Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-07-17

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術(shù)中,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域為ProteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結(jié)構(gòu)域為Tn5轉(zhuǎn)座酶,能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉(zhuǎn)座復合體后隨機插入靶DNA中。4.**應用廣**:適用于CUT&Tag技術(shù)、高通量測序建庫、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細胞、以及表觀遺傳學等研究領(lǐng)域。5.**操作簡便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟,可以在一步反應中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時。6.**低細胞投入量**:CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個細胞的樣本中獲得結(jié)果,甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結(jié)果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低??缒さ鞍椎目缒^(qū)域的相互作用是連接膜外環(huán)境與細胞內(nèi)環(huán)境的重要渠道。Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein,His Tag

Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein,His Tag,標準物質(zhì)

5'DNA腺苷?;噭┖械膯尾椒磻且环N高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據(jù)試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶)、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉(zhuǎn)移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷?;福@一步是為了防止后續(xù)的去腺苷?;F(xiàn)象,確保反應的穩(wěn)定性。4.**產(chǎn)物收集**:-由于轉(zhuǎn)化效率高,通常不需要進行凝膠純化步驟??梢酝ㄟ^乙醇沉淀等方法收集腺苷?;蟮腄NA產(chǎn)物。5.**產(chǎn)物應用**:-收集的腺苷?;疍NA可以直接用于后續(xù)的克隆、測序、連接或其他分子生物學實驗。6.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環(huán)境中進行,以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性,確保底物、酶和ATP的比例適當。單步反應的優(yōu)勢在于簡化了操作流程,減少了樣品處理的復雜性,并且由于高轉(zhuǎn)化效率,避免了耗時的純化步驟,從而節(jié)省了時間和成本。Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein,His Tag跨膜蛋白的表達與制備需要采用合適的表達載體、宿主細胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法,優(yōu)化表達和純化過程。

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1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)的逆轉(zhuǎn)錄過程是將RNA模板轉(zhuǎn)換成cDNA的過程。這個過程通常包括以下幾個步驟:模板RNA的準備:確保RNA模板的質(zhì)量和純度,可能需要使用DNase I來去除RNA樣品中的DNA污染。逆轉(zhuǎn)錄反應體系的配制:根據(jù)試劑盒的說明,將RNA模板、引物(如Oligo(dT)、隨機六聚體或基因特異性引物)、dNTPs、逆轉(zhuǎn)錄酶和緩沖液等組分混合在一起。逆轉(zhuǎn)錄酶的啟用:如果需要,可能要將反應體系預熱到一定溫度以達到逆轉(zhuǎn)錄酶。逆轉(zhuǎn)錄反應:在適宜的條件下,逆轉(zhuǎn)錄酶會根據(jù)RNA模板合成一條互補的DNA鏈。這個過程通常在一定的溫度范圍內(nèi)進行,以保證酶的活性和反應的效率。反應的終止:逆轉(zhuǎn)錄反應完成后,通常通過加熱到較高溫度來終止反應,以防止cDNA的進一步合成。產(chǎn)物的純化:合成的cDNA可能需要通過某些方法(如柱層析或沉淀)進行純化,以去除未反應的dNTPs、RNA模板和酶等。cDNA的檢測和應用:合成的cDNA可以用于后續(xù)的PCR、qPCR、克隆、測序等實驗。

dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的穩(wěn)定性是進行PCR和其他DNA合成實驗時的重要因素。以下是一些關(guān)于dNTPMix穩(wěn)定性的關(guān)鍵點:1.**儲存條件**:dNTPMix應儲存在-20°C的條件下,以保持其穩(wěn)定性和活性。2.**避免反復凍融**:dNTPMix應避免多次凍融,因為這可能會影響其穩(wěn)定性。3.**使用頻率**:如果使用頻率較高,使用后應以-20°C儲存。4.**長期儲存**:對于長期儲存或使用頻率較低的情況,建議將dNTPMix儲存在-70°C以保持好的狀態(tài)。5.**質(zhì)量控制**:dNTPMix應不含DNase和RNase,以避免DNA或RNA的降解。6.**純度**:dNTPMix的純度通常≥99%(HPLC檢測),確保了其在實驗中的可靠性。7.**pH調(diào)節(jié)**:dNTPMix通常用超純水配制,并通過高純度NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至約7.0,以保持其穩(wěn)定性。8.**有效期**:在適當?shù)膬Υ鏃l件下,dNTPMix的有效期通常為2年或更長時間。9.**使用注意事項**:使用dNTPMix時,應穿戴適當?shù)膶嶒炇曳雷o裝備,如實驗服和一次性手套,以確保操作安全。酵母重組表達N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達系統(tǒng)生產(chǎn)的酶。

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磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米分離技術(shù)和細菌細胞的SDS堿裂解法從菌體中提取高質(zhì)量質(zhì)粒DNA的實驗工具。以下是一些關(guān)于磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的關(guān)鍵信息:1.**操作簡便性**:-操作快速簡單,可以在60分鐘內(nèi)完成96個不同樣品的提取,實現(xiàn)質(zhì)粒提取的高通量化和自動化。2.**高純度和高產(chǎn)量**:-抽提得到的質(zhì)粒純度高,OD260/OD280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/OD230比值大于2.0,可以直接用于轉(zhuǎn)化、DNA測序、PCR和酶切等后續(xù)實驗。3.**試劑盒組件**:-包含BufferMP1、BufferMP2、BufferMP3、PureMagBeads、BufferMPB、TEBuffer(pH8.0)、RNaseA等組分。4.**應用范圍**:-適用于從大腸桿菌中抽提小量質(zhì)粒,所得質(zhì)??芍苯佑糜诩毎D(zhuǎn)染、DNA測序、PCR等實驗。5.**效率和純度**:-與同類產(chǎn)品相比,提取效率更高,獲得質(zhì)粒的純度更高;與柱式法相比,可減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒。6.**注意事項**:-例如,SgMagBeads需要充分洗滌和干燥,以保證無乙醇殘留,并且在吸取上清時避免吸入SgMagBeads。7.**保存條件**:-室溫保存,有效期一年。磁珠長期不使用時,可以4℃保存以延長保存時間。

在蛋白質(zhì)的晶體學研究中,去除糖鏈可以幫助獲得去糖基化的蛋白質(zhì),這有助于更清晰地解析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)。Cre重組酶

通過使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質(zhì)是否發(fā)生糖基化,以及糖基化位點。Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein,His Tag

dITP(脫氧肌苷三磷酸)在PCR(聚合酶鏈反應)擴增中的應用是特定和有限的。以下是dITP在PCR擴增中的一些關(guān)鍵點:1.**PCR擴增中的使用**:dITP可以在某些類型的PCR中替代部分dGTP,特別是在使用某些特殊的DNA聚合酶時,例如那些不具有校正(proofreading)功能的酶。2.**替代比例**:在PCR中,dITP通常不能完全替代dGTP,因為這樣做可能會抑制PCR擴增反應。通常推薦在PCR反應中使用10%的dITP來代替dGTP。3.**特殊DNA聚合酶**:某些高保真DNA聚合酶,如碧云天生產(chǎn)的Q6U?高保真DNA聚合酶,可以與dITP一起使用,以提高PCR擴增的特異性和效率。4.**dNTP/dITP混合物**:在一些PCR應用中,會使用dNTP/dITP混合物,其中包含2.5mM每種dNTP加上0.25mM的dITP,以優(yōu)化擴增條件。5.**PCR反應條件**:dITP的使用可能需要優(yōu)化PCR反應條件,包括退火溫度、Mg2+濃度和循環(huán)次數(shù)。6.**穩(wěn)定性和儲存**:dITP溶液應儲存在-20°C或更低的溫度下,以保持其穩(wěn)定性。使用時應避免多次凍融,以防止降解。7.**安全性和專業(yè)性**:dITP和其他PCR組分應由專業(yè)人員用于科研目的,不應在臨床診斷中使用。Recombinant Cynomolgus IL-2R beta/CD122 Protein,His Tag