南京正揚(yáng)生物自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理，提取純化生物制品中殘留的微量宿主細(xì)胞DNA/RNA，產(chǎn)品裝量為100reaction/盒，試劑組分包括樣品稀釋液、裂解液1、裂解結(jié)合液、磁珠懸浮液、洗滌液A、洗滌液B、洗脫液，裂解液1需放置于2-8℃儲(chǔ)存，其余組分均常溫儲(chǔ)存即可，切勿冷藏或冷凍。試劑盒有效期為12個(gè)月。在使用時(shí)，需自備金屬浴/水浴鍋、渦旋混勻器、掌上離心機(jī)、高速離心機(jī)等設(shè)備。
南京正揚(yáng)生物自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理，提取純化生物制品中殘留的微量宿主細(xì)胞DNA/RNA，產(chǎn)品使用事項(xiàng)包括以下幾點(diǎn)：1.磁珠懸浮液嚴(yán)禁冷凍和離心，以免損傷磁珠，磁珠使用前務(wù)必充分混勻。2.裂解液結(jié)合液、洗滌液A、洗滌液B在低于10℃時(shí)可能出現(xiàn)白色結(jié)晶，若出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)37℃水浴重新溶解后使用。3.請(qǐng)盡量在完成樣本純化處理當(dāng)天進(jìn)行后續(xù)的DNA檢測(cè)，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書，并嚴(yán)格按照操作步驟完成操作。 宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒的用途。寧波正揚(yáng)生物rcAAV核酸提取常見(jiàn)問(wèn)題
磁珠法核酸提取過(guò)程中的常見(jiàn)誤區(qū)--試劑使用的越多，提取效果越好裂解效果不好?多加點(diǎn)裂解液。洗滌效果不好?多加點(diǎn)洗滌液。這是很多客戶在使用試劑盒中的慣性思維。但是對(duì)于磁珠法而言，每增加一部分液體體積，就減少了更多的磁珠碰撞幾率，而降低磁珠碰撞幾率，會(huì)導(dǎo)致吸附率的大幅度下降。所以很多時(shí)候，雖然增加裂解液和洗滌液確實(shí)能夠起到增強(qiáng)裂解和增強(qiáng)洗滌的作用，但磁珠法提取的中心是磁珠吸附核酸的效率，無(wú)法保證磁珠碰撞效率是不能保證核酸提取效率的，所以單純?cè)黾釉噭┦褂昧扛纳铺崛⌒Ч⒉灰欢ㄍ耆?span style="color:#f5c81c;">有效。廣州復(fù)制型腺相關(guān)病毒核酸提取原理大腸桿菌殘留核酸提取。
磁珠法核酸提取過(guò)程中的常見(jiàn)誤區(qū)--樣品取用越多，提取效果越好在樣本不夠新鮮或者核酸含量本身就很少的情況下，往往核酸提取效果不好，很多老師就會(huì)采用多取樣本的方式增加核酸提取量。但簡(jiǎn)單地增加樣本取樣量，有時(shí)會(huì)引入過(guò)多的雜質(zhì)，超出裂解液裂解能力，也會(huì)使提取效率降低，所以并不推薦通過(guò)簡(jiǎn)單的增加樣本取樣量的方式來(lái)達(dá)到增加提取量的目的。如果確實(shí)是由于樣本量不足而引起的提取量過(guò)低，建議在前處理先經(jīng)過(guò)富集或者濃縮步驟再開(kāi)始提取?；蛘咴黾恿呀獾耐耆?，使更多的核酸暴露出來(lái)也是一種解決方法。
隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及，在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的如今，傳統(tǒng)核酸提取方法的局限愈來(lái)愈明顯，而磁珠法核酸提取的優(yōu)勢(shì)則愈來(lái)愈明顯：R能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作；R不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑，安全無(wú)毒完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；R與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。R操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短；R穩(wěn)定可靠：避免人工操作引起的差異及錯(cuò)誤，結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好；
傳統(tǒng)核酸提取方法和磁珠法核酸提取的優(yōu)缺點(diǎn)比較：傳統(tǒng)核酸提取法磁珠法技術(shù)簡(jiǎn)單高質(zhì)量、高通量手工提取自動(dòng)化流程操作繁瑣、費(fèi)時(shí)費(fèi)力免去了復(fù)雜的人工提取不適合大量樣品核酸提取減少酚類、氯仿等有機(jī)試劑對(duì)操作人員傷害不適合臨床分子診斷極大滿足如今對(duì)核酸提取效率的需求 Vero細(xì)胞殘留核酸提取。
磁珠法核酸提取常見(jiàn)問(wèn)題之磁珠結(jié)塊：導(dǎo)致磁珠結(jié)塊的可能原因：①磁珠吸附了過(guò)多雜質(zhì)，包括蛋白、脂質(zhì)、多糖等；②磁珠粒徑太??；③洗滌完畢，乙醇干燥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。④磁珠磁吸附時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；⑤操作中途含磁珠的樣品管離心速率過(guò)高、離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；磁珠結(jié)塊的解決辦法：①優(yōu)化裂解液、結(jié)合液配方，將雜質(zhì)裂解并充分消化；②選擇粒徑較大的微球；③縮短干燥時(shí)間；④控制磁珠吸附時(shí)間，磁分離時(shí)，待液體變澄清即可將液體吸棄，并及時(shí)將EP管從磁力架上取出；⑤操作過(guò)程中切勿高速或長(zhǎng)時(shí)間離心；宿主細(xì)胞殘留核酸提取相關(guān)操作步驟。寧波支原體DNA提取注意事項(xiàng)
病毒核酸提取試劑盒。寧波正揚(yáng)生物rcAAV核酸提取常見(jiàn)問(wèn)題
為什么原本效果很好的磁珠，換了一個(gè)核酸提取試劑盒效果就降低了？磁珠的種類是非常多的，粒徑大小不同，分散性不同，磁響應(yīng)時(shí)間不同，包被基礎(chǔ)基質(zhì)不同，外層修飾官能團(tuán)不同，包被密度不同，官能團(tuán)臂長(zhǎng)不同，會(huì)導(dǎo)致磁珠特性差異很大。所以不同磁珠所適應(yīng)的實(shí)驗(yàn)和體系也是不同的。在原有體系中表現(xiàn)優(yōu)異的磁珠，是經(jīng)過(guò)一系列篩選和方法摸索后，篩選出的蕞佳組合。如果將磁珠換入新的體系，出現(xiàn)提取效果降低也很正常。多數(shù)情況下，磁珠和試劑體系都要做一定時(shí)間的配合調(diào)整。寧波正揚(yáng)生物rcAAV核酸提取常見(jiàn)問(wèn)題