湖北定量N糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)一般流程

蛋白質(zhì)組研究：蛋白質(zhì)組研究是指系統(tǒng)研究在某一特定時間、特定條件下，某一種特定組織中的所有蛋白質(zhì)。對蛋白質(zhì)的研究也不只是局限于蛋白質(zhì)的氨基酸序列，而是包括了蛋白質(zhì)的表達量，蛋白質(zhì)活性，被修飾的狀況以及和其他蛋白質(zhì)或分子的相互作用情況、亞細胞定位和三維結(jié)構(gòu)。這些信息對于全方面了解復(fù)雜的生物系統(tǒng)有著重要的意義。因此，蛋白質(zhì)組學(xué)研究目標是大規(guī)模、系統(tǒng)化地研究蛋白質(zhì)的特性，以期望在蛋白質(zhì)水平上解釋控制復(fù)雜的生命活動的分子網(wǎng)絡(luò)。蛋白質(zhì)組學(xué)將成為尋找疾病分子標記和藥物靶標比較有效的方法之一。湖北定量N糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)一般流程

蛋白質(zhì)組結(jié)果一般需要做哪些方面的生物信息學(xué)分析？目前一般文獻中的分析主要為維恩圖分析、熱圖分析、火山圖分析、層次聚類分析、蛋白質(zhì)功能分析（GO分類為主）、蛋白質(zhì)所屬代謝通路富集分析（基于KEGG的pathway）、差異蛋白互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建、轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測等方面。其它一些比較特異的高級分析包括多組數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)分析、多pathway延伸分析、磷酸蛋白激酶預(yù)測分析、互作網(wǎng)絡(luò)及生物調(diào)控模型構(gòu)建分析。定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)主要分為標記（label）和非標記（labelfree）定量策略，標記策略又分為體內(nèi)標記和體外標記兩種。細胞內(nèi)蛋白質(zhì)組豐度的動態(tài)變化對各種生命過程有重要影響。例如在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展進程中，常常伴隨著某些蛋白質(zhì)的表達異常。定量蛋白質(zhì)組學(xué)就是把一個基因組表達的全部蛋白質(zhì)或一個復(fù)雜的混合體系中所有的蛋白質(zhì)進行精確的定量和鑒定。北京TMT／iTRAQ標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究蛋白質(zhì)組學(xué)在醫(yī)療和健康方面有什么應(yīng)用呢？

蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)：蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)成為現(xiàn)代的生物技術(shù)快速發(fā)展的重要支撐，并將帶領(lǐng)生物技術(shù)取得關(guān)鍵性的突破。為幫助生命科學(xué)領(lǐng)域的工作者全方面掌握蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)與方法、實驗難點與關(guān)鍵點、研究前沿與熱點，包括雙向凝膠電泳、等電聚焦、生物質(zhì)譜分析及非凝膠技術(shù)。雙向凝膠電泳：雙向凝膠電泳的原理是第1向基于蛋白質(zhì)的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復(fù)雜蛋白混合物中的蛋白質(zhì)在二維平面上分開。由于雙向電泳技術(shù)在蛋白質(zhì)組與醫(yī)學(xué)研究中所處的重要位置，它可用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后修飾研究，蛋白質(zhì)組的比較和蛋白質(zhì)間的相互作用，細胞分化凋亡研究，致病機制及耐藥機制的研究，療效監(jiān)測，新藥開發(fā)，病癥研究，蛋白純度檢查，小量蛋白純化，新替代疫苗的研制等許多方面。近年來經(jīng)過多方面改進已成為研究蛋白質(zhì)組的比較有使用價值的關(guān)鍵方法。

定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)：定量蛋白質(zhì)組學(xué)是蛋白質(zhì)組研究的重要內(nèi)容，通過對基因表達產(chǎn)物——蛋白質(zhì)的定量分析，以了解基因在不同的生理、病理和逆境條件下的表達情況。近年來，隨著非凝膠技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)（“Shotgun”proteomics）技術(shù)，特別是多維蛋白質(zhì)鑒定（MultidimensionalProteinIdentification，MudPIT）已成為研究復(fù)雜生物樣本中大規(guī)模蛋白質(zhì)表達和定性和定量分析的強有力工具。蛋白質(zhì)組學(xué)在醫(yī)學(xué)的研究應(yīng)用：蛋白質(zhì)組學(xué)是研究細胞、組織或生物體中蛋白質(zhì)組成、定位、變化及其相互作用規(guī)律的科學(xué)。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的本質(zhì)（從分析化學(xué)角度來看），就是對蛋白質(zhì)的定性定量分析。

iTRAQ/TMT 標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)：iTRAQ 和 TMT 技術(shù)采用多種同位素標記，可與氨基反應(yīng)實現(xiàn)連接，實現(xiàn)多個樣本蛋白組的定性與定量。技術(shù)優(yōu)點：適用范圍廣、高通量、結(jié)果可靠。靈敏度高，分離能力強，自動化程度高。 Label Free 非標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)：Label Free 技術(shù)不依賴同位素標記，可通過液質(zhì)聯(lián)用對蛋白質(zhì)酶解肽段進行分析，分析大規(guī)模鑒定蛋白質(zhì)時所產(chǎn)生的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，對被檢測到的離子峰強度進行積分，以積分面積進行相對定量。蛋白質(zhì)組學(xué)，指對某一基因組所表達的所有蛋白質(zhì)及其特征進行大規(guī)模、系統(tǒng)化地研究，以期望在蛋白質(zhì)水平上解釋控制復(fù)雜的生命活動的分子網(wǎng)絡(luò)。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究是生命科學(xué)進入后基因時代的特征。廣東蛋白質(zhì)定量組學(xué)價錢

蛋白質(zhì)組學(xué)研究是生命科學(xué)進入后基因時代的特征。湖北定量N糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)一般流程

蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)：生物質(zhì)譜：生物質(zhì)譜技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中比較重要的鑒定技術(shù)，其基本原理是樣品分子離子化后，根據(jù)不同離子之間的荷質(zhì)比（M/E）的差異來分離并確定分子量。對于經(jīng)過雙向電泳分離的目標蛋白質(zhì)用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽鍵）成肽段，對這些肽段用質(zhì)譜進行鑒定與分析。目前常用的質(zhì)譜包括兩種：基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）和電噴霧質(zhì)譜（ESI-MS）。蛋白質(zhì)組的研究不但能為生命活動規(guī)律提供物質(zhì)基礎(chǔ)，也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑。湖北定量N糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)一般流程