二代測序的建庫步驟① 一、樣本準備 樣本采集：根據(jù)研究目的采**適的樣本，如血液、組織、細胞等。例如，在**研究中，可能會采集**組織和對應的正常組織。對于血液樣本，一般采用靜脈穿刺采集外周血，收集在含有抗凝劑（如EDTA）的**管中，以防止血液凝固。組織樣本則需要在合適的條件下盡快處理，以保持核酸的完整性。如果是新鮮組織，可將其置于液氮中速凍，然后保存在-80℃冰箱中。 核酸提?。簭臉颖局刑崛「哔|量的DNA或RNA。對于DNA提取，常用的方法有酚-氯仿抽提法和商業(yè)化的DNA提取試劑盒。酚-氯仿抽提法是利用酚和氯仿使蛋白質變性，離心后使DNA處于水相，從而實現(xiàn)分離。試劑盒...

③二代測序一般多久出結果？ 3、測序深度和覆蓋度要求 測序深度是指每個堿基被測序的平均次數(shù)，覆蓋度是指測序獲得的堿基占整個基因組（或目標區(qū)域）的比例。如果要求高測序深度和高覆蓋度，比如進行**全基因組的深度測序（測序深度可能達到100X甚至更高），需要更長的測序時間來獲取足夠的數(shù)據(jù)，并且后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析也會更復雜。而對于一些簡單的基因篩查項目，測序深度要求較低（如10X-20X），相應的測序和分析時間會縮短。例如，低深度全外顯子測序用于篩查常見突變，測序可能在3-5天完成；而高深度的全外顯子測序用于檢測低頻體細胞突變，可能需要7-10天甚至更久。 二代測序常用于醫(yī)學篩查或診...

二代測序——基因組測序該測幾個G？③ 基因組測序所需的測序量通常用數(shù)據(jù)量來衡量，一般以 G 為單位，不同的測序目的和基因組類型所需要的測序量有所不同。 微生物基因組測序細菌基因組： 細菌基因組 相對較小，一般在1M-10M之間，測序深度通常在50X-100X左右，數(shù)據(jù)量在0.05G-1G左右即可滿足基本的基因組組裝和變異檢測需求。 ***基因組：***基因組大小差異較大，從幾M到上百M都有。對于較小的***基因組，測序深度在30X-50X左右，數(shù)據(jù)量在0.1G-5G之間；而對于較大的***基因組，可能需要適當降低測序深度至10X-20X，數(shù)據(jù)量在1G-20G左...

二代測序—全外顯子測序的應用領域 醫(yī)學領域：1、疾病診斷：用于診斷各種遺傳性疾病，包括單基因遺傳病（如囊性纖維化、杜氏肌營養(yǎng)不良等）和復雜疾?。ㄈ?*、心血管疾病等）。在**研究中，通過對**組織和正常組織進行全外顯子測序，可以發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞中的體細胞突變，這些突變可能是導致**發(fā)生、發(fā)展的關鍵因素，有助于醫(yī)生制定個性化的治療方案。2、藥物研發(fā)：幫助研究人員了解藥物靶點的基因變異情況。例如，如果發(fā)現(xiàn)某些患者的藥物靶點基因外顯子區(qū)域存在突變，可能會影響藥物的療效，從而可以針對性地開發(fā)新的藥物或者調整藥物的使用劑量和方式。 遺傳學研究：用于研究人類群體的遺傳多樣性，通過對不同人群的外...

二代測序——應用領域類問題 二代測序在**研究中的應用有哪些：可用于**的早期篩查，通過檢測血液中的循環(huán)**DNA；進行**的診斷分型，確定**的基因突變特征；評估***效果，監(jiān)測***過程中腫瘤細胞的基因變化；預測**的預后，分析與預后相關的基因標志物；還可用于尋找**的新靶點，為靶向***藥物的研發(fā)提供依據(jù)。二代測序在遺傳病診斷中的優(yōu)勢和局限性：優(yōu)勢在于能夠快速、***地檢測基因組中的變異，包括單核苷酸變異、小插入缺失、拷貝數(shù)變異等，提高了遺傳病的診斷率。局限性在于對于復雜基因組區(qū)域的檢測可能存在困難，如高度重復序列區(qū)域；檢測到的變異需要進一步的功能驗證和臨床解讀，部分變異的致病...

二代測序的建庫步驟② 二、片段化處理 物理方法：超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如，在一些文庫構建中，將DNA樣本置于超聲破碎儀中，通過調整超聲功率和時間，可以將DNA片段化到幾百堿基對（bp）的長度范圍，一般在150-300bp左右，這符合二代測序的讀長要求。超聲破碎的優(yōu)點是片段大小比較均勻，但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù)，否則可能會導致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法：利用限制性內切酶進行片段化。限制性內切酶能夠識別特定的DNA序列，并在這些序列處切割DNA。例如，用EcoRⅠ酶可以識別GAATTC序列并進行切割。通...

二代測序的建庫步驟② 二、片段化處理 物理方法：超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如，在一些文庫構建中，將DNA樣本置于超聲破碎儀中，通過調整超聲功率和時間，可以將DNA片段化到幾百堿基對（bp）的長度范圍，一般在150-300bp左右，這符合二代測序的讀長要求。超聲破碎的優(yōu)點是片段大小比較均勻，但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù)，否則可能會導致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法：利用限制性內切酶進行片段化。限制性內切酶能夠識別特定的DNA序列，并在這些序列處切割DNA。例如，用EcoRⅠ酶可以識別GAATTC序列并進行切割。通...

對于二代測序的概念是什么？ 第二代測序(Next-generationsequencing，NGS)又稱為高通量測序(High-throughputsequencing)，是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來的DNA測序技術。我們都知道一代測序為合成終止測序，而二代測序開創(chuàng)性的引入了可逆終止末端，從而實現(xiàn)邊合成邊測序(SequencingbySynthesis)。二代測序在DNA復制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標記(一般為熒光分子標記)來確定DNA的序列，現(xiàn)有的技術平臺主要包括Roche的454FLX、lllumina的Miseq/Hiseg等。2005年，羅氏推出了二代測序儀羅...

二代測序的建庫步驟④ 四、接頭連接 接頭選擇：根據(jù)測序平臺的要求選擇合適的接頭。不同的二代測序平臺（如Illumina、IonTorrent等）有各自特定設計的接頭。這些接頭包含與測序平臺的流動池（flowcell）表面互補的序列，用于將DNA片段固定在測序芯片上，還包含用于區(qū)分不同樣本的索引序列（index）等。 連接反應：使用DNA連接酶將接頭與DNA片段連接。T4DNA連接酶是常用的連接酶，它可以在ATP（三磷酸腺苷）存在下，將接頭的5'-磷酸基團與DNA片段的3'-羥基形成磷酸二酯鍵，從而將接頭連接到DNA片段的兩端。連接反應的條件（如溫度、連接酶的用量、反應時間...

二代測序的建庫步驟② 二、片段化處理 物理方法：超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如，在一些文庫構建中，將DNA樣本置于超聲破碎儀中，通過調整超聲功率和時間，可以將DNA片段化到幾百堿基對（bp）的長度范圍，一般在150-300bp左右，這符合二代測序的讀長要求。超聲破碎的優(yōu)點是片段大小比較均勻，但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù)，否則可能會導致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法：利用限制性內切酶進行片段化。限制性內切酶能夠識別特定的DNA序列，并在這些序列處切割DNA。例如，用EcoRⅠ酶可以識別GAATTC序列并進行切割。通...

二代測序—全外顯子測序的局限性 不能檢測所有的遺傳變異：它只能檢測外顯子區(qū)域的變異，對于非外顯子區(qū)域（如內含子、基因間區(qū)域）的變異無法檢測，而這些區(qū)域的某些變異也可能對基因的表達和功能產(chǎn)生重要影響，如內含子中的突變可能影響基因的剪接。 數(shù)據(jù)分析復雜：全外顯子測序會產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù)，需要復雜的生物信息學工具和方法來進行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質量控制、變異的檢測和注釋、致病性的評估等多個環(huán)節(jié)，其中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導致錯誤的結論。 二代測序的使用場景都有哪些？云南二代測序應用 一代、二代、三代測序的技術原理和技術特點分別是什么？ 技術原理： 一代—雙脫氧終止法 ...

二代測序技術的一些***研究進展③ 技術優(yōu)化與創(chuàng)新領域 測序準確性提高：通過改進測序試劑、優(yōu)化測序反應條件以及開發(fā)更先進的數(shù)據(jù)分析算法，二代測序技術的準確性不斷提升，能夠更可靠地檢測到低頻變異和復雜結構變異等。 成本進一步降低：隨著技術的不斷成熟和市場競爭的加劇，二代測序的成本持續(xù)下降，使得更多的研究機構和臨床實驗室能夠廣泛應用該技術，推動了基因組學研究和臨床診斷的發(fā)展。 法醫(yī)學領域 遺傳標記檢測：現(xiàn)有的二代測序技術平臺能夠完成 STR 遺傳標記、SNP 遺傳標記、mtDNA 及 mRNA 等遺傳標記的測序，為法醫(yī)學個體識別、親緣關系鑒定等提供了更豐富、準確的...

二代測序技術在不同人群中的準確性有何差異① **患者 優(yōu)勢：對于**患者，二代測序技術準確性相對較高，在**的診斷、***及監(jiān)測等方面應用***。比如肺*患者，通過檢測**組織或血液中的基因突變，可準確找到如EGFR、ALK等驅動基因突變，為靶向***提供依據(jù)，其準確率通常在90%以上。在軟組織**中，二代測序能檢測到**組織的基因信息，包括突變基因、基因表達情況等，幫助醫(yī)生更準確地診斷病情，并制定個性化的***方案。 局限性：腫瘤細胞的異質性會影響檢測準確性，若樣本中腫瘤細胞比例低或存在多種類型細胞，可能導致部分基因突變漏檢，影響對**基因組全貌的評估。此外，血液樣本中...

關于二代測序的簡介： 二代測序技術(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測序技術，是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十億個 DNA片段進行測序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測序相比二代測序技術具有高通量、高準確性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢。 二代測序技術在大幅提高了測序速度的同時，大幅度的降低了測序成本，保持了高準確性，以前完成一個人類基因組的測序需要3年時間，而使用二代測序技術則需要1周，但其序列讀長方面比起一代測序技術則要短很多，大多只100bp-150bp。 二代測序需要分析嗎？云南嘉安健達二代測序運用 宏基因組二代測序，你了解多少？ ...

二代測序的應用領域有哪些？ 基因組學研究：用于全基因組測序，快速獲取物種的基因組序列信息，研究基因組結構、變異、進化等；進行全外顯子組測序，重點關注編碼蛋白質的外顯子區(qū)域，發(fā)現(xiàn)與疾病相關的基因突變。 轉錄組學研究：通過對轉錄組進行測序，可分析基因的表達水平、可變剪接、新轉錄本發(fā)現(xiàn)等，有助于深入了解基因在不同生理和病理狀態(tài)下的表達調控機制。 疾病診斷與***：在遺傳病診斷中，能夠檢測出導致遺傳病的基因突變，為疾病的診斷、遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù)；在**研究中，可分析腫瘤細胞的基因突變、拷貝數(shù)變異、基因融合等，為**的早期診斷、靶向***和預后評估提供支持。 藥物研發(fā)...

二代測序——基因組測序該測幾個G？② 人類全外顯子組測序 人類全外顯子組*占基因組的1%-2%，大小約為30M-60M左右，但通常需要較高的測序深度來確保外顯子區(qū)域的變異檢測準確性，一般測序深度在100X-200X之間，數(shù)據(jù)量大約在3G-12G左右。全外顯子組測序主要關注編碼蛋白質的外顯子區(qū)域，能夠高效地檢測出與疾病相關的基因突變，常用于遺傳病的診斷、**基因突變篩查等研究。 動植物基因組測序 常見動植物：對于一些常見的動植物物種，如水稻、小鼠等，其基因組大小與人類基因組相近或更小。全基因組測序時，測序深度一般在10X-30X左右，數(shù)據(jù)量在30G-90G之間。如果是...

二代測序—全外顯子測序的優(yōu)勢 針對性強：它主要聚焦于基因組中編碼蛋白質的區(qū)域，這部分區(qū)域雖然只占整個基因組的 1 - 2% 左右，但包含了大部分與疾病相關的突變。例如，在研究孟德爾遺傳病時，很多致病突變都位于外顯子區(qū)域，通過全外顯子測序可以更高效地找到這些突變。 成本效益高：相比于全基因組測序，全外顯子測序的成本相對較低。因為它不需要對整個基因組（包括大量的非編碼區(qū)域）進行測序，在一定程度上減少了數(shù)據(jù)量和測序成本，同時又能獲取大部分有重要功能意義的遺傳信息。 二代測序的成本比一代測序高嗎？云南嘉安健達二代測序技術 二代測序的建庫步驟⑥ 六、文庫質量檢測 定量檢測：...

二代測序的建庫步驟② 二、片段化處理 物理方法：超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如，在一些文庫構建中，將DNA樣本置于超聲破碎儀中，通過調整超聲功率和時間，可以將DNA片段化到幾百堿基對（bp）的長度范圍，一般在150-300bp左右，這符合二代測序的讀長要求。超聲破碎的優(yōu)點是片段大小比較均勻，但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù)，否則可能會導致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法：利用限制性內切酶進行片段化。限制性內切酶能夠識別特定的DNA序列，并在這些序列處切割DNA。例如，用EcoRⅠ酶可以識別GAATTC序列并進行切割。通...

二代測序——蛋白質甲基化 概念及位置：蛋白質甲基化是指在蛋白質的氨基酸殘基上添加甲基基團。常見的甲基化修飾位點包括精氨酸（Arg）和賴氨酸（Lys）殘基。 作用 1、調節(jié)蛋白質 - 蛋白質相互作用：例如，組蛋白（染色體的組成成分）的甲基化可以改變染色質的結構和功能，影響基因的可及性。當組蛋白 H3 的賴氨酸殘基（如 H3K4、H3K9 等）發(fā)生甲基化時，會招募不同的蛋白質復合物，從而***或抑制基因轉錄。2、調節(jié)酶的活性：某些酶的活性可以通過蛋白質甲基化來調節(jié)。甲基化可能改變酶的活性中心的結構或者影響其與底物的結合能力。 檢測方法：質譜分析：這是一種***用于檢測蛋...

一代、二代、三代測序的區(qū)別分別是什么？ 一代測序是上世紀70年代由Sanger和Coulson開創(chuàng)的DNA雙脫氧鏈終止法測序，也稱為Sanger測序。 二代測序技術(NGS)是為了改進一代測序通量過低的問題而出現(xiàn)的，能夠同時對上百萬甚至數(shù)十億個DNA分子進行測序實現(xiàn)了大規(guī)模、高通量測序的目標。 三代測序主要有兩種技術PacBio公司的SMRT和Oxford Nanopore 的納米孔單分子測序技術，這兩種技術的測序讀長都可以達到幾-kb的級別，遠遠高于二代測序技術。 二代測序即高通量測序技術。安徽二代測序應用 二代測序——技術原理類問題 二代測序與一代測序的區(qū)別是...

二代測序不同應用場景下的速度有多快？ 病原微生物檢測：一般來說，二代測序用于檢測病原微生物時，能夠在幾個小時到一天左右出結果。比如在快速檢測血液中的病原微生物時，通?？梢栽趲讉€小時內獲得檢測結果，相比傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)方法，時間大幅縮短，傳統(tǒng)血液培養(yǎng)一般需要幾天到一周的時間 。 全基因組測序：如果是對人類全基因組進行測序，以目前的技術水平，使用二代測序技術完成一個人的全基因組測序，一般需要 1-2 天左右的時間。而在十幾年前，人類全基因組測序計劃***完成時，耗費了大量的時間和精力，相比之下二代測序技術的速度提升***。 轉錄組測序：轉錄組測序的時間相對較短，一般幾個小時內可...

③二代測序一般多久出結果？ 3、測序深度和覆蓋度要求 測序深度是指每個堿基被測序的平均次數(shù)，覆蓋度是指測序獲得的堿基占整個基因組（或目標區(qū)域）的比例。如果要求高測序深度和高覆蓋度，比如進行**全基因組的深度測序（測序深度可能達到100X甚至更高），需要更長的測序時間來獲取足夠的數(shù)據(jù)，并且后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析也會更復雜。而對于一些簡單的基因篩查項目，測序深度要求較低（如10X-20X），相應的測序和分析時間會縮短。例如，低深度全外顯子測序用于篩查常見突變，測序可能在3-5天完成；而高深度的全外顯子測序用于檢測低頻體細胞突變，可能需要7-10天甚至更久。 單細胞測序也是二代測序。蘇...

二代測序—全外顯子測序的局限性 不能檢測所有的遺傳變異：它只能檢測外顯子區(qū)域的變異，對于非外顯子區(qū)域（如內含子、基因間區(qū)域）的變異無法檢測，而這些區(qū)域的某些變異也可能對基因的表達和功能產(chǎn)生重要影響，如內含子中的突變可能影響基因的剪接。 數(shù)據(jù)分析復雜：全外顯子測序會產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù)，需要復雜的生物信息學工具和方法來進行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質量控制、變異的檢測和注釋、致病性的評估等多個環(huán)節(jié)，其中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導致錯誤的結論。 二代測序又可以稱之為什么？江蘇嘉安健達二代測序應用 ①二代測序一般多久出結果？ 二代測序（Next-GenerationSequencing...

二代測序——應用領域類問題 二代測序在**研究中的應用有哪些：可用于**的早期篩查，通過檢測血液中的循環(huán)**DNA；進行**的診斷分型，確定**的基因突變特征；評估***效果，監(jiān)測***過程中腫瘤細胞的基因變化；預測**的預后，分析與預后相關的基因標志物；還可用于尋找**的新靶點，為靶向***藥物的研發(fā)提供依據(jù)。二代測序在遺傳病診斷中的優(yōu)勢和局限性：優(yōu)勢在于能夠快速、***地檢測基因組中的變異，包括單核苷酸變異、小插入缺失、拷貝數(shù)變異等，提高了遺傳病的診斷率。局限性在于對于復雜基因組區(qū)域的檢測可能存在困難，如高度重復序列區(qū)域；檢測到的變異需要進一步的功能驗證和臨床解讀，部分變異的致病...

二代測序技術在不同人群中的準確性有何差異④ ***性疾病患者 優(yōu)勢：病原學二代測序可準確檢測病原體的基因序**定病原體種類和基因型，為***性疾病的診斷和***提供依據(jù)，在檢測罕見病原體、病毒***等方面具有獨特優(yōu)勢，有助于快速明確診斷，尤其是對于一些傳統(tǒng)檢測方法難以診斷的***性疾病，如不明原因的發(fā)熱、肺炎、腦膜炎等。 局限性：對于低豐度病原體，可能出現(xiàn)假陽性或假陰性結果。樣本質量、測序深度和數(shù)據(jù)分析方法等因素也會影響準確性，若樣本中病原體含量低或雜質多，可能導致檢測失敗或結果不準確 一代、二代、三代測序的區(qū)別是什么？海南哪里有二代測序應用 二代測序的優(yōu)勢和劣勢分別有...

二代測序的建庫步驟⑤ 五、文庫富集（可選步驟） PCR富集：對于一些起始樣本量較少或者連接效率較低的情況，可能需要進行PCR富集。利用與接頭序列互補的引物進行PCR擴增，增加文庫中目標DNA片段的數(shù)量。在PCR反應中，需要注意引物的設計要與接頭序列準確匹配，并且要優(yōu)化PCR循環(huán)數(shù)，避免過度擴增導致文庫多樣性降低或引入PCR偏差。一般會通過預實驗確定合適的PCR循環(huán)數(shù)，例如從10-15個循環(huán)開始嘗試，通過檢測擴增產(chǎn)物的量和質量來調整循環(huán)數(shù)。 二代測序廣泛應用于醫(yī)學研發(fā)。廣西二代測序提供 一代、二代、三代測序的區(qū)別分別是什么？ 一代測序是上世紀70年代由Sanger和Cou...

二代測序的建庫步驟③ 三、末端修復和加A尾（以DNA文庫為例） 末端修復：經(jīng)過片段化后的DNA末端可能是不平齊的，有5'-突出端或3'-突出端。末端修復反應可以利用T4DNA聚合酶、Klenow片段等酶，將這些末端補平，使其成為平末端。T4DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，在合適的反應緩沖液和dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）存在下，可以將突出的末端補平。 加A尾：在末端修復后的平末端DNA分子的3'-末端加上一個A堿基。這一步是為了后續(xù)連接帶有T-突出端的接頭做準備，一般使用Klenow片段（3'→5'外切酶活性缺失）在dATP存在下進行加A反應，...

二代測序技術的一些***研究進展① 疾病診斷與***領域 ：消化系統(tǒng)**標志物檢測：2024 年的**共識指出，二代測序（NGS）技術可同時檢測消化系統(tǒng)**中的多種標志物，如錯配修復基因變異、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）狀態(tài)、**突變負荷（TMB）等，為**的精細***提供了更***、準確的信息。例如，MSI-H 的實體瘤患者可使用帕博利珠單抗進行***，而 NGS 技術能更好地檢測 MSI 狀態(tài)及相關耐藥機制。 **液體活檢：通過檢測血液中的循環(huán)** DNA（ctDNA）等標志物，實現(xiàn)對**的早期篩查、診斷和***監(jiān)測。NGS 技術能夠更敏感地檢測到 ctDNA 中的基因突變和變...

二代測序——轉錄組測序的實驗流程（下） 測序 根據(jù)研究需求和預算選擇合適的測序平臺，如 Illumina 測序平臺。它的測序原理主要是邊合成邊測序（SBS）。在測序過程中，dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）帶有不同顏色的熒光標記，當新的 dNTP 加入到正在合成的 DNA 鏈時，通過檢測熒光信號來確定堿基類型，從而讀取 cDN**段的序列。測序深度（覆蓋度）也是一個重要參數(shù)，一般來說，測序深度越高，檢測到的低表達轉錄本的概率就越大，但成本也會相應增加。 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)質量控制是第一步，要去除低質量的 reads（如含有較多不確定堿基 “N” 的 reads）和接頭序列。...

什么樣本可以做二代測序？② 組織樣本 新鮮組織：如手術切除的**組織、活檢組織等。新鮮組織樣本中的細胞完整性較好，能夠提供高質量的DNA和RNA。在**研究中，對新鮮**組織進行全基因組測序、轉錄組測序等，可以深入了解**的基因突變、基因表達變化等情況。例如，在研究結直腸*的發(fā)病機制時，對手術切除的結直腸*組織及其*旁組織進行測序，比較兩者之間的差異，以發(fā)現(xiàn)**相關的基因變異和表達調控異常。 福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織：這是臨床上常用的保存組織樣本的方式。FFPE組織中的DNA和RNA會有一定程度的損傷和降解，但經(jīng)過適當?shù)奶崛『托迯吞幚砗?，仍然可以用于二代測序。...