世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實(shí)驗室檢驗手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實(shí)驗室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南,旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實(shí)驗室結(jié)果的可比性。在過去40年里,該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年、1992年、1999年和2010年),內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等,已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn),被世界各地臨床和實(shí)驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實(shí)驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果,通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實(shí)驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實(shí)驗室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊。該手冊在國際大會、科學(xué)會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項目中進(jìn)行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海密度精子分析ALH
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時內(nèi)活動精>=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級:0級:不活動;1級:精子原地擺動;2級:有中等的前向運(yùn)動;3級:前向運(yùn)動活躍,快速直線運(yùn)動。正常的精子活動力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標(biāo)定論,應(yīng)對精子數(shù)量活力活動率液化時間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。香港兔子精子分析負(fù)相差精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。
HamiltonThorneIVOS是一套整合了光學(xué)觀察系統(tǒng)的精子動力分析儀。如今,IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。儀器特點(diǎn):新款內(nèi)建CDWriter!內(nèi)部整合光學(xué)系統(tǒng)自動化,內(nèi)置樣品臺可用于多種樣品分析儀器操作簡單提供滿足需求的分析結(jié)果實(shí)時質(zhì)量控制分析結(jié)果列表內(nèi)部整合的光學(xué)系統(tǒng)IVOS是***一套內(nèi)置光學(xué)系統(tǒng)的精子動力分析儀。與其它同類產(chǎn)品相比,IVOS并不采用顯微鏡持續(xù)照明方式,而是采用閃光拍攝方法。這種拍攝方法能夠消除由于精子運(yùn)動而造成的位置模糊。通過60禎/秒的拍攝速度,能夠得到準(zhǔn)確可靠的精子速度和運(yùn)動參數(shù)分析結(jié)果。IVOS可在以下三種模式下分析精子樣品:相差,明場和多波長熒光模式。自動化內(nèi)置加熱平臺作為整合光學(xué)系統(tǒng)的一部分,由計算機(jī)控制的IVOS樣品平臺可在分析時提供準(zhǔn)確的溫度控制和位置定位。樣品臺的溫度可在室溫到40°C范圍內(nèi)調(diào)節(jié),穩(wěn)定度為0.5°C。分析區(qū)域的選擇可選用自動或手動方式。樣品臺的溫度和位置可實(shí)時顯示在視頻窗口中。IVOS還允許用戶自己進(jìn)行分析室設(shè)定,控制分析樣品量。
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于:①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評估[6]。②實(shí)驗室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析[7]?這些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。精子分析儀的出現(xiàn)簡化了檢驗流程,提高了診斷的可靠性,對于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用。
精子分析儀使用注意事項1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計數(shù)池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計數(shù)的準(zhǔn)確性。3.精子樣品密度過大時,造成圖像處理上的粘連,無法分析每個精子的運(yùn)動特性。**中所含精子太少時,需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。男性精液檢測主要依賴計算機(jī)輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。美國馬精子分析W.H.O 6
在精子研發(fā)的歷程中,計算機(jī)輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機(jī)、彩色圖像檢測。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測。上海密度精子分析ALH
CASA,即計算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動和超活化運(yùn)動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確保可靠結(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運(yùn)動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動的不同特性。上海密度精子分析ALH