酵母雙雜交篩選實驗:為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗。安徽發(fā)展酵母文庫做什么
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實驗、不停的花費(fèi)時間驗證而頭禿了。遼寧運(yùn)用酵母文庫酵母雙雜交原理 酵母雙雜...。
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補(bǔ)成像實驗結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制,本研究建立了一個新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強(qiáng)了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。
通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 E-L)證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。歐易生物酵母文庫項目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動子中的順勢作用元件功能進(jìn)行分析,并對DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。酵母三雜交系統(tǒng)原理酵母雙雜交文庫構(gòu)建。山東篩庫酵母文庫報價
歐易生物提供的酵母雜交技術(shù)服務(wù)已經(jīng)協(xié)助科研用戶發(fā)表了Science、Cell、PNAS等多家前列期刊雜志。安徽發(fā)展酵母文庫做什么
酵母文庫實驗:本研究報道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。安徽發(fā)展酵母文庫做什么
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、咨詢、規(guī)劃、銷售、服務(wù)于一體的服務(wù)型企業(yè)。公司成立于2009-03-10,多年來在科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢行業(yè)形成了成熟、可靠的研發(fā)、生產(chǎn)體系。在孜孜不倦的奮斗下,公司產(chǎn)品業(yè)務(wù)越來越廣。目前主要經(jīng)營有科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等產(chǎn)品,并多次以醫(yī)藥健康行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、客戶需求定制多款多元化的產(chǎn)品。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司每年將部分收入投入到科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢產(chǎn)品開發(fā)工作中,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用。公司在長期的生產(chǎn)運(yùn)營中形成了一套完善的科技激勵政策,以激勵在技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品改進(jìn)等。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司嚴(yán)格規(guī)范科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢產(chǎn)品管理流程,確保公司產(chǎn)品質(zhì)量的可控可靠。公司擁有銷售/售后服務(wù)團(tuán)隊,分工明細(xì),服務(wù)貼心,為廣大用戶提供滿意的服務(wù)。