發(fā)貨地點(diǎn):江蘇省無(wú)錫市
發(fā)布時(shí)間:2024-10-28
無(wú)芽孢:E=209一250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說(shuō)明提高溫度對(duì)于第二個(gè)平行反應(yīng),即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,雖然兩個(gè)平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,但是,達(dá)到同樣的**效果,所需要的時(shí)間卻縮短了,由于***個(gè)反應(yīng)也就是營(yíng)養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時(shí)**對(duì)于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分是有利的。通常所說(shuō)的高溫短時(shí)**可以提高生產(chǎn)效益,其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1:當(dāng)**溫度上升時(shí),微生物殺死速率的提高要超過(guò)培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結(jié)論2:在**時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間,這樣便既可達(dá)到需要的**程度,同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類(lèi):不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出色。新疆無(wú)血清培養(yǎng)基答疑解惑
但酚紅在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說(shuō)明中的碳酸氫鈉推薦量是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)、安全量,是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得。但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同,同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等),且存在的地域性水質(zhì)差異等,在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中也可稍作改動(dòng),但使用者需做相應(yīng)的檢測(cè)(理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗(yàn)等)。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH~,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能**。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10~25mmol/L。**酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是在沒(méi)有葡萄糖的條件下,細(xì)胞也可以代謝**酸鈉。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,使用中**好單獨(dú)配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。重慶MEM a培養(yǎng)基代理商RPMI1640培養(yǎng)基確保了細(xì)胞的高效生長(zhǎng)。
體外培養(yǎng)時(shí),一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來(lái)為細(xì)胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細(xì)胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①是蛋白質(zhì)的基本組成單位,用于合成蛋白質(zhì)和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨(dú)特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細(xì)胞內(nèi)氨的運(yùn)輸?shù);④可轉(zhuǎn)變成糖類(lèi)和脂肪,參與氧化供能。細(xì)胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細(xì)胞不能自身合成的,必須依靠外源的細(xì)胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸,細(xì)胞可以自己合成,或通過(guò)轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái),但是在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸可以減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān),提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,可能因其不僅是細(xì)胞的主要氮源,且可作為細(xì)胞生長(zhǎng)的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體,另外還可直接作為細(xì)胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)生長(zhǎng)不良,甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。
二氧化碳不斷被釋放,培養(yǎng)液變酸,pH值發(fā)生變化。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中**常用的pH指示劑,但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷,需要實(shí)驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)積累,存在較大的主觀性。實(shí)際上,個(gè)性化細(xì)胞培養(yǎng)基或是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅,只能通過(guò)pH計(jì)或者pH電極進(jìn)行pH值的檢測(cè),結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。緩沖能力細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中造成細(xì)胞培養(yǎng)液pH波動(dòng)的主要物質(zhì)是細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2。在封閉式培養(yǎng)過(guò)程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸,細(xì)胞培養(yǎng)液pH很快下降;打開(kāi)培養(yǎng)器具時(shí)CO2逸出則會(huì)引起pH升高。細(xì)胞培養(yǎng)基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),按下列化學(xué)反應(yīng)方程式調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值:H2O+CO2→H2CO3H++HCO3-NaHCO3Na++HCO3-此外,還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。但碳酸鹽緩沖系統(tǒng)的細(xì)胞毒性小、成本低,在細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用得更為***。另一種較為常用的緩沖液是HEPES(羥乙基哌嗪乙硫磺酸)液,它是一種非離子兩性緩沖液,在pH~。高濃度的HEPES可能對(duì)細(xì)胞**性作用,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)HEPES的添加濃度一般為10~25mmol/L。滲透壓細(xì)胞必須生活在等滲的環(huán)境中,大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定耐受性。研究顯示。F12培養(yǎng)基在組織工程和再生醫(yī)學(xué)中有廣泛應(yīng)用。
本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。背景技術(shù):繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球?qū)俾淙~灌木,別名八仙花、**花、粉團(tuán)花、雪球花、草繡球等,是園林上應(yīng)用***的觀賞植物。原產(chǎn)于我國(guó)長(zhǎng)江流域及以南,自然株高2m。葉對(duì)生,倒卵或橢圓形,邊緣有鋸齒,傘房花序頂生,直徑20cm,近球形;ㄉ嘧,青白色,漸轉(zhuǎn)粉紅色,再轉(zhuǎn)紫紅色,花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4~6時(shí),花色多呈藍(lán)色;ph值,則呈紅色。繡球花葉片翠綠,花色鮮艷,盛開(kāi)時(shí)花團(tuán)錦簇,美麗多姿,每簇花可開(kāi)2個(gè)月之久,觀賞期長(zhǎng)。由于繡球花的孕性花極為少數(shù),所以不易結(jié)種,常用分株、壓條或扦插方法繁殖,但分株、壓條繁殖倍率低,速度慢,而扦插繁殖又會(huì)受到季節(jié)的限制,不能常年生產(chǎn)苗木,很難滿足市場(chǎng)的需求。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短,效率高,成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的:一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,具體步驟如下:s1:外植體選擇;s2:外植體消毒;s3:誘導(dǎo)培養(yǎng);s4:增殖培養(yǎng);s5:生根培養(yǎng),其中。無(wú)酚紅培養(yǎng)基適用于對(duì)酚紅敏感的實(shí)驗(yàn)。貴州減血清培養(yǎng)基哪個(gè)好
MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞。新疆無(wú)血清培養(yǎng)基答疑解惑
MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強(qiáng)于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細(xì)胞生長(zhǎng)非?鞎r(shí),pH值通常下降得很快,此時(shí)可以通過(guò)及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得過(guò)緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。這時(shí),可以通過(guò)以下幾種方法解決:1)增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在;2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液;3)適當(dāng)松開(kāi)瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液,使終濃度為10~25mM;4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks’鹽配制的培養(yǎng)液;5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用*****。酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過(guò)酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過(guò)肉眼觀察或通過(guò)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判定pH值,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。酚紅通常對(duì)含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生明顯影響,也可通過(guò)純化技術(shù)去除。新疆無(wú)血清培養(yǎng)基答疑解惑