濟(jì)南乙酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)主要方式

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)：蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一。磷酸化修飾本身所具有的簡(jiǎn)單、靈活、可逆的特性，以及磷酸基團(tuán)的供體ATP的易得性，使得磷酸化修飾被真核細(xì)胞所選擇接受成為一種比較普遍的調(diào)控手段。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化這一可逆過(guò)程，幾乎調(diào)節(jié)著包括細(xì)胞的增殖、發(fā)育、分化、細(xì)胞骨架調(diào)控、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)活動(dòng)、肌肉收縮、新陳代謝發(fā)生等生命活動(dòng)的所有過(guò)程，并且可逆的蛋白質(zhì)磷酸化是目前所知道的比較主要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式。目前已經(jīng)知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起，而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導(dǎo)致的后果。泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位。濟(jì)南乙?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)主要方式

翻譯后修飾蛋白組：翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學(xué)水平上對(duì)存在翻譯后修飾的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細(xì)胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾（Post Translational Modifications, PTMs）是蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后經(jīng)歷的一個(gè)共價(jià)加工過(guò)程。蛋白翻譯后修飾通過(guò)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上加修飾基團(tuán)或通過(guò)蛋白質(zhì)水解去基團(tuán)而改變蛋白質(zhì)的性質(zhì)，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能。經(jīng)過(guò)翻譯后修飾的蛋白質(zhì)稱為翻譯后修飾蛋白。目前，已知的蛋白質(zhì)翻譯后修飾主要包括糖基化、磷酸化、乙?；?、泛素化、二硫鍵配對(duì)、甲基化和亞硝基化等等。棕櫚酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)糖基化指碳水化合物通過(guò)共翻譯或翻譯后修飾的方式附著到蛋白質(zhì)上的過(guò)程。

蛋白質(zhì)乙?；揎楄b定流程：1. 組織/細(xì)胞破碎，提取、提純目的蛋白質(zhì)。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段。3. 使用高效特異性乙?；贵w對(duì)乙?；揎楇亩芜M(jìn)行免疫富集。4. 使用LC-MS/MS對(duì)富集的乙?；亩芜M(jìn)行鑒定分析。5. 數(shù)據(jù)分析，并對(duì)鑒定的乙酰化位點(diǎn)的生物學(xué)功能進(jìn)行解釋預(yù)測(cè)。隨著蛋白質(zhì)組研究的發(fā)展，我們?cè)絹?lái)越深刻地意識(shí)到，對(duì)于生物體生命活動(dòng)的管理和調(diào)控過(guò)程，密切相關(guān)的不只是單個(gè)蛋白質(zhì)層面的修飾狀態(tài)，更重要的是研究蛋白質(zhì)組學(xué)水平研究在翻譯后修飾的動(dòng)態(tài)變化。高質(zhì)、高效的蛋白質(zhì)翻譯后修飾富集技術(shù)和豐富的、準(zhǔn)確的定量手段使得研究蛋白質(zhì)水平的翻譯后修飾組學(xué)成為現(xiàn)實(shí)，借助這些組學(xué)研究手段能夠?qū)崿F(xiàn)不同生理病理狀態(tài)下生物樣本在翻譯后修飾水平上的定量比較，深入地揭示翻譯后修飾水平的波動(dòng)與生物生命活動(dòng)的密切聯(lián)系。

翻譯后修飾蛋白組學(xué)分析：在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過(guò)程中，蛋白會(huì)首先被酶切成肽段，然后進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行分析。通過(guò)質(zhì)譜分析，得到的是一系列肽段的分子質(zhì)量信息。對(duì)于某一個(gè)特定肽段而言，在沒(méi)有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下，其序列信息和分子量是確定的。當(dāng)它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后，例如磷酸化修飾，由于序列信息和分子量是確定的，磷酸根的分子量也是確定的。在質(zhì)譜檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個(gè)磷酸根的分子量，假設(shè)這個(gè)肽段就發(fā)生了磷酸化修飾，再通過(guò)二級(jí)質(zhì)譜圖進(jìn)行二次確認(rèn)。蛋白質(zhì)翻譯后修飾可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)。

蛋白質(zhì)乙?；揎椊M學(xué)定量分析：1. SILAC細(xì)胞標(biāo)記，組織/細(xì)胞破碎，提取、提純目的蛋白質(zhì)（基于SILAC的乙?；揎椊M學(xué)定量）。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段。3. 對(duì)多肽片段進(jìn)行iTRAQ標(biāo)記（基于iTRAQ的乙酰化修飾組學(xué)定量）。4. 使用高效特異性乙酰化抗體對(duì)乙?；揎楇亩芜M(jìn)行免疫富集。5. 使用LC-MS/MS對(duì)富集的乙酰化肽段進(jìn)行序列分析。6. 數(shù)據(jù)分析，比對(duì)不同樣本中蛋白乙?；揎椝讲町?，并對(duì)產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進(jìn)行解釋。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在蛋白質(zhì)中磷酸化位點(diǎn)分析時(shí)應(yīng)該注意些什么問(wèn)題？江蘇氧化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)分析價(jià)格

蛋白質(zhì)磷酸化修飾鑒定方法有免疫印跡技術(shù)。濟(jì)南乙酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)主要方式

蛋白質(zhì)翻譯后修飾有什么生物學(xué)意義？可以使蛋白質(zhì)具有生物活性，可以發(fā)揮相應(yīng)的功能。翻譯是蛋白質(zhì)生物合成（基因表達(dá)中的一部分，基因表達(dá)還包括轉(zhuǎn)錄）過(guò)程中的第二步（轉(zhuǎn)錄為第1步），翻譯是根據(jù)遺傳密碼的中心法則，將成熟的信使RNA分子（由DNA通過(guò)轉(zhuǎn)錄而生成）中“堿基的排列順序”（核苷酸序列）解碼，并生成對(duì)應(yīng)的特定氨基酸序列的過(guò)程。但也有許多轉(zhuǎn)錄生成的RNA，如轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNA）、核糖體RNA（rRNA）和小核RNA（snRNA）等并不被翻譯為氨基酸序列。濟(jì)南乙?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)主要方式

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