上海楚知代理的常州天地人和試劑,GST(標簽)蛋白親和純化產(chǎn)品可以純化各種表達系統(tǒng)融合表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的目的蛋白,谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,Glutathione Beads ,Glutathione Beads 4FF 是通過12個原子的間隔臂,用化學方法共價結(jié)合了還原型谷胱甘肽制作而成,這種特別涉及使樹脂的純化效率得到了提高, GSTPur Glutathione Kit提供了3ml Glutathione Beads重力預(yù)裝柱,GST標簽蛋白純化所需的緩沖液,方便客戶使用,操作簡單,純化率高His ,gst,strep標簽蛋白純化及檢測。江蘇多肽試劑規(guī)格
體外重組蛋白表達技術(shù)已經(jīng)滲透到生物學的各個領(lǐng)域。目前,體外重組蛋白表達系統(tǒng)主要有四類:原核表達系統(tǒng)、哺乳動物細胞表達、酵母表達系統(tǒng)及昆蟲細胞表達。表達的一般實驗包括載體構(gòu)建-表達鑒定-蛋白純化三大步驟。在構(gòu)建載體階段,除了一些必要的表達元件,還需要考慮的密碼子優(yōu)化和標簽的選擇。選擇合適的標簽不但有利于蛋白的純化,促進蛋白的可溶性,同時也不能影響蛋白的結(jié)構(gòu)功能和下游應(yīng)用。上海楚知生物天地人和試劑蛋白純化標簽,幫助科研人員更好的設(shè)計實驗。安徽磁珠系列試劑代理廠家一步純化檢測原核,酵母或哺乳性動物細胞表達的標簽蛋白。
蛋白純化試劑,上海楚知生物代理天地人和,1.產(chǎn)品介紹NiIDABeads可以用于各種表達來源(如大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞)的組氨酸標簽(6xHis-tagged)蛋白的純化。它是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學方法偶聯(lián)了三配位的亞氨基二乙酸(IDA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成比較穩(wěn)定的平面四邊形結(jié)構(gòu),從而有更多的位點與組氨酸標簽上的咪唑環(huán)繼續(xù)配位,達到結(jié)合目的蛋白的效果(產(chǎn)品化學結(jié)構(gòu)見圖1所示)。但是,這樣的結(jié)構(gòu)比較容易受到其他小分子的進攻,鎳離子易被還原或者被螯合,從而破壞其化學結(jié)構(gòu),無法結(jié)合目的蛋白。NiIDABeads具有載量高,性價比高的優(yōu)點
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約15min后,800rpm離心1min,再吸棄上清。4)加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復(fù)兩次。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復(fù)合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,使抗原與抗體充分結(jié)合,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原復(fù)合物進行離心,800rpm離心1min,收集上清液,置于冰上以備后續(xù)檢測。向離心管中加入1ml洗雜液,用移液器輕輕吹打使填料-抗體-抗原復(fù)合物均勻分散,然后進行離心分離,800rpm離心1min,棄上清液。再重復(fù)洗滌兩次。***加入1ml洗雜液,用移液器將填料-抗體-抗原復(fù)合物懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中,并進行離心分離,800rpm離心1min,棄上清液帶負電荷的強陰離子交換介質(zhì)。
蛋白純化試劑抗體純化rProteinA/GBeads4FF純化流程:2.4.1抗體吸附1)取適量的rProteinA/GBeads4FF加入到2ml離心管中,800rpm離心1min,吸棄上清。2)加入0.5ml平衡液,懸浮填料(使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護蛋白的作用),800rpm離心1min,吸棄上清。再重復(fù)兩次。3)向步驟2)平衡的填料中加入抗體溶液,懸浮填料,室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約30min后,800rpm離心1min,收集上清液,留待檢測。4)向3)的填料中加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復(fù)兩次。2.4.2抗體交聯(lián)(備選)如果需要將抗體和目標抗原復(fù)合物共同洗脫,請忽略本步驟,直接進行2.4.3。50ul-1ml填料量均可以按照以下步驟操作,無需額外增加交聯(lián)液體積。1)向清洗過的填料中加入1ml交聯(lián)液,800rpm離心1min,吸棄上清。2)再向其中加入1ml含20mMDMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)的交聯(lián)液,此試劑需要現(xiàn)用現(xiàn)配,懸浮填料,在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,促使緩沖液和填料充分接觸,約30min后,800rpm離心1min,吸棄上清。結(jié)合能力強,結(jié)合能力中等。湖南天地人和試劑報價
常州天地人和試劑經(jīng)銷商。江蘇多肽試劑規(guī)格
磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒可以快速地從口腔拭子中提取高質(zhì)量DNA。提取出的基因組 DNA A260/A280 典型的比值達 1.7-1.9,產(chǎn)物可用于PCR、載體構(gòu)建、核酸雜交等下游實驗。
磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒組成
試劑名稱 50T 200T
Buffer A 5ml 20ml
Buffer B 10ml 40ml
蛋白酶K 500μl 2ml
磁珠 10ml 40ml
Wash Buffer 125ml 100ml
Elution Buffer 5ml 20m
l2.問題及解決方案
提不到DNA或產(chǎn)量很低取樣量少:取樣前半小時漱口。樣品保存不當:確保樣品新鮮有效??赡軟]加入ProteinaseK,或加入量不足,導(dǎo)致細胞裂解不完全,或者65℃孵育時間過短。 2.DNA未完全回收:減少上樣量或增加磁珠量,確保樣品充分吸附。確保磁珠與樣品充分混勻,吸附時磁珠一直保持懸浮狀態(tài)。3洗脫液中無/很少DNA:確保Washbuffer中加入相應(yīng)的乙醇,用完后要密封保存,防止揮發(fā)。確保洗脫液中的鹽濃度和pH。洗脫液用量不當:調(diào)整洗脫液體積。磁珠風干時間太長,磁珠未完全分散。4,DNA純度不高,有污染RNA污染:檢查RNase是否有問題,適當增加RNase的用量。洗雜不充分,含有雜質(zhì)。若用去離子水洗脫DNA,A260/280比值會偏低,但并不表示純度低。 江蘇多肽試劑規(guī)格
上海楚知生物科技有限公司屬于機械及行業(yè)設(shè)備的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家有限責任公司企業(yè)。以滿足顧客要求為己任;以顧客永遠滿意為標準;以保持行業(yè)優(yōu)先為目標,提供***的知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動物發(fā)光成像,ATS高壓均質(zhì)機。上海楚知生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。