芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測平臺開發(fā)

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原（PSA）和腫瘤壞死因子α（TNF-α），以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關(guān)鍵參數(shù)是：珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑（檢測試劑和酶偶聯(lián)物）的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先，足夠的珠子必須在場以從熱力學(xué)和動力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看，100μL中有20萬個珠子，每個珠子大約有8萬個與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度，在該濃度下，抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率（>70%）(D.M.R.，E.P.F.，D.C.D.，未發(fā)表工作）。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，微量檢測，使用微量樣本就能測試；芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測平臺開發(fā)

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產(chǎn)生的熒光團限制在極小范圍內(nèi)，從而能夠檢測到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積（~50fL），導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現(xiàn)這種定位，在第二步中，將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔（圖1C）。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔，孔徑為μm，孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下，用橡膠密封圈密封。Rissin等人，第3頁將每個微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物（圖1D）。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像，可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球（“開啟”孔）和不與酶相關(guān)的微球（“關(guān)閉”孔）；補充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復(fù)合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)（圖1D）。使用SiMoA，濃度是因此，我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 進口數(shù)字ELISA極速檢測芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品，每個醫(yī)學(xué)實驗室都能用的單分子檢測；

 芯棄疾JX-8B單分子ELISA高敏檢測產(chǎn)品具有開放的優(yōu)勢：

開放：可匹配各種免疫檢測項目，兼容各種自行開發(fā)的試劑；

測試結(jié)果：國產(chǎn)普通熒光顯微鏡,科研或預(yù)研場景；

測試結(jié)果：國產(chǎn)低成本熒光顯微鏡拍攝

我們公司擁有專業(yè)的MEMS、微流控設(shè)計/加工能力。提供一站式單步工藝或完整器件的設(shè)計流片。我們提供的服務(wù)有：MEMS微納加工，微流控芯片加工、設(shè)計，高靈敏免疫檢測產(chǎn)品芯棄疾JX-8B單分子ELISA、單分子檢測芯片、數(shù)字免疫層析POCT檢測產(chǎn)品、滴液生成微球制備芯片等。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，我們?yōu)槭裁茨茏龅?？產(chǎn)品主要原理同單分子陣列技術(shù)：

非常近，已經(jīng)描述了兩種數(shù)字蛋白質(zhì)測量方法，這些方法能夠提高對單分子水平的靈敏度。一種方法依賴于在固相上形成免疫三明治復(fù)合物，然后化學(xué)解離并通過激光計數(shù)每個分子。第二種方法由美國開發(fā)，依賴于單分子陣列和同時計數(shù)單分子捕獲微珠。這兩種方法都能將檢測能力的下限降低10倍或更多，與增強的模擬放大方法相比，但后者技術(shù)也易于與高通量自動化儀器兼容，用于ELISA試劑處理。通過使用大量微孔陣列，可以同時獲取和查詢數(shù)百到數(shù)萬個數(shù)據(jù)點，實現(xiàn)快速數(shù)據(jù)采集和穩(wěn)健統(tǒng)計。此外，從陣列中可能獲得的快速數(shù)據(jù)采集可以應(yīng)用于預(yù)編碼具有不同熒光特性的多個微珠亞群，從而在單分子水平上實現(xiàn)高通量多重分析。 芯棄疾單分子ELISA檢測試劑盒，多重超敏檢測，多重指標(biāo)也能檢測到亞皮克級！

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由于活性珠子的百分比接近50%（酶與微球的比例大于~1：1.5)，然而，使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性，我們達到了數(shù)字動態(tài)范圍的實際上限。例如，圖2中7fM(~45%活性）的信號偏離了線性。因此，這里使用50,000個孔展示的數(shù)字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM，即大約四個對數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M行標(biāo)記，這種動態(tài)范圍對于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的 單分子POCT產(chǎn)品，幫您數(shù)字化高靈敏檢測，且微量樣本多重指標(biāo)檢測；生物實驗室數(shù)字ELISA檢測平臺開發(fā)

芯棄疾單分子ELISA檢測盒，微量極速檢測，微量檢測15min就完成檢測！芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測平臺開發(fā)

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數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng)：1）SiMoA對酶標(biāo)記的高度敏感性；以及2）通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標(biāo)簽，抗體親和力，試驗背景，以及背景測量值的變異（%CV）27.SiMoA對酶非常敏感標(biāo)簽（圖2）為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標(biāo)記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說，對于給定親和力的抗體，其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定，SiMoA的高標(biāo)記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明，數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合（NSB）與捕獲珠表面結(jié)合（補充表2）。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標(biāo)記靈敏度，明顯減少了檢測抗體（~1nM)和酶標(biāo)記物（1–50pM)的需要，以檢測結(jié)合事件，與傳統(tǒng)方法相比（標(biāo)記試劑濃度~10nM)。降低的標(biāo)記物濃度減少了NSB到捕獲表面，從而導(dǎo)致背景信號明顯降低。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測平臺開發(fā)