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歐易生物高級技術(shù)支持陳老師首先給大家介紹了空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的發(fā)展歷程、測序流程及原理。緊接著,歐易生物技術(shù)支持姚老師針對目前空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)表的一系列高分文章進行了方案設(shè)計的解析。姜老師給大家詳細介紹了空間轉(zhuǎn)錄組項目樣本準備、切片、貼片等實驗過程及注意事項,并帶領(lǐng)大家到實驗室實地觀摩了整個實驗過程,并就其中細節(jié)進行了講解。董老師針對空間轉(zhuǎn)錄組10x Space Ranger的分析原理及結(jié)果進行了詳細解析,并介紹了使用Seurat包進行數(shù)據(jù)挖掘的標準分析流程??臻g轉(zhuǎn)錄組細胞通訊分析方法簡介及實操。江蘇歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格
廣義上來說,目前一共有4種解析“空間性轉(zhuǎn)錄組”的策略:2.第一種是利用計算機算法,根據(jù)單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)來模擬重構(gòu)組織的空間形態(tài)。例如Seurat,這是一個在單細胞數(shù)據(jù)分析中***用到的R包,我們可以利用scRNA-seq數(shù)據(jù),加上對markegene進行原位測序的結(jié)果來重構(gòu)組織的空間信息。3.第二種,激光顯微切割+二代測序(LCM+NGS)。這種技術(shù)對儀器和實驗人員的操作要求較高,而且獲取的通量也比較低,如果組織非常珍貴或者研究的內(nèi)容十分精細,可以考慮這個。但是這種策略比較難被官方干運用。4.第三種策略,就是基于高分辨圖像的原位測序。**經(jīng)典的是smFISH當然,這種方法的通量比較低。當然隨著技術(shù)的發(fā)現(xiàn),剛發(fā)布的FISH-seq技術(shù)通過多輪雜交的方式,已經(jīng)把測序通量提高到了10000+個轉(zhuǎn)錄本。5.***就是“基于空間條形碼(spatialbarcodes)的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)。本文主要討論的也就是這種技術(shù)。后面主要討論的都是基于這種策略。 江蘇歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)主要包括 MERFISH 和 seqFISH。
10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)的準確性高嗎?下圖是一個將10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)應(yīng)用于小鼠海馬體研究的案例。A圖為腦組織切片的HE染色結(jié)果,從10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果中,可以清晰看到Tmsb4x(B圖)和Selenow(C圖)在海馬體區(qū)域高表達,和已知的研究結(jié)果一致性較高。開展10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組需要做哪些準備?空間轉(zhuǎn)錄組是一項十分前沿的技術(shù),涉及到很多細節(jié)方面的準備工作,例如組織類型的選擇、前期預(yù)實驗的設(shè)計、病理區(qū)域的確認等一系列內(nèi)容。而且實驗中存在很多不確定性因素,處理不慎容易導(dǎo)致整個項目失敗。
空間轉(zhuǎn)錄組的方法和技術(shù)有哪些?廣義上講,現(xiàn)有的生成空間分辨轉(zhuǎn)錄組學(xué)的方法可分為四類:用于空間重建的計算策略和組學(xué)實驗的組合,使用激光捕獲顯微切割(LCM)結(jié)合高通量進行直接測量,使用熒光物質(zhì)的基于圖像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué) ,以及基于寡核苷酸的空間條形碼再加上高通量。每種方法都有其優(yōu)點和缺點??臻g重構(gòu)的計算策略:這種計算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中重構(gòu)細胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局。基于LCM的方法:基于LCM的轉(zhuǎn)錄組學(xué)或基因組學(xué)成功地獲得了單個細胞的空間轉(zhuǎn)錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復(fù)用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構(gòu)成***的巨大背景中,可能具有一定價值?;趫D像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué):基于圖像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué)在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉(zhuǎn)錄本積累等復(fù)雜背景中提取單個細胞??臻g條形碼加高通量:費用較高且無法在單個細胞中獲得轉(zhuǎn)錄組。Cell上發(fā)表了一篇利用空間轉(zhuǎn)錄組解析人鱗狀細胞*的文章。
人類細胞圖譜項目的主要目標之一是描述所有細胞類型的空間關(guān)系。同時基于表達特征對多種細胞類型進行空間映射,有助于研究不同細胞類型之間的相互作用。已經(jīng)發(fā)展了一些策略來檢測單細胞分辨率的空間基因表達譜,如Slide-seq、seqFISH或MERFISH。為了更有效地為研究群體探索空間基因表達數(shù)據(jù),我們構(gòu)建了SpatialDB數(shù)據(jù)庫用于空間解析的轉(zhuǎn)錄組。
人類細胞圖譜項目極大地推動了單細胞水平的生命科學(xué)研究??臻g轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)的發(fā)展和空間基因表達數(shù)據(jù)的快速積累是未來的發(fā)展趨勢。我們將繼續(xù)收集新的技術(shù)和數(shù)據(jù)集來更新SpatialDB。此外,我們將整合更多的工具和數(shù)據(jù)源來分析數(shù)據(jù). 空間轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術(shù),從而解析單個組織切片中的所有mRNA。天津應(yīng)用空間轉(zhuǎn)錄組
空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失。江蘇歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格
空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)原理是什么?當組織冷凍切片附在空間轉(zhuǎn)錄組載片上時,條形碼引物結(jié)合并從組織中捕獲鄰近的mRNA。被捕獲的mRNA開始逆轉(zhuǎn)錄,得到的cDNA中包含了空間條形碼。分析Illumina測序結(jié)果中空間條形碼的序列,可以將每個mRNA轉(zhuǎn)錄的序列映射回組織切片中的起始位置??臻g轉(zhuǎn)錄組的條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,空間轉(zhuǎn)錄組使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。江蘇歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家服務(wù)型的公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等,價格合理,品質(zhì)有保證。公司秉持誠信為本的經(jīng)營理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點,發(fā)揮人才優(yōu)勢,打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗,為客戶成功提供堅實有力的支持。