市場上尚有:基準試劑(PT:Primary Reagent):專門作為基準物用,可直接配制標準溶液。光譜純試劑(SP:Spectrum pure):表示光譜純凈。但由于有機物在光譜上顯示不出,所以有時主成分達不到99.9%以上,使用時必須注意,特別是作基準物時,必須進行標定。純度遠高于優(yōu)級純的試劑叫做高純試劑(≥ 99.99%)。 生物試劑試劑的包裝 編輯 固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細口瓶中(或滴瓶中),見光易分解的試劑(如硝酸銀)應(yīng)裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實驗室分裝時,固體只標明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。 上樣體積30-...
試劑篇:四、根據(jù)配體特異性的分離方法-親和色譜法親和層析法(aflinity chromatography)是分離蛋白質(zhì)的一種極為有效的方法,它經(jīng)常只需經(jīng)過一步處理即可使某種待提純的蛋白質(zhì)從很復雜的蛋白質(zhì)混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據(jù)某些蛋白質(zhì)與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非共價地結(jié)合。其基本原理:蛋白質(zhì)在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質(zhì),因此蛋白質(zhì)的分離(Separation),提純(Purification)和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一**成的方法能移把任...
蛋白純化試劑.產(chǎn)品介紹,DextrinBeads是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進連接蛋白的正確折疊,增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進行溫和洗脫,保護了標簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點特異性蛋白酶切除。問題及解決方案問題原因分析:柱子反壓過高填料被堵塞按照第3部分進行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達確保目的蛋白表達...
蛋白純化試劑NiSmartBeads是一種新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni離子,具體性能見表1。NiSmartBeads主要應(yīng)用于分泌到真核培養(yǎng)液上清中的組氨酸標記蛋白的捕獲和純化,可以在含有EDTA及DTT的情況下進行目的蛋白高效的純化。NiSmartBeads有很強的組分兼容性,適用于***底物及鹽濃度的緩沖條件2.純化流程2.1緩沖液的準備可使用下列推薦緩沖液,也可根據(jù)自己的使用習慣配置不同的緩沖液體系,基本原理就是低咪唑上樣,高咪唑洗脫,或者高pH上樣,低pH洗脫。緩沖液在使用前比較好用0.22μm或者0.45μm濾膜過濾除菌。常規(guī)陽離子交換介質(zhì)推薦 SP Beads 6FF。湖...
蛋白純化試劑Ni Smart Beads純化流程2/3常州天地人和生物科技有限公司平衡液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,pH7.4洗雜液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,0-5mM咪唑,pH7.4洗脫液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,250mM咪唑,pH7.4注:為了減少宿主細胞蛋白的洗脫,建議在洗雜液中加入低濃度的咪唑。為了消除一些離子作用蛋白的吸附,可以在溶液中加入0.5M-1.0MNaCl??梢圆捎玫蚿H值洗脫或與咪唑結(jié)合,如pH2.5-5.0。2.2樣品準備1)將細胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心杯,7,000rpm(7,500×g),離心15min取上清。如果使用預裝柱,樣品在使用前比較...
上海楚知生物蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結(jié)構(gòu)域,該蛋白在正常機體發(fā)育和**發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個重要的轉(zhuǎn)錄因子,其異常表達能促進多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對目的蛋白進行準確的檢測、定位和純化。抗體來源:小鼠交叉反應(yīng):c-Myc標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘...
生物試劑(Biochemicalreagent)是指有關(guān)生命科學研究的生物材料或有機化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學研究用的試劑。由于生命科學面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質(zhì)復雜。主要有電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標記試劑、組織化學試劑、透變劑和致*物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)劑、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標準品試劑、生化質(zhì)控品試劑、分離材料等等。我國的試劑規(guī)格基本上按純度(雜質(zhì)含量的多少)劃分,共有高純、光譜純、基準、分光純、優(yōu)級純、分析和化學純等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標的主要...
隨著分子生物學的發(fā)展,越來越多的科研人員熟練掌握了分子生物學的各種試驗技術(shù),并研制成套試劑盒,使基因克隆表達變得越來越容易lIl。但分子生物學的上游工作往往并非是**終目的,分子克隆與表達的關(guān)鍵是要拿到純的表達產(chǎn)物,以研究其生物學作用,或者大量生產(chǎn)出可用于疾病***的生物制品。相對與上游工作來說,分子克隆的下游工作顯得更難,蛋白純化工作非常復雜,除了要保證純度外,蛋白產(chǎn)品還必須保持其生物學活性。純化工藝必須能夠每次都能產(chǎn)生相同數(shù)量和質(zhì)量的蛋白,重復性良好。這就要求應(yīng)用適應(yīng)性非常強的方法而不是用能得到純蛋白的比較好方法去純化蛋白。在實驗室條件下的好方法卻可能在大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用中失敗,因為后者要求規(guī)...
rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標抗體的種屬來源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應(yīng)用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2...
蛋白純化試劑 IMAC Beads 6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體結(jié)構(gòu)見圖1所示,填料可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+, Zn2+, Ni2+,Co2+, 對His標簽的結(jié)合能力Cu2+>Zn2+>Ni2+ >Co2+,可根據(jù)金屬離子對標簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。具體性能見表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的試劑條件(見表2)外,因其耐壓的基質(zhì),可以耐受比較高0.3 MPa的壓力,更穩(wěn)定,因此該產(chǎn)品更適合用于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化,可以在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化。常規(guī)陽離子交換介質(zhì)推薦 SP Beads 6FF。江西天地人和試劑哪種...
蛋白純化試劑-分子生物學酶-Hifi-taqDNApolymerase是從克隆有α-型高保真DNA聚合酶的大腸桿菌中分離純化所得,具有3'→5'以及5'→3'外切酶活性,保真性能比普通Taq聚合酶高80倍。延伸速率在推薦的條件下大于每分鐘2kb。PCR產(chǎn)物為平端,可以直接接入Blunt平端連接載體中。應(yīng)用于高保真、快速擴增目標DNA,環(huán)拉法引入點突變,補平DNA粘性末端等。保存:-20℃存放儲存液:50mMTris-HCl(pH8.4),50mMKCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,0.1%tritonX-100,50%(v/v)glycerol。一步純化鏈霉親和素。江蘇多肽試劑銷售價格蛋...
蛋白純化試劑,預裝柱介紹,預裝柱具有標準接口,可以適配各類中壓色譜系統(tǒng),如?KTA等。客戶購買后可直接連接注射器或?qū)游鱿到y(tǒng)使用,節(jié)省時間,提高工作效率。我公司使用專業(yè)裝填設(shè)備,保證了柱效和重復性,進而保證了實驗結(jié)果的可靠性。1.產(chǎn)品介紹AbCapA4FF是一種中低壓預裝柱,有1mL和5mL兩種規(guī)格的預裝柱,分別填裝1mL和5mLrProteinABeads4FF,共有5種不同包裝規(guī)格的產(chǎn)品。預裝柱具有標準接口,可以適配商品化的各類中低壓色譜系統(tǒng),如?KTA等,方便客戶操作。蛋白純化磁珠系列產(chǎn)品。浙江核酸提取試劑報價rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到...
純化試劑篇1:分離純化某一特定蛋白質(zhì)的一般程序可以分為前處理、粗分級、細分級三步。前處理分離純化某種蛋白質(zhì),首先要把蛋白質(zhì)從原來的組織或細胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不丟失生物活性。為此,動物材料應(yīng)先剔除結(jié)締組織和脂肪組織,種子材料應(yīng)先去殼甚至去種皮以免受單寧等物質(zhì)的污染,油料種子比較好先用低沸點的有機溶劑如**等脫脂。然后根據(jù)不同的情況,選擇適當?shù)姆椒?,將組織和細胞破碎。動物組織和細胞可用電動搗碎機或勻漿機破碎或用超聲波處理破碎。植物組織和細胞由于具有纖維素、半纖維素和果膠等物質(zhì)組成的細胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當?shù)奶崛∫阂黄鹧心サ姆椒ɑ蛴美w維素酶處理也能達到目的。...
蛋白純化試劑 Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進連接蛋白的正確折疊,增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。Dextrin Beads 6FF可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進行溫和洗脫,保護了標簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點特異性蛋白酶切除。問題及解決方案柱子反壓過高 填料被堵塞按照第3部分進行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜 (0.22或 0.45μm) 過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達確保目的蛋白...
試劑篇:2,細胞碎片等不溶物用離心或過濾的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一細胞組分,如細胞核、染色體、核糖體或可溶性細胞質(zhì)等,則可利用差速離心的方法將它們分開,收集該細胞組分作為下步純化的材料。如果碰上所要蛋白是與細胞膜或膜質(zhì)細胞器結(jié)合的,則必須利用超聲波或去污劑使膜結(jié)構(gòu)解聚,然后用適當介質(zhì)提取。粗分離當?shù)鞍踪|(zhì)提取液(有時還雜有核酸、多糖之類)獲得后,選用一套適當?shù)姆椒ǎ瑢⑺牡鞍着c其他雜蛋白分離開來。一般這一步的分離用鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離等方法。這些方法的特點是簡便、處理量大,既能除去大量雜質(zhì),又能濃縮蛋白溶液。有些蛋白提取液體積較大,又不適于用沉淀或鹽析法濃縮,則可采...
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:HA標簽是人流感血凝素的第98-106氨基酸序列YPYDVPDYA,對外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小,容易構(gòu)建成標簽蛋白融合到蛋白N端或者C端,因此常被用于重組蛋白的融合表達。Anti-HAAntibody能夠特異性識別HA標簽,從而用于融合蛋白的表達和定位檢測??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):HA標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復凍融-上海楚知生物FL...
蛋白純化試劑,抗體純化產(chǎn)品rProteinABeads是用于分離和純化單克隆抗體、多克隆抗體或Fc-融合蛋白的通用性親和層析介質(zhì),具體性能見表1。ProteinA是一種分離自金黃色葡萄球菌的細胞壁蛋白,主要通過Fc片段結(jié)合哺乳動物IgG,但是不與狗lgG結(jié)合,不結(jié)合人lgM、lgD和IgA。蛋白A與蛋白G與不同來源及亞類的免疫球蛋白結(jié)合能力不一樣,具體見表2。天然ProteinA有五個IgG結(jié)合區(qū)域和一些未知功能的區(qū)域,重組proteinA去除了與白蛋白及細胞表面結(jié)合位點,只含有五個IgG結(jié)合區(qū)域,減少了非特異性吸附。含MBP標簽蛋白的親和純化介質(zhì)。廣東蛋白純化試劑銷售價格上海楚知生物蛋白純化...
蛋白純化試劑,上海楚知生物代理天地人和,1.產(chǎn)品介紹NiIDABeads可以用于各種表達來源(如大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞)的組氨酸標簽(6xHis-tagged)蛋白的純化。它是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學方法偶聯(lián)了三配位的亞氨基二乙酸(IDA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成比較穩(wěn)定的平面四邊形結(jié)構(gòu),從而有更多的位點與組氨酸標簽上的咪唑環(huán)繼續(xù)配位,達到結(jié)合目的蛋白的效果(產(chǎn)品化學結(jié)構(gòu)見圖1所示)。但是,這樣的結(jié)構(gòu)比較容易受到其他小分子的進攻,鎳離子易被還原或者被螯合,從而破壞其化學結(jié)構(gòu),無法結(jié)合目的蛋白。NiIDABeads具有載量高,性價比高的優(yōu)點生物素標簽純化方案。...
蛋白純化試劑 IMAC Beads 6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體結(jié)構(gòu)見圖1所示,填料可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+, Zn2+, Ni2+,Co2+, 對His標簽的結(jié)合能力Cu2+>Zn2+>Ni2+ >Co2+,可根據(jù)金屬離子對標簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。具體性能見表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的試劑條件(見表2)外,因其耐壓的基質(zhì),可以耐受比較高0.3 MPa的壓力,更穩(wěn)定,因此該產(chǎn)品更適合用于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化,可以在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化。核酸提取系列DNA Fragselect XP Magnetic Be...
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹,Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用***的親和標簽。它包括兩種類型Strep-tagII和TwinStrep-tagII。Strep-tagII是一個短肽標簽,由8個氨基酸(WSHPQFEK)組成,可以作為N端或C端標簽與蛋白質(zhì)融合,對重組蛋白的影響很小。進一步改進的TwinStrep-tagII是一個順序排列的兩個Strep-tagII序列(通過內(nèi)部氨基酸連接),該標簽?zāi)軌蛳馭trep-tagII一樣進行溫和、快速的純化。這兩個標簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarmSterptactin中的任一配體。標簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強度和應(yīng)用。這兩...
試劑篇:四、根據(jù)配體特異性的分離方法-親和色譜法親和層析法(aflinity chromatography)是分離蛋白質(zhì)的一種極為有效的方法,它經(jīng)常只需經(jīng)過一步處理即可使某種待提純的蛋白質(zhì)從很復雜的蛋白質(zhì)混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據(jù)某些蛋白質(zhì)與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非共價地結(jié)合。其基本原理:蛋白質(zhì)在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質(zhì),因此蛋白質(zhì)的分離(Separation),提純(Purification)和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一**成的方法能移把任...
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約15min后,800rpm離心1min,再吸棄上清。4)加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復兩次。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,使抗原與抗體充分結(jié)合,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原...
試劑篇:GST親和純化原理GST親和層析是利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價親和,通過GSH交換洗脫的原理來進行純化。該純化柱中,凝膠手臂上通過硫鍵結(jié)合一個谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽與谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(即GST-tag(26KDa))之間酶和底物的特異性作用力,使得帶GST標簽的融合蛋白能夠與凝膠上的手臂谷胱甘肽結(jié)合,從而將帶標簽的蛋白與其他蛋白分離開。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和還原型GSH,當我們使用GSH洗脫時,GSH會與凝膠上的谷胱甘肽競爭結(jié)合融合蛋白,從而將目標蛋白洗脫。GST標簽蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathion...
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約15min后,800rpm離心1min,再吸棄上清。4)加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復兩次。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,使抗原與抗體充分結(jié)合,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原...
上海楚知代理的常州天地人和試劑,GST(標簽)蛋白親和純化產(chǎn)品可以純化各種表達系統(tǒng)融合表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的目的蛋白,谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,Glutathione Beads ,Glutathione Beads 4FF 是通過12個原子的間隔臂,用化學方法共價結(jié)合了還原型谷胱甘肽制作而成,這種特別涉及使樹脂的純化效率得到了提高, GSTPur Glutathione Kit提供了3ml Glutathione Beads重力預裝柱,GST標簽蛋白純化所需的緩沖液,方便客戶使用,操作簡單,純化率高純化過程中如何洗脫?上海核酸提取試劑報價蛋白純化試劑 Dextr...
生物試劑(Biochemicalreagent)是指有關(guān)生命科學研究的生物材料或有機化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學研究用的試劑。由于生命科學面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質(zhì)復雜。主要有電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標記試劑、組織化學試劑、透變劑和致*物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)劑、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標準品試劑、生化質(zhì)控品試劑、分離材料等等。我國的試劑規(guī)格基本上按純度(雜質(zhì)含量的多少)劃分,共有高純、光譜純、基準、分光純、優(yōu)級純、分析和化學純等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標的主要...
蛋白純化試劑抗體純化rProtein A/G Beads 4FF純化流程,樣品準備上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強度和pH值,可以用平衡/洗雜液對血清樣品、腹水或細胞培養(yǎng)液稀釋,或者樣品用平衡/洗雜液透析。對于100mm培養(yǎng)皿中的貼壁細胞,吸除細胞培養(yǎng)液,使用預冷PBS洗滌一次后加入2ml細胞裂解液裂解細胞。對于懸浮細胞,離心收集細胞后,PBS洗滌一次后參考貼壁細胞的裂解方法進行裂解。植物或動物組織樣品可以使用液氮研磨方法裂解。具體的裂解方法請參考不同裂解液的使用說明,裂解液**終總蛋白濃度選擇在0.5-1μg/μl范圍內(nèi)較為合適。通常針對目標蛋白的表達量不同,需要對總蛋白濃度進行預實驗調(diào)...
試劑篇:藥物分離主要方法,(1) 根據(jù)分子大小不同的分離方法:透析和超過濾(利用蛋白質(zhì)分子不能通過半透膜的性質(zhì));密度梯度離心(蛋白質(zhì)在介質(zhì)中離心時質(zhì)量和密度較大的顆粒沉降較快);凝膠過濾(一種柱層析)(2) 利用溶解度差別分離:等電點沉淀法(由于蛋白質(zhì)分子在等電點時凈電荷為零,減少了分子間靜電斥力,因而容易聚集沉淀,此時溶解度**?。畸}溶與鹽析(利用一定濃度鹽溶液增大或減小蛋白質(zhì)的溶解度)(3) 根據(jù)電荷不同的分離方法,主要包括電泳和離子交換層析分離;(4) 蛋白質(zhì)的選擇吸附分離(利用顆粒吸附力的強弱不同達到分離目的)(5) 根據(jù)配體特性的分離——親和層析(利用蛋白質(zhì)分子與另一種稱為配體的...
蛋白純化試劑,抗體純化產(chǎn)品rProtein G Beads 4FF是用于分離和純化lgG的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。Protein G是一種分離自G Streptococci的細胞壁蛋白,它可通過其Fc片段結(jié)合哺乳動物IgG。重組protein G含有高親和結(jié)合位點,減少了非特異性吸附。Protein G和Protein A有不同的lgG結(jié)合特性,相比Protein A, Protein G對牛、羊、馬等多克隆抗體有更強的結(jié)合力,它還可以結(jié)合不能與Protein A很好結(jié)合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1,具體結(jié)合能力見表2。rProtein G Beads 4FF是以高度交聯(lián)的4%...
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約15min后,800rpm離心1min,再吸棄上清。4)加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復兩次。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,使抗原與抗體充分結(jié)合,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原...