大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL;死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同,樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計,加快處理速度;反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法,是非常方便的工具。 特別推薦的應用: 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養(yǎng)上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清超濾濃縮管的系列有很多種。江蘇Mer...
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結構緊密,確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關于蛋白沉淀問題的解釋。上海超濾濃縮管代理銷售哪家好?Millipore超濾濃縮管報價將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. ...
蛋白復性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時內即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優(yōu)點: 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質,增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設計,易于打開和關緊 硬管設計,易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標準***頭加樣,而非注射器和...
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應用。這種離心超濾管流速很快,設計緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點與應用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標準的50mL離心管吊籃式轉子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)基、細胞裂解液中分 離低分子量溶質超濾濃縮管零售多少錢呢?Merck離心濃縮管聯系電話經典離心濃縮裝置 ...
無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應抗體的磁珠進行親...
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應用。這種離心超濾管流速很快,設計緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點與應用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標準的50mL離心管吊籃式轉子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)基、細胞裂解液中分 離低分子量溶質超濾濃縮管的好處有很多。徐匯區(qū)濃縮管聯系電話通量(超濾效率)及其影響因素...
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...
膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優(yōu)先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不...
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用,如暫時不用,請保持潤濕狀態(tài),避免重新干燥。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。普...
Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用...
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設計,一經推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物,抑或低濃度樣品或寶貴的活性樣品,Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 這款Amicon Ultra 15 mL離心式過濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優(yōu)點: 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設計 2...
微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據 NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時...
創(chuàng)新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統 Amicon? Pro 純化超濾系統 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險,減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間,默克密理博的研發(fā)團隊創(chuàng)新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數據穩(wěn)定易得。 開放的設計使您可以根據實際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。超濾濃縮管和其他的空壓機有什么區(qū)別呢?青浦區(qū)默克15m...
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關于蛋白沉淀問題的解釋。上海超濾濃縮管供應商。南京離心濃縮管咨詢問價超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分...
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個濃度。其次,如果問題仍然出現,請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內?如果使用的是rpm,請換算成相應的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機**近是否有校準過? d)是否***嘗試這個蛋白?上海超濾濃縮管供應商。徐匯區(qū)超濾濃縮管訂購高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使...
樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC(0.5mL)和Ultrafree?-CL(2mL)是一次性使用的微濾離心管,可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經經過無菌處理的產品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復性很好,是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點與優(yōu)點 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產品 過濾速度快,數據穩(wěn)定...
提供的超濾管是沒有經過去內***處理的,同時由于內***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的??稍趯嶒炃巴ㄟ^先用0.5M NaOH預清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...
特點與優(yōu)點: 特別的反轉離心回收設計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,沒有死體積,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實際應用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結合率分析等等。超濾濃縮管批發(fā)價格是多少呢。奉賢區(qū)默克15ml超濾濃縮管訂購截留 截留...
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 用Protei...
首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個濃度。其次,如果問題仍然出現,請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內?如果使用的是rpm,請換算成相應的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機**近是否有校準過? d)是否***嘗試這個蛋白?益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。寶山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管批發(fā)用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預切超濾...
多臺同時操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺操作連接裝置可以同時運行多達3個超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對在有機溶劑中的樣品進行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會降低碳氟化合物材質 O 形圈的使用壽命。 特點與優(yōu)點: 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學兼容性超濾膜 可預裝膜后進行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預切膜片 應用: 帶有有機成分的樣品的濃縮、換液上海超濾濃縮管供應...
特點與優(yōu)點: 高產:沒有樣品轉移,損失更少 溫和:特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液根據您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設計。寶山區(qū)默克離心濃縮管銷售這種小管適合在1.5mL離...
對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產品使用說明書。另提供AAV(腺相關***)的制備方法供參考。 去污劑因其獨特的性質,當濃度大于臨界微團濃度(Critical Micelle Concentration, CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構象,這有可能會影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q?水預清洗。如果干擾仍然存在,用0.1 N N...
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節(jié)省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構...
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra ...