湖北蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)主要方式

根據(jù)不同的作用位點，蛋白質(zhì)乙酰化修飾分為：發(fā)生在蛋白N端的乙?；揎?、發(fā)生在蛋白賴氨酸上的乙?；揎?。前者發(fā)生在90%以上的真核生物新生蛋白上，對于新生蛋白的成熟和細(xì)胞定位非常重要，由N乙酰轉(zhuǎn)移酶（NATs）負(fù)責(zé)；而后者是一個可逆的過程，主要由賴氨酸乙?；福↘ATs）和賴氨酸去乙?；福↘DACs），賴氨酸的乙?；揎検俏覀兡壳把芯康闹攸c。蛋白質(zhì)磷酸化修飾應(yīng)用領(lǐng)域：應(yīng)用在食品工業(yè)方面，通過人工翻譯磷酸化修飾的蛋白可以普遍用于各種食用蛋白質(zhì)的改性，以改善蛋白質(zhì)品質(zhì)。如，花生蛋白、大豆蛋白、小麥面筋蛋白等。在人工磷酸化修飾的方法下，也可以研究各種蛋白質(zhì)的功能和相關(guān)代謝途徑的調(diào)控。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)的磷酸化紊亂，會導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)控異常，因此，病理的形成與蛋白質(zhì)的磷酸化異常也有很大相關(guān)性。其分子機制問題對于病癥等重大疾病的研究具有相當(dāng)?shù)闹笇?dǎo)意義，這也是指當(dāng)之無愧地成為生物學(xué)研究領(lǐng)域中的熱點。蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)磷酸化修飾具有簡單的特性。湖北蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)主要方式

泛素化修飾PRM定量驗證：原理： 泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位，調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動。首先對泛素化的蛋白進行胰酶消化，在賴氨酸的修飾位點上會產(chǎn)生兩個甘氨酸的殘基(K-GG)，利用對泛素化賴氨酸（K-GG）具有高親和力的基序抗體，特異性富集復(fù)雜樣本中的泛素化肽段，結(jié)合LC-MS/MS蛋白質(zhì)定量方法，實現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)定性定量分析。廣州泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)自中而下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可用于組蛋白修飾的分析。

甲基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)原理：目前用于甲基化蛋白質(zhì)組分析的甲基化肽段富集抗體分為精氨酸甲基化（Me-R）抗體和賴氨酸甲基化（Me-K）抗體兩大類。根據(jù)氨基酸殘基上所含甲基化修飾基團數(shù)量的不同，精氨酸甲基化（Me-R）抗體又包括：單甲基化精氨酸（MMA）抗體、非對稱二甲基化精氨酸（ADMA）抗體和對稱二甲基化精氨酸（SDMA）抗體；賴氨酸甲基化（Me-K）抗體又包括：賴氨酸單甲基化（K-Me）抗體、賴氨酸二甲基化（K-2Me）抗體和賴氨酸三甲基化（K-3Me）抗體。其中，Me-R的各類抗體需要單獨使用，而Me-K抗體可以混合使用。

定量磷酸化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學(xué)：蛋白質(zhì)發(fā)生磷酸化是重要的翻譯后修飾，它與信號傳導(dǎo)、細(xì)胞周期、生長發(fā)育機理等諸多生物學(xué)問題有密切關(guān)系。研究蛋白質(zhì)磷酸化對闡明蛋白質(zhì)功能具有重要意義。將磷酸化肽段TiO2富集技術(shù)和iTRAQ/TMT/Lable free技術(shù)相結(jié)合，實現(xiàn)對磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的定量研究。技術(shù)原理：在磷酸化肽段富集前先進行 iTRAQ/TMT 標(biāo)記，然后通過 TiO2 富集方法獲得高純度的磷酸化肽段，之后結(jié)合高分辨率質(zhì)譜完成對樣品的定量分析。蛋白質(zhì)翻譯后修飾可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)。

乙?；揎椀鞍捉M學(xué)應(yīng)用方向有什么？1、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床診斷：生物標(biāo)志物，疾病機理機制，疾病分型，個性化治理等；2、生物醫(yī)藥：藥物作用機理，藥效評價，藥物開發(fā)等；3、微生物領(lǐng)域：致病機理，耐藥機制，病原體-宿主相互作用研究等；4、海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等；5、生物能源、環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域：發(fā)酵過程優(yōu)化，生物燃料生產(chǎn)，環(huán)境危定風(fēng)險評估研究等；6、食品營養(yǎng)：食品儲藏及加工條件優(yōu)化，食品組分及品質(zhì)鑒定，功能性食品開發(fā)，食品安全監(jiān)檢測等。常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括乙?；：钡鞍踪|(zhì)糖基化修飾組學(xué)主要方式

大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學(xué)計量和豐度存在，這限制了在分析全細(xì)胞裂解液時對其的檢測。湖北蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)主要方式

泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)的介紹：泛素由76個氨基酸組成，高度保守，普遍存在于真核細(xì)胞內(nèi)，故名泛素。泛素化是可逆的，依賴ATP并且通過泛素刺激酶E1，泛素結(jié)合酶E2，泛素連接酶E3一系列催化反應(yīng)所致。這些特殊的酶包括泛素酶，結(jié)合酶、連結(jié)酶和降解酶等。泛素化在蛋白質(zhì)的定位、代謝、功能、調(diào)節(jié)和降解中都起著十分重要的作用。同時，它也參與了細(xì)胞周期、增殖、凋亡、分化、轉(zhuǎn)移、基因表達、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號傳遞、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調(diào)控。泛素化、心血管等疾病的發(fā)病密切相關(guān)。因此，作為近年來生物化學(xué)研究的一個重大成果，它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。湖北蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)主要方式