入比色皿時(shí)要注意透光面,與儀器上面的光路指向的方向相對(duì)應(yīng)。
3. 在做比色皿檢測(cè)時(shí)樣品臂必須放下來(lái)。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項(xiàng)”框中選擇“使用比色皿”, 插入比色皿,勾選基線(xiàn)校正,設(shè)置相應(yīng)參數(shù)進(jìn)行空白檢測(cè)及檢測(cè)。
5. 當(dāng)檢測(cè)完成后,移出比色皿,倒出樣品,清洗干凈比色皿。
天津超微量分光光度計(jì)紫外檢測(cè)核酸的較高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260nm。
在分光光度計(jì)中,將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí),便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。如以波長(zhǎng)(λ)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度(A)為縱坐標(biāo),就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線(xiàn)。利用該曲線(xiàn)進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法,稱(chēng)為分光光度法,也稱(chēng)為吸收光譜法。用紫外光源測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的方法,稱(chēng)為紫外分光光度法;用可見(jiàn)光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法,稱(chēng)為可見(jiàn)光光度法。它們與比色法一樣,都以L(fǎng)ambert-Bee定律為基礎(chǔ)。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司歡迎大家來(lái)電咨詢(xún)!
Micro Drop基座檢測(cè)空白循環(huán):
我們建議把空白對(duì)照當(dāng)成樣品來(lái)檢測(cè),這樣可以確認(rèn)儀器性能完好并且基座上沒(méi)有樣品殘留,按下列操作來(lái)運(yùn)行空白循環(huán):
1. 軟件中打開(kāi)將進(jìn)行的操作模式,把空白對(duì)照加到基座上,并把樣品臂放下。
2. 點(diǎn)擊空白檢測(cè)來(lái)進(jìn)行空白對(duì)照檢測(cè)并保存參比圖譜。
3. 重新加空白對(duì)照到基座上,把它當(dāng)成樣品一樣來(lái)檢測(cè),點(diǎn)擊檢測(cè),結(jié)果應(yīng)該是差不多為一水平線(xiàn),吸光
值變化應(yīng)不超過(guò)0.04A(10mm光程)。
4. 擦去上下基座上的液體,重新進(jìn)行上面的操作,直到檢測(cè)光譜圖的變化不超過(guò)0.04A(10mm光程)。
雖然不需要在每個(gè)樣品之間進(jìn)行空白檢測(cè),但我們建議在檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí),比較好每30min進(jìn)行一次空白檢測(cè)。
物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。
比色皿的清洗:
1、拿取比色皿時(shí),只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃,避免接觸光學(xué)面。
2、不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。加入溶液時(shí),高度為比色皿的2/3處即可,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。
3、凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液,不得長(zhǎng)期盛放在比色皿中。
4、比色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時(shí)可用1∶1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。
5、不能將比色皿放在火焰或電爐上進(jìn)行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤;
6、在丈量時(shí)如對(duì)比色皿有懷疑,可自行檢測(cè)。用戶(hù)可將波長(zhǎng)選擇置實(shí)際使用的波長(zhǎng)上,將一套比色皿都注進(jìn)蒸餾水,將其中一只的透射比調(diào)至95%(數(shù)顯儀器調(diào)置100%)處,丈量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 無(wú)論選擇玻璃還是石英比色皿,都必須配對(duì)使用,即玻璃配玻璃的,且型號(hào)寬度都應(yīng)該一致。
分光光度計(jì)是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。江西超微量分光光度計(jì)紫外檢測(cè)
用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)。上海雙檢測(cè)模式超微量分光光度計(jì)紫外檢測(cè)
超微量分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強(qiáng)的多樣性。Protein A280功能應(yīng)用于檢測(cè)那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),而是檢測(cè)吸光度后,直接計(jì)算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測(cè)280nm處的吸光度后計(jì)算濃度(mg/ml)。和核酸檢測(cè)一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數(shù)據(jù)。
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上海寶予德科學(xué)儀器有限公司主要經(jīng)營(yíng)范圍是醫(yī)藥健康,擁有一支專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場(chǎng)口碑。公司自成立以來(lái),以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),公司旗下移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)深受客戶(hù)的喜愛(ài)。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。寶予德憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專(zhuān)業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來(lái)的聲譽(yù)和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。