蛋白純化試劑.產品介紹,DextrinBeads是一種純化帶有麥芽糖結合蛋白(MBP)標簽蛋白的親和層析介質,具體性能見表1。MBP可促進連接蛋白的正確折疊,增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步純化MBP融合蛋白,結合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進行溫和洗脫,保護了標簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點特異性蛋白酶切除。問題及解決方案問題原因分析:柱子反壓過高填料被堵塞按照第3部分進行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達確保目的蛋白表達樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用結合液稀釋細胞產生大量的淀粉酶影響結合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達融合蛋白使麥芽糖結合位點阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結合力更換載體柱子結合時間太短將樣品與DextrinBeads振蕩孵育4度2小時或更長時間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹脂充分平衡/洗雜,如樹脂太臟按照第3部分進行樹脂清洗單克隆抗體純化介質哪家有?福建定制試劑代理銷售價格
上海楚知生物蛋白純化試劑產品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結構域,該蛋白在正常機體發(fā)育和**發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個重要的轉錄因子,其異常表達能促進多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對目的蛋白進行準確的檢測、定位和純化??贵w來源:小鼠交叉反應:c-Myc標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復凍融福建定制試劑代理銷售價格一步純化檢測原核,酵母或哺乳性動物細胞表達的標簽蛋白。
蛋白純化試劑抗體純化rProteinA/GBeads4FF純化流程:2.4.1抗體吸附1)取適量的rProteinA/GBeads4FF加入到2ml離心管中,800rpm離心1min,吸棄上清。2)加入0.5ml平衡液,懸浮填料(使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護蛋白的作用),800rpm離心1min,吸棄上清。再重復兩次。3)向步驟2)平衡的填料中加入抗體溶液,懸浮填料,室溫下置于翻轉混合儀或者手工輕輕翻轉離心管,約30min后,800rpm離心1min,收集上清液,留待檢測。4)向3)的填料中加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復兩次。2.4.2抗體交聯(lián)(備選)如果需要將抗體和目標抗原復合物共同洗脫,請忽略本步驟,直接進行2.4.3。50ul-1ml填料量均可以按照以下步驟操作,無需額外增加交聯(lián)液體積。1)向清洗過的填料中加入1ml交聯(lián)液,800rpm離心1min,吸棄上清。2)再向其中加入1ml含20mMDMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)的交聯(lián)液,此試劑需要現(xiàn)用現(xiàn)配,懸浮填料,在室溫下置于翻轉混合儀或者手工輕輕翻轉離心管,促使緩沖液和填料充分接觸,約30min后,800rpm離心1min,吸棄上清。
試劑篇:三、根據蛋白質帶電性質進行分離蛋白質純化流程1、電泳法:各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用于分析和制備各種蛋白質。2、離子交換層析法:離子交換劑有陽離子交換劑(如:羧甲基纖維素;CM-纖維素)和陰離子交換劑(二乙氨基乙基纖維素),當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨后用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來。一步純化鏈霉親和素。
蛋白純化試劑Ni Smart Beads純化流程2/3常州天地人和生物科技有限公司平衡液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,pH7.4洗雜液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,0-5mM咪唑,pH7.4洗脫液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,250mM咪唑,pH7.4注:為了減少宿主細胞蛋白的洗脫,建議在洗雜液中加入低濃度的咪唑。為了消除一些離子作用蛋白的吸附,可以在溶液中加入0.5M-1.0MNaCl??梢圆捎玫蚿H值洗脫或與咪唑結合,如pH2.5-5.0。2.2樣品準備1)將細胞培養(yǎng)液轉移至離心杯,7,000rpm(7,500×g),離心15min取上清。如果使用預裝柱,樣品在使用前比較好用0.22μm或者0.45μm濾膜過濾除菌。2)樣品中含有可耐受范圍內試劑,不需要透析或濃縮,可以直接上樣。2.3樣品純化流程1)將NiSmartBeads裝入合適的層析柱,層析用5倍柱體積的平衡液進行平衡,使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護蛋白的作用。2)將樣品加到平衡好的NiSmartBeads中,保證目的蛋白與Ni2+充分接觸,提高目的蛋白的回收率,收集流出液。3)用10-15倍柱體積的洗雜液進行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,收集洗雜液。4)使用5-10倍柱體積的洗脫液,收集洗脫液,即目的蛋白組分。帶正電荷的強陽離子交換介質。安徽核酸提取試劑怎么樣
預制膠的使用注意事項。福建定制試劑代理銷售價格
蛋白純化試劑 IMAC Beads 6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質,配體結構見圖1所示,填料可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+, Zn2+, Ni2+,Co2+, 對His標簽的結合能力Cu2+>Zn2+>Ni2+ >Co2+,可根據金屬離子對標簽蛋白的結合力來選擇需要螯合的金屬離子。具體性能見表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的試劑條件(見表2)外,因其耐壓的基質,可以耐受比較高0.3 MPa的壓力,更穩(wěn)定,因此該產品更適合用于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化,可以在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化。福建定制試劑代理銷售價格
上海楚知生物科技有限公司辦公設施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,為員工打造良好的辦公環(huán)境。在上海楚知生物近多年發(fā)展歷史,公司旗下現(xiàn)有品牌上海楚知生物等。公司以用心服務為重點價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,將從事生物科技領域內技術開發(fā)、技術咨詢,化學試劑(除危險化學品、監(jiān)控化學品、**爆竹、民用物品、易制毒化學品),實驗室設備(除醫(yī)療器械),辦公家具,計算機、軟件及輔助設備(除計算機信息系統(tǒng)安全**產品),化工原料及產品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化學品)銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】等業(yè)務進行到底。自公司成立以來,一直秉承“以質量求生存,以信譽求發(fā)展”的經營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動物發(fā)光成像,ATS高壓均質機,從而使公司不斷發(fā)展壯大。