rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標抗體的種屬來源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2HPO4,pH7.0洗脫液:0.1M甘氨酸,pH3.0中和液:1MTris-HCl,pH8.5交聯(lián)液:0.2M三乙醇胺,pH8.2交聯(lián)劑:DMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)終止液:50mMTris,pH7.5GST標簽蛋白純化和標簽去除。安徽天地人和試劑怎么樣
上海楚知生物科技有限公司是一家專注于生命科學實驗儀器、試劑和耗材的一站式服務公司。致力于為高校、科研院所和企業(yè)等系統(tǒng)客戶提供完整的解決方案和售后服務。公司產(chǎn)品高校及研究院用戶包括清華大學、北京大學、中科院系統(tǒng)、復旦大學、江南大學、華東理工大學、同濟大學、上海交通大學、中國農(nóng)業(yè)大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學、中國藥科大學、廈門大學、等;企業(yè)用戶包括上海恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、齊魯制藥、帝斯曼、吉林龍?zhí)┲扑?、浙江昌海藥業(yè)等一大批**企事業(yè)單位。提供的試劑有親和填料純化,抗體純化,磁珠,疏水,,生物酶,預制膠,預裝柱等一系列產(chǎn)品湖北抗體純化試劑生產(chǎn)商抗體親和純化產(chǎn)品分為通用性抗體,單克隆抗體,多克隆抗體。
試劑篇:四、根據(jù)配體特異性的分離方法-親和色譜法親和層析法(aflinity chromatography)是分離蛋白質(zhì)的一種極為有效的方法,它經(jīng)常只需經(jīng)過一步處理即可使某種待提純的蛋白質(zhì)從很復雜的蛋白質(zhì)混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據(jù)某些蛋白質(zhì)與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非共價地結(jié)合。其基本原理:蛋白質(zhì)在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質(zhì),因此蛋白質(zhì)的分離(Separation),提純(Purification)和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一**成的方法能移把任何一種蛋白質(zhì)從復雜的混合蛋白質(zhì)中提取出來,因此往往采取幾種方法聯(lián)合使用。
蛋白純化試劑 IMAC Beads 6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體結(jié)構(gòu)見圖1所示,填料可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+, Zn2+, Ni2+,Co2+, 對His標簽的結(jié)合能力Cu2+>Zn2+>Ni2+ >Co2+,可根據(jù)金屬離子對標簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。具體性能見表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的試劑條件(見表2)外,因其耐壓的基質(zhì),可以耐受比較高0.3 MPa的壓力,更穩(wěn)定,因此該產(chǎn)品更適合用于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化,可以在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化。預活化填料哪家有賣的?
蛋白純化試劑NiSmartBeads是一種新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni離子,具體性能見表1。NiSmartBeads主要應用于分泌到真核培養(yǎng)液上清中的組氨酸標記蛋白的捕獲和純化,可以在含有EDTA及DTT的情況下進行目的蛋白高效的純化。NiSmartBeads有很強的組分兼容性,適用于***底物及鹽濃度的緩沖條件2.純化流程2.1緩沖液的準備可使用下列推薦緩沖液,也可根據(jù)自己的使用習慣配置不同的緩沖液體系,基本原理就是低咪唑上樣,高咪唑洗脫,或者高pH上樣,低pH洗脫。緩沖液在使用前比較好用0.22μm或者0.45μm濾膜過濾除菌。FLAG標簽是由八個親水氨基酸組成的多肽片段。浙江多肽試劑報價
一步純化檢測原核,酵母或哺乳性動物細胞表達的標簽蛋白。安徽天地人和試劑怎么樣
蛋白純化試劑純化流程5)依次使用3倍柱體積的平衡液和5倍柱體積的去離子水平衡填料,***再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被細菌污染。2.4SDS-PAGE檢測將使用純化產(chǎn)品得到的樣品(包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分)以及原始樣品使用SDS-PAGE檢測純化效果。3.在位清洗當填料使用過程中發(fā)現(xiàn)反壓過高或者填料上面出現(xiàn)明顯的污染時,需要進行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。建議按照下面操作去除填料上殘留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。去除強疏水結(jié)合的蛋白,脂蛋白和脂類通過使用30%異丙醇清洗5-10個柱體積,接觸時間為15-20分鐘可以去除此類污染物。然后,再使用10倍柱體積的去離子水清洗。也可以選擇使用含有去污劑的酸性或堿性溶液,清洗填料2倍柱體積。例如,含有0.1–0.5%非離子去污劑的0.1M醋酸溶液,接觸時間為1–2小時。去污劑處理后,需要使用70%的乙醇清洗5個柱體積,以徹底去除去污劑。***使用10倍柱體積的去離子水清洗。安徽天地人和試劑怎么樣
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