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琥珀?;揎椀鞍踪|(zhì)組:蛋白質(zhì)琥珀?;╯uccinylation)修飾是指琥珀?;鶊F供體(如琥珀酰輔酶A)通過酶學(xué)或者非酶學(xué)的方式將琥珀?;鶊F共價結(jié)合到底物蛋白質(zhì)的賴氨酸殘基的過程。琥珀?;揎椯x予賴氨酸基團2個負(fù)電荷,能夠引發(fā)更多蛋白質(zhì)特性的改變,且琥珀?;鶊F空間結(jié)構(gòu)較大,對于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的影響更為明顯。在真核和原核生物中,琥珀?;且环N保守的修飾類型。琥珀?;鸵阴;哂蟹浅姷南嚓P(guān)性,在已有的研究中,大量發(fā)生琥珀?;奈稽c同時也能檢測到乙酰化修飾。琥珀酰化參與了很多關(guān)鍵能量代謝途徑(包括三羧酸循環(huán)、糖代謝等),影響線粒體中的代謝過程,對線粒體失調(diào)相關(guān)的疾病的研究具有重要價值。蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)有什么重要的作用呢?浙江蛋白質(zhì)丙二?;揎椊M學(xué)分析價格
泛素化修飾PRM定量驗證:原理: 泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動。首先對泛素化的蛋白進(jìn)行胰酶消化,在賴氨酸的修飾位點上會產(chǎn)生兩個甘氨酸的殘基(K-GG),利用對泛素化賴氨酸(K-GG)具有高親和力的基序抗體,特異性富集復(fù)雜樣本中的泛素化肽段,結(jié)合LC-MS/MS蛋白質(zhì)定量方法,實現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)定性定量分析。濟南蛋白質(zhì)氧化修飾組學(xué)價格蛋白質(zhì)翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義。
蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)技術(shù)服務(wù):糖基化是在酶的控制下,蛋白質(zhì)或脂質(zhì)附加上糖類的過程,發(fā)生于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等部位。在糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基共價結(jié)合。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)功能作用。凝素親和法是目前糖蛋白質(zhì)組學(xué)中應(yīng)用比較普遍的分離富集方法。凝集素(lectin)是一類糖結(jié)合蛋白質(zhì),能專一識別某一特殊結(jié)構(gòu)的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結(jié)合,它們與糖鏈可逆非共價結(jié)合,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,通常用特定的單糖通過競爭結(jié)合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。
蛋白質(zhì)的甲基化修飾 :蛋白質(zhì)的甲基化(methylation)是指將甲基酶促轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)的某個殘基上,通常是賴氨酸或精氨酸,也包括組氨酸、半胱氨酸和天冬酰胺等。蛋白質(zhì)的甲基化是一種普遍的修飾,在大鼠肝細(xì)胞核的總蛋白提取物中,大約2%的精氨酸殘基是二甲基化的。蛋白質(zhì)甲基化經(jīng)常與乙酰化并列,因為它們都是常見的表觀遺傳修飾,經(jīng)常發(fā)生在組蛋白上。不過從化學(xué)反應(yīng)的角度來看,乙?;梢运阕饕环N短鏈脂酰化修飾,這里主要討論甲基化方面的問題。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾是一個復(fù)雜的過程。
泛素化修飾蛋白組學(xué)研究:泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,質(zhì)譜分析前需要對修飾進(jìn)行富集以提高其豐度,然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進(jìn)行定量分析。蛋白質(zhì)磷酸化修飾鑒定方法有免疫印跡技術(shù)。武漢蛋白質(zhì)乙?;揎椊M學(xué)質(zhì)譜分析
在有機體內(nèi),磷酸化是蛋白翻譯后修飾中比較普遍的共價修飾形式。浙江蛋白質(zhì)丙二?;揎椊M學(xué)分析價格
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)技術(shù)原理:首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進(jìn)行組分分離以降低樣本復(fù)雜程度,然后通過高質(zhì)量的修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進(jìn)行富集,之后上樣至液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜中進(jìn)行分析,通過相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫檢索匹配,一次可鑒定成百上千個修飾位點。蛋白質(zhì)磷酸化位點分析樣品經(jīng)酶解后,用 TiO2 微球?qū)α姿峄亩芜M(jìn)行富集,富集后的產(chǎn)物由質(zhì)譜分析,并通過軟件完成數(shù)據(jù)檢索。琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組技術(shù)特點:采用主流抗體親和富集方法,特異性高,富集效率好。浙江蛋白質(zhì)丙二?;揎椊M學(xué)分析價格