重組增強型綠色熒光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一種用于生物科學研究的工具。以下是重組EGFP的一些特點和應用:1.**高熒光強度**:EGFP比野生型GFP具有更強的熒光,這使得它在成像和檢測時更為敏感和有效。2.**改進的折疊效率**:EGFP在生理溫度(如37℃)下的折疊效率更高,這有助于在細胞內(nèi)快速形成成熟的熒光蛋白。3.**單一激發(fā)峰**:與野生型GFP相比,EGFP具有單一的激發(fā)峰,這簡化了成像條件的設置,并提高了信號的穩(wěn)定性。4.**適合多種生物系統(tǒng)**:EGFP可以用于多種生物系統(tǒng),包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞。5.**多功能性**:EGFP可以作為報告基因用于基因表達分析,也可以作為融合標簽用于蛋白質定位和動態(tài)研究。6.**非糖基化**:在大腸桿菌中表達的重組EGFP是非糖基化的,這有助于減少翻譯后修飾的復雜性。7.**純度高**:重組EGFP通常具有高純度,適合用于各種生物化學和分子生物學實驗。8.**穩(wěn)定性**:EGFP的熒光穩(wěn)定性好,適合長時間觀察和成像。9.**分子量**:重組EGFP的分子量約為26.9kDa,由239個氨基酸構成。E1通常被認為是泛素化過程中的限速步驟,因為它涉及到泛素的激起和ATP的水解。Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4 Protein,His-Avi Tag
重組人血清白蛋白(rHSA)是通過植物表達系統(tǒng)生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)級產(chǎn)品,在科研領域有著廣泛的應用。以下是rHSA在科研中的一些主要應用:1.**細胞培養(yǎng)**:rHSA是細胞培養(yǎng)中的重要成分,它可以作為血清替代品,促進細胞生長和維持細胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。由于其無動物源成分,可以減少血清中可能存在的病毒污染風險,適用于需要高生物安全性的細胞培養(yǎng)研究。2.**藥物載體**:rHSA因其良好的生物相容性和藥物結合能力,被用作藥物載體,有助于提高藥物的穩(wěn)定性、延長藥物的半衰期,并可能改善藥物的靶向性。3.**疫苗保護劑**:在疫苗開發(fā)中,rHSA可以用作保護劑,有助于提高疫苗的穩(wěn)定性和有效性。4.**細胞凍存保護劑**:rHSA在細胞凍存過程中起到保護作用,有助于提高細胞復蘇后的存活率。5.**醫(yī)療器械包埋劑**:在醫(yī)療器械領域,rHSA可以作為包埋劑,用于藥物洗脫支架或其他植入式醫(yī)療設備。6.**生物制藥**:rHSA在生物制藥生產(chǎn)中作為穩(wěn)定劑和保護劑,有助于提高蛋白質藥物的穩(wěn)定性和療效。7.**基因**:在基因領域,rHSA可能被用作基因載體,幫助基因傳遞至目標細胞。8.**化妝品添加劑**:在化妝品行業(yè),rHSA可能因其保濕和修復特性而被用作添加劑。Recombinant Human FLT3/Flk-2(His-Avi Tag)來源于 Thermococcus kodakaraensis,具有高熱穩(wěn)定性和校正能力,適用于長片段PCR和熱啟動PCR。
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩(wěn)定性是一個關鍵的挑戰(zhàn)。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩(wěn)定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩(wěn)定性的酶變體,同時監(jiān)測其催化活性,確保改造后的酶保持高效催化能力。2.**結構基礎的理性設計**:基于IdeSProtease的三維結構信息,識別可能影響穩(wěn)定性和活性的關鍵氨基酸殘基,通過點突變或小肽插入來優(yōu)化這些區(qū)域。3.**計算模擬**:利用分子動力學模擬和計算化學方法預測突變對酶穩(wěn)定性和活性的影響,以指導理性設計。4.**糖基化修飾**:通過糖基化可以增加酶的溶解性和穩(wěn)定性,但需注意不要干擾酶的活性位點或底物結合位點。5.**活性位點附近的柔性區(qū)域改造**:通過剛化柔性區(qū)域的策略提高酶的熱穩(wěn)定性,同時保持活性位點的柔性以維持催化活性。6.**長距離相互作用分析**:研究蛋白質內(nèi)部的長距離相互作用,識別影響穩(wěn)定性和活性的遠程突變,通過這些突變優(yōu)化酶的性能。7.**酶活性和穩(wěn)定性的權衡分析**:通過實驗數(shù)據(jù),分析酶活性和穩(wěn)定性之間的關系,找到比較好平衡點。
重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白,Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并與相同的膜受體相互作用。重組Exendin-4在體內(nèi)增強依賴葡萄糖的胰島素分泌,抑制不適當?shù)母咭雀叩难撬胤置?,并減慢胃排空。它還在體外和動物模型中促進β細胞增殖和新生。重組Exendin-4是通過大腸桿菌表達的合成DNA序列編碼的39個氨基酸的Exendin-4。重組Exendin-4的特點包括:-分子量約為4.2kDa,是一個非糖基化的單一多肽鏈,包含39個氨基酸。-具有調(diào)節(jié)血糖水平、減少胰島素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血紅蛋白(HbA1c)和刺激β細胞生長以促進胰島素產(chǎn)生等多種生物活性。-通常以凍干粉的形式提供,需要在無菌條件下用無菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水溶液復溶。-純度高于96%,通過SDS-PAGE和HPLC分析確定。-內(nèi)毒的素含量低于10EU/mg,通過LAL方法測定。在實驗中,可以通過以下方法來優(yōu)化重組Exendin-4的熒光特性:1.選擇合適的激發(fā)和發(fā)射波長。2.優(yōu)化激發(fā)和發(fā)射濾光片。3.評估熒光量子產(chǎn)率。4.調(diào)整緩沖液條件,包括pH值和離子強度。5.控制溫度和氧濃度。UBE2L3作為泛素化途徑中的關鍵酶,其在蛋白質降解、信號傳導、細胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。
重組人血清白蛋白(rHSA),特別是通過植物表達系統(tǒng)生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)級產(chǎn)品,以其高純度和質量一致性而受到科研和工業(yè)界的重視。以下是高純度rHSA的一些關鍵特點和意義:1.**純度標準**:高純度的rHSA通常意味著蛋白質含量達到99%以上,這通常通過高效液相色譜(HPLC)、SDS-PAGE電泳等方法進行驗證。2.**內(nèi)素水平**:內(nèi)素水平是衡量蛋白質純度的一個重要指標。高純度rHSA的內(nèi)素水平通常非常低(例如,≤0.5EU/ml),這有助于減少細胞培養(yǎng)中潛在的內(nèi)素污染。3.**宿主細胞蛋白(HCP)殘留**:高純度rHSA的宿主細胞蛋白殘留量非常低,這有助于減少細胞培養(yǎng)中外來蛋白的干擾。4.**無動物源成分**:由于rHSA是通過植物表達系統(tǒng)生產(chǎn)的,因此不含有動物源性成分,這降低了動物源性疾病傳播的風險。5.**批次一致性**:高純度rHSA的生產(chǎn)過程通常在嚴格控制的條件下進行,確保不同批次之間的質量一致性,這對于科學研究和商業(yè)生產(chǎn)至關重要。6.**應用廣**:高純度rHSA在細胞培養(yǎng)、生物制藥、藥物載體、疫苗開發(fā)等領域有著廣的應用。7.**安全性**:高純度rHSA的生產(chǎn)過程不涉及動物源材料,因此可以降低血源性疾病的風險,提高產(chǎn)品的安全性。在基因編輯過程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質量的單鏈或雙鏈DNA修復模板。Recombinant Human CDH11/Cadherin 11 Protein,His Tag
激發(fā)的泛素被轉移到泛素結合酶E2的活性位點半胱氨酸殘基上,形成E2-泛素硫酯中間體。Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4 Protein,His-Avi Tag
EndoS糖苷內(nèi)切酶S(Endo-S)的特異性主要體現(xiàn)在其對糖蛋白的糖鏈結構的識別和切割能力上。以下是Endo-S的一些關鍵特異性特點:1.**糖鏈識別**:Endo-S能夠特異性識別糖鏈結構中的某些特定序列或結構,尤其是N-連接糖鏈的殼二糖重要結構。2.**切割位點**:Endo-S在糖鏈的特定位點進行切割,通常是在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間的β-N-糖苷鍵。3.**不影響抗原性**:Endo-S的切割位點選擇性高,不會破壞糖蛋白的抗原決定簇,因此在某些應用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**應用多樣性**:Endo-S可以用于多種糖蛋白的去糖基化,包括抗體和其他具有N-連接糖鏈的蛋白質。5.**研究和藥物開發(fā)**:在研究糖蛋白的結構和功能時,Endo-S提供了一種工具來研究糖鏈對蛋白質性質的影響。此外,在藥物開發(fā)中,Endo-S用于制備糖鏈定點ADC化合物,通過精確控制藥物與抗體的連接點,提高藥物的療效和減少副作用。6.**兼容性**:Endo-S對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物,實現(xiàn)抗體糖基化修飾。7.**高效性**:Endo-S在催化糖鏈轉移或切割反應中表現(xiàn)出高效性,有助于實現(xiàn)高效獲得功能修飾的糖工程抗體。Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4 Protein,His-Avi Tag