浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)有哪些類型

蛋白質(zhì)乙酰化修飾組學(xué)定量分析：1. SILAC細(xì)胞標(biāo)記，組織/細(xì)胞破碎，提取、提純目的蛋白質(zhì)（基于SILAC的乙?；揎椊M學(xué)定量）。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段。3. 對(duì)多肽片段進(jìn)行iTRAQ標(biāo)記（基于iTRAQ的乙?；揎椊M學(xué)定量）。4. 使用高效特異性乙?；贵w對(duì)乙?；揎楇亩芜M(jìn)行免疫富集。5. 使用LC-MS/MS對(duì)富集的乙?；亩芜M(jìn)行序列分析。6. 數(shù)據(jù)分析，比對(duì)不同樣本中蛋白乙酰化修飾水平差異，并對(duì)產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進(jìn)行解釋。泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)有哪些類型

翻譯后修飾蛋白組學(xué)分析：在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中，蛋白會(huì)首先被酶切成肽段，然后進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行分析。通過質(zhì)譜分析，得到的是一系列肽段的分子質(zhì)量信息。對(duì)于某一個(gè)特定肽段而言，在沒有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下，其序列信息和分子量是確定的。當(dāng)它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后，例如磷酸化修飾，由于序列信息和分子量是確定的，磷酸根的分子量也是確定的。在質(zhì)譜檢測(cè)過程中發(fā)現(xiàn)其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個(gè)磷酸根的分子量，假設(shè)這個(gè)肽段就發(fā)生了磷酸化修飾，再通過二級(jí)質(zhì)譜圖進(jìn)行二次確認(rèn)。廣州蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)蛋白質(zhì)磷酸化修飾的免疫印跡技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：能夠特異鑒定單個(gè)磷酸化位點(diǎn)。

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：1、全方面性：磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)以整個(gè)細(xì)胞蛋白為研究對(duì)象，研究?jī)?nèi)容包括了細(xì)胞內(nèi)具有生命功能的蛋白，如細(xì)胞增生、細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化等相關(guān)蛋白，因而研究更為全方面。2、可靠性：傳統(tǒng)的生物學(xué)研究蛋白質(zhì)磷酸化往往針對(duì)特定條件，以兩個(gè)蛋白或更多蛋白之間的相互作用為出發(fā)點(diǎn)，具有局限性，缺乏整體認(rèn)識(shí)。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)則可檢測(cè)不同蛋白激酶及磷酸化酶對(duì)同一個(gè)蛋白磷酸化程度的影響，因而結(jié)果具有普遍性和可靠性。3、有效性：磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)反映的是細(xì)胞內(nèi)真實(shí)發(fā)生的事件，在一次試驗(yàn)中考慮了不同變量，克服了生物學(xué)中逐步添加變量的缺陷。4、探索性：磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)以細(xì)胞內(nèi)蛋白為研究對(duì)象，相對(duì)于傳統(tǒng)的生物學(xué)研究以及蛋白質(zhì)芯片，更易發(fā)現(xiàn)未知的新磷酸化位點(diǎn)和磷酸化蛋白質(zhì)。如果可以聯(lián)合生物學(xué)技術(shù)，則可以發(fā)現(xiàn)具有磷酸化或者去磷酸化功能的酶。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)：血漿蛋白糖基化修飾分析：蛋白質(zhì)糖基化指碳水化合物通過共翻譯或翻譯后修飾的方式附著到蛋白質(zhì)上的過程，是一種常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾。分泌的細(xì)胞外蛋白常被糖基化，糖基化蛋白通常是重要的整合膜蛋白。血漿中的蛋白質(zhì)包括維持機(jī)體正常生理狀態(tài)的蛋白質(zhì)和機(jī)體分泌、滲漏、脫落的蛋白質(zhì)，其中不乏存在一些糖基化蛋白質(zhì)。而蛋白質(zhì)糖基化修飾不只影響蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象、生物活性、運(yùn)輸和定位，而且在分子識(shí)別、細(xì)胞通信、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等特定生物過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。因此對(duì)血漿蛋白糖基化進(jìn)行分析，有助于研究血漿蛋白的生理功能等。蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)具有全方面性。

蛋白質(zhì)磷酸化修飾定義？在哺乳動(dòng)物細(xì)胞生命周期中，大約有1/3的蛋白質(zhì)發(fā)生過磷酸化修飾，在脊椎動(dòng)物基因中，約有5%的基因編碼的蛋白質(zhì)是參與磷酸化和去磷酸化過程的蛋白激酶和磷酸酶。它可以通過激發(fā)、調(diào)節(jié)諸多信號(hào)通路進(jìn)而參與調(diào)控生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育、逆境應(yīng)激、疾病發(fā)生等多種生命過程，一直是生物學(xué)研究的重點(diǎn)與熱點(diǎn)。蛋白磷酸化是指在激酶催化作用下把ATP或者GTP的磷酸基團(tuán)（P04）轉(zhuǎn)移到不同種類的氨基酸上（主要包括絲氨酸S、蘇氨酸T、酪氨酸Y），從而使蛋白質(zhì)發(fā)生翻譯后修飾的過程。泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位。蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)技術(shù)服務(wù)

蛋白質(zhì)修飾可檢測(cè)修飾類型有磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙?；?、丁?；?、丙二?；?。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)有哪些類型

蛋白質(zhì)學(xué)組翻譯后修飾的研究策略：目前，有幾種分析蛋白質(zhì)翻譯后修飾的策略，包括質(zhì)譜（MS）、Eastern blotting、放射性標(biāo)記和Western blotting。放射性標(biāo)記和Western blotting是比較傳統(tǒng)、特異性和相對(duì)定量的方法。該過程需要事先知道翻譯后修飾類型。局限性包括抗體的特異性和可用性。質(zhì)譜技術(shù)也常被用于翻譯后修飾分析，不受修飾類型和相關(guān)修飾位點(diǎn)的現(xiàn)有知識(shí)的限制。自下而上：自下而上的技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中使用的質(zhì)譜策略之一。在根據(jù)序列鑒定肽之前，需要使用蛋白酶消化蛋白質(zhì)。由于該技術(shù)不能保證在檢測(cè)過程中被檢測(cè)肽的完整性和穩(wěn)定性，因此無法獲得不同蛋白質(zhì)翻譯后修飾之間關(guān)系的信息，這意味著它無法檢測(cè)到某些修飾。因此，該方法不適用于分析組蛋白的組合翻譯后修飾。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)有哪些類型

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