原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型是一種常用的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停糜谘芯扛渭?xì)胞的生物學(xué)特性和功能。原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型具有許多優(yōu)點(diǎn)。首先，該模型可以提供一定量的原代肝細(xì)胞，使研究人員能夠進(jìn)行大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。其次，該模型提供了一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境，使研究人員能夠更好地控制原代細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，以及研究肝細(xì)胞在不同條件下的反應(yīng)和功能。此外，該模型還提供了一種簡(jiǎn)單、快速和經(jīng)濟(jì)的方法，用于評(píng)估藥物的毒性和療效，以及研究原代肝細(xì)胞在不同疾病狀態(tài)下的反應(yīng)和功能。原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型也存在一些限制。首先，該模型只能提供有限的原代肝細(xì)胞數(shù)量，因?yàn)樵渭?xì)胞在體外的壽命較短，容易失去其生物學(xué)特性和功能。其次，該模型無(wú)法完全模擬肝臟在體內(nèi)的復(fù)雜環(huán)境，因此可能無(wú)法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)原代肝細(xì)胞在體內(nèi)的反應(yīng)和功能。此外，該模型也存在一些技術(shù)挑戰(zhàn)，如原代肝細(xì)胞分離和培養(yǎng)條件的優(yōu)化等。原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型是一種重要的實(shí)驗(yàn)方法，可以用于研究原代肝細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能，以及評(píng)估藥物的毒性和療效。雖然存在一些限制，但該模型仍然是原代肝細(xì)胞研究的重要工具之一。立沃生物科技有限公司原代肝細(xì)胞是從健康肝臟中提取后體外培養(yǎng)的，保留了肝臟的酶水平和功能。深圳新西蘭兔原代肝細(xì)胞
原代肝細(xì)胞的來(lái)源供體來(lái)源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問(wèn)題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來(lái)體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外，也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的供體數(shù)，分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究：①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究；②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用；③研究藥物的細(xì)胞毒性等。深圳新西蘭兔原代肝細(xì)胞原代肝細(xì)胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病，從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展，為其攻克提供可能。
貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng)，形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn)： 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞：從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后，需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè)，確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng)，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng)：將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是，原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過(guò)在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來(lái)達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。
如何提升原代肝細(xì)胞的活率一直是個(gè)很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細(xì)胞的特殊性質(zhì)，它們的活率和得率往往比一般細(xì)胞低，這給研究工作帶來(lái)了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細(xì)胞的活率和得率，我們可以采取以下措施： 1.優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件：原代肝細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)條件非常敏感，因此我們需要針對(duì)不同的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?yōu)化培養(yǎng)條件，包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細(xì)胞來(lái)源：原代肝細(xì)胞可以從不同的來(lái)源獲得，如人體肝臟組織、動(dòng)物肝臟組織等，我們需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的細(xì)胞來(lái)源。 3. 優(yōu)化細(xì)胞分離方法：原代肝細(xì)胞的分離方法也會(huì)影響細(xì)胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法，如機(jī)械分離、酶消化等，選擇適合的方法來(lái)分離細(xì)胞。 4. 使用適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞類型需要不同的培養(yǎng)基，我們需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基。同時(shí)，我們還可以添加一些生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子來(lái)促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。 5. 保持細(xì)胞的穩(wěn)定性：定期更換培養(yǎng)基、避免過(guò)度培養(yǎng)等。 提高原代肝細(xì)胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個(gè)因素，包括細(xì)胞培養(yǎng)條件、細(xì)胞來(lái)源、細(xì)胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。懸浮肝細(xì)胞主要應(yīng)用于藥物代謝研究，一般使用多供體混合懸浮肝細(xì)胞，適用于試驗(yàn)周期比較短的實(shí)驗(yàn)。
在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，如何避免污染？在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，避免污染是非常重要的，以下是一些避免細(xì)胞污染的方法：1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前，需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌處理，并在操作過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無(wú)菌技術(shù)：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要使用無(wú)菌技術(shù)，例如使用無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌吸管、無(wú)菌手套等，以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔：培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備，并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng)：在培養(yǎng)過(guò)程中，需要控制人員流動(dòng)，盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室，以避免污染。5.使用無(wú)菌培養(yǎng)基：使用無(wú)菌培養(yǎng)基可以避免培養(yǎng)基中的細(xì)菌和其他微生物的污染。6.定期檢查：定期檢查培養(yǎng)物的生長(zhǎng)情況和污染情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理污染。 立沃原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)服務(wù)，包括細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析等。廣州鴨原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞擁有肝臟的特性和功能，可用于研究肝臟疾病的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞增殖，是有效的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。深圳新西蘭兔原代肝細(xì)胞
原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究領(lǐng)域非常重要的體外模型。原代肝細(xì)胞作為藥物代謝和藥物毒理研究的經(jīng)典模型，在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動(dòng)力學(xué)的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細(xì)胞共孵育，不但可對(duì)化合物在肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性進(jìn)行研究，而且還可得到相對(duì)多量的高純度的代謝產(chǎn)物，在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征，尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢(shì)。尤其是當(dāng)有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時(shí)候，原代肝細(xì)胞更為不可替代的體外模型。深圳新西蘭兔原代肝細(xì)胞