酵母單雜交篩選:(4)在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,***GL1促進HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá),并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中,***GL1過表達(dá)后,與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍,說明***GL1是一個轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是,文章的背景介紹內(nèi)容中,對應(yīng)用其他技術(shù)(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)對HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解,但并沒有直接評估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)(如Chip-seq、motif預(yù)測)進行了比較分析,發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對已識別因子的驗證率為30-60%,同等或優(yōu)于其他技術(shù)。合作文章上百篇,平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文庫。江西酵母文庫
蛋白被泛素化后(即蛋白上結(jié)合了泛素),意味著將要被運往蛋白酶體降解,一般用于降解細(xì)胞內(nèi)老弱病殘蛋白,再回收利用。同時也被用于排除異己,抵御外敵。該過程需要一系列酶介導(dǎo):泛素***酶(E1)、泛素偶聯(lián)酶(E2)和泛素E3連接酶(E3)。其中E3是起特異性識別作用的,即決定誰該被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四種類型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**豐富的E3連接酶。本研究中,通過酵母雙雜交篩選到的標(biāo)題蛋白MdBT2,整好是CRLs亞家族之一。因此作者推測MdBT2可能在與ApNMV1a結(jié)合后,起到了促進其泛素化和降解的作用。江西酵母文庫專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗。
通過酵母雙雜交進行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 E-L)證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。
利用酵母雙雜交技術(shù)進行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證(圖A-C)。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實驗表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。進口試劑高服務(wù)質(zhì)量市場份額大酵母文庫。
酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍(lán)光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。酵母文庫已知蛋白互作靈活定制建庫。江西酵母文庫
酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測的技術(shù)。江西酵母文庫
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。2021年5月,北京林業(yè)大學(xué)鈕世輝副教授為通訊作者,在PlantPhysiology雜志(IF:6.902)在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文,深入探討了油松中營養(yǎng)生長-生殖生長時相轉(zhuǎn)變調(diào)控的分子機制。北京林業(yè)大學(xué)馬晶晶博士為***作者,文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。本研究通過 7 個樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測序,鑒定到一個與年齡信號***相關(guān)的基因模塊,該模塊包含 33 個轉(zhuǎn)錄因子,包括 SOC1-like、DAL1 等。江西酵母文庫
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實、誠實可信的企業(yè)。歐易生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢。歐易生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。歐易生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿足市場需求,提高產(chǎn)品價值,是我們前行的力量。