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3C-like蛋白酶是中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)等其它冠狀病毒的繁殖過程中極為重要的蛋白酶。它已成為人類在抗冠狀病毒領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。本文基于計(jì)算生物學(xué)方法對與MERS-CoV同屬的蝙蝠冠狀病毒HKU4(HKU4-CoV)的43個(gè)肽類3C-like蛋白酶抑制劑分子,建立三維定量構(gòu)效關(guān)系(3D-QSAR)模型。在基于配體疊合的基礎(chǔ)上,發(fā)現(xiàn)比較分子相似性指數(shù)分析法(CoMSIA)中的四個(gè)場組合(位阻場、靜電場、氫鍵供體場與氫鍵受體場)為比較好的模型(Q2=0.522,Rncv2=0.996,Rpre2=0.904;Q2:交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù),Rncv2:非交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù),Rpre2:驗(yàn)證集分子的預(yù)測值相關(guān)系數(shù)),并借助該模型通過分子對接(docking)與分子動(dòng)力學(xué)(MD)方法闡明了配受體結(jié)合作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)基于比較好的CoMSIA模型基礎(chǔ)上的三維等勢圖形象地說明了分子基團(tuán)的位阻作用、靜電作用、氫鍵供體與氫鍵受體作用對分子生物活性的影響;(2)分子對接研究結(jié)果顯示了疏水性以及結(jié)晶水、氨基酸His166和Glu169在配體和受體結(jié)合過程中產(chǎn)生重要作用;跨膜蛋白的表達(dá)與制備需要采用合適的表達(dá)載體、宿主細(xì)胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法,優(yōu)化表達(dá)和純化過程。Recombinant Mouse PSMP Protein,hFc Tag
抑肽酶(Aprotinin),一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌(E. coli)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法,及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢。引言抑肽酶,又稱胰蛋白酶抑制劑,是一種小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究中,抑肽酶的使用對于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來源于動(dòng)物,如牛肺,但存在外源病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。因此,利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行重組抑肽酶的生產(chǎn),可以提供一種無動(dòng)物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建:人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達(dá)的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達(dá)菌株的構(gòu)建:通過轉(zhuǎn)化,將構(gòu)建好的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌宿主菌中,構(gòu)建表達(dá)菌株。發(fā)酵培養(yǎng):利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng),以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化:通過多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。Recombinant Rat TROP-2/TACSTD2 Protein,His Tag全長跨膜蛋白CB1它通過與G蛋白的相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的第二信使系統(tǒng),如cAMP水平。
RecombinantBiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProtein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)MHC;KRAS;K-Ras2;KRAS2;C-K-RAS;CFC2;K-RAS2A;K-RAS2B;K-RAS4A;K-RAS4B;KRAS1;KRAS2;NS;NS3;RASK2;GTPaseKras;KI-RAS;RALD表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-TerminusItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*03:01),Ile21-Met119(B2M)andVVGAVGVGKpeptide.[Accession|NP_002107.3(HLA-A*03:01)&P61769(B2M)&VVGAVGVGK]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.09kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto51-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).
ERBB3,又稱HH3(人表皮生長因子受體3),是一種I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受體ERBC家族的成員。ERBP家族成員作為表皮生長因子(LU)家族的生長因子的受體。在ERBP家庭成員中,因?yàn)樗幸粋€(gè)缺陷的激酶域。ERBB3在角化細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、成肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞中都有表達(dá)。單體ERbb3是一種低親和性的受體。ERBB3與ERBB2的異聚反應(yīng)形成高親和性受體復(fù)合物。與此相反,ERBB3同向聚合或異向聚合形成了一個(gè)低親和性的結(jié)合物。因?yàn)镋RBB3含有一個(gè)有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域負(fù)責(zé)通過異二重瓣受體啟動(dòng)酪氨酸磷酸化信號。研究發(fā)現(xiàn),ERBB3細(xì)胞質(zhì)區(qū)內(nèi)的三個(gè)離散氨基酸信號對ERBB2的轉(zhuǎn)導(dǎo)至關(guān)重要。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)重組的人HR3/ERBB3蛋白表達(dá)自于C-端的HK293細(xì)胞和AVI標(biāo)記。里面有血清20-Thr643。分子量大約71.6研究泛素-蛋白酶體途徑:重組人泛素可用于研究泛素化修飾和蛋白降解過程。
糖苷內(nèi)切酶H是一種重組糖苷酶,能夠?qū)-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。糖苷內(nèi)切酶H克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重組表達(dá)。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括糖苷內(nèi)切酶S(Cat#20413ES),酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。儲存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2,8μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入1-2μL的EndoH,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。5)65℃下熱失活10分鐘。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至終體積為20μL。2)加入2~5μL的EndoH,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加EndoH的量和延長孵育時(shí)間。全長跨膜蛋白是一類特殊的蛋白質(zhì),它們嵌入在細(xì)胞膜的磷脂雙分子層中,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)外的跨越。Recombinant Human CD55 Protein,His Tag
透明質(zhì)酸以其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮多種重要的生理功能,如潤滑關(guān)節(jié)、調(diào)節(jié)血管壁的通透性。Recombinant Mouse PSMP Protein,hFc Tag
RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.儲存條件Theproductshouldbestoredat-25~-15℃for1yearfromdateofreceipt.2-7days,2~8°Cundersterileconditionsafterreconstitution.Recombinant Mouse PSMP Protein,hFc Tag