單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌，通過(guò)酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫(kù)。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過(guò)程，以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中， MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子，由于其在草莓中的同源基因已被報(bào)導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān)，引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過(guò)Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動(dòng)子互作（圖2A）。通過(guò)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1...

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根長(zhǎng)抑制分子機(jī)制研究，近日，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者，在 Journal of Experimental Botany 雜志（IF： 6.992）在線發(fā)表了題為“小麥短根長(zhǎng)度 1文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個(gè)新的 ERF 轉(zhuǎn)錄因子基因 TaSRL1 （SHORT ROOT LENGTH 1），該基因主要在根中表達(dá)。綜上，本研究證明了 TaSRL1 在生長(zhǎng)素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子，并通過(guò)與 TaTIFY9 相互作用，整合生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，抑制根的生長(zhǎng)。TaSRL1-4...

酵母雙雜交（Y2H）：植物轉(zhuǎn)錄因子（Plant transcripter factors， TFs）是調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫(kù)中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以預(yù)測(cè)水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過(guò)具體實(shí)驗(yàn)研究，來(lái)直接證實(shí)轉(zhuǎn)錄因子對(duì)植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交（Y2H）和酵母單雜交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-...

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá)，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中，***GL1過(guò)表達(dá)后，與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍，說(shuō)明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解，但并沒有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):MAPK級(jí)聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中的關(guān)鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級(jí)聯(lián)的重要目標(biāo)，在植物對(duì)各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應(yīng)炭疽菌入侵，將信號(hào)傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)，以及哪個(gè)轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由蘋果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個(gè)易感蘋果種質(zhì)中，MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個(gè)耐受蘋果種質(zhì)，同時(shí)對(duì)應(yīng)的水楊酸含量降低，證實(shí)了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。...

酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)：為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長(zhǎng)和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制，本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料，構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫(kù)。并以GhLEA3為誘餌，采用酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，從棉花酵母文庫(kù)中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白，并對(duì)互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析，發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號(hào)通路和cGMP-PKG信號(hào)通路，互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑，如糖原生成和代謝途徑。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***，且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株文庫(kù)篩選經(jīng)驗(yàn) 與上千所高校及科研院所合作 完成年均400多...

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個(gè)成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長(zhǎng)素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá)，并與生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動(dòng)子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá)，進(jìn)而抑制根的生長(zhǎng)。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對(duì) TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長(zhǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，負(fù)調(diào)控根的伸長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥育種過(guò)程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母文庫(kù)篩庫(kù)歐易生物。貴州什么是酵母文庫(kù)做什么歐易酵母文庫(kù)助力蘋果花青素合成調(diào)控機(jī)制研究。...

酵母單雜交測(cè)試：為驗(yàn)證該文庫(kù)在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)，進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌，進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫(kù)篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫(kù)菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫(kù)質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外，可通過(guò)降低篩選壓力處理，進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。酵母...

本研究通過(guò)酵母雙雜交篩選，鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合，共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外，HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合，將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置，調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)，進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長(zhǎng)據(jù)此，本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制：CRY1 通過(guò)增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集，共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積，以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光...

利用酵母文庫(kù)進(jìn)行雙雜交篩選，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號(hào)阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對(duì)于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對(duì)一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過(guò) GST pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示，與對(duì)照相比，MdRGL3a 與過(guò)表達(dá) MdBT2 ...

本研究通過(guò)酵母雙雜交篩選，鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合，共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外，HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合，將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置，調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)，進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長(zhǎng)據(jù)此，本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制：CRY1 通過(guò)增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集，共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積，以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光...

酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長(zhǎng)，且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細(xì)胞，要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個(gè)問(wèn)題，波士頓大學(xué)的研究者，使用酵母單雜交篩選技術(shù)，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動(dòng)子和增強(qiáng)子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)（包含1086個(gè)人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年...

利用酵母文庫(kù)進(jìn)行雙雜交篩選，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號(hào)阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對(duì)于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對(duì)一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過(guò) GST pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示，與對(duì)照相比，MdRGL3a 與過(guò)表達(dá) MdBT2 ...

進(jìn)行了酵母雙雜交文庫(kù)的篩選，結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用，分段截取互作驗(yàn)證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的（圖a-b），并通過(guò)雙熒光分子互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)、BiFC、體外GST-pulldown實(shí)驗(yàn)得以證實(shí)（圖c-e）。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá)，共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核（圖f），表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運(yùn)輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá)，在5DAF開始***，并在10-30DAF維持高...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個(gè)可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。酵母雙雜交文庫(kù)構(gòu)建實(shí)驗(yàn)流程。安徽運(yùn)用酵母文庫(kù)酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病...

酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對(duì)照相比，擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低，而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長(zhǎng)，外源施加GA可以回復(fù)其生長(zhǎng)缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度，而PAC處理則會(huì)抑制這種生長(zhǎng)的促進(jìn)作用。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長(zhǎng)，而硝酸鹽處理和MdBT2過(guò)表達(dá)則會(huì)緩解這種生長(zhǎng)抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對(duì)植株生長(zhǎng)的影響（圖A-D）。以上結(jié)果表明，BT蛋白通過(guò)DELLA蛋白調(diào)控植株生長(zhǎng)，這一機(jī)制在不同的植物中具有保守性。smart酵母建庫(kù)和gateway酵母建庫(kù),滿足各類客戶的需求。重慶運(yùn)用酵母文庫(kù)做什么...

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個(gè)成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長(zhǎng)素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá)，并與生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動(dòng)子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá)，進(jìn)而抑制根的生長(zhǎng)。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對(duì) TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長(zhǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，負(fù)調(diào)控根的伸長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥育種過(guò)程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的一種研究核酸。上海酵母文庫(kù)質(zhì)量酵母雙雜交文庫(kù)：瘧...

酵母文庫(kù)：近日，上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所儲(chǔ)黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者，在Plant，Cell&Environment雜志（IF：7.228）在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent，OsSCYL2，regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文，報(bào)道了水稻中一個(gè)被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個(gè)重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機(jī)制。上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。文庫(kù)篩選經(jīng)驗(yàn) 與上千所高校及科研...