Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護了鎳離子免受小分子的進攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和6X組氨酸標記(His-tag)蛋白純化試劑說明。福建離子交換試劑哪里買
蛋白純化試劑Anti-HisAntibody產(chǎn)品介紹:His標簽是一種分子量很小的標簽,通常由6-8個組氨酸(His)組成,His標簽是蛋白純化和檢測的常用標簽之一,由于其分子量小,融合至目的蛋白后對蛋白的結(jié)構(gòu)和特性幾乎沒有影響。抗His標簽的抗體能對His標簽融合蛋白進行準確的檢測、定位和純化,從而為廣大科研者提供便利。抗體來源:小鼠交叉反應:His標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG1來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復凍融福建抗體純化試劑怎么樣含MBP標簽蛋白的親和純化介質(zhì)。
生物試劑試劑的取用規(guī)則 , 固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時,可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準確稱量時,則用稱量瓶在天平上進行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的比較低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。 如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時應注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 為了達到準確的實驗結(jié)果,取用試劑時應遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì): (1)試劑不能與手接觸。 (2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,***不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。 (3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。 (4)已取出的試不能再放回原試劑瓶內(nèi)。 另外取用試劑時應本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實驗結(jié)果.
試劑篇3:細分離樣品經(jīng)粗分級分離以后,一般體積較小,雜蛋白大部分已被除去。進一步純化,一般使用層析法包括凝膠過濾、離子交換層析、吸附層析以及親和層析等。必要時還可選擇電泳法,包括區(qū)帶電泳、等電點聚焦等作為***的純化步驟。用于細分級分離的方法一般規(guī)模較小,但分辨率很高。結(jié)晶是蛋白質(zhì)分離純化的***步驟。盡管結(jié)晶過程并不能保證蛋白一定是均一的,但是只有某種蛋白在溶液中數(shù)量上占有優(yōu)勢時才能形成結(jié)晶。結(jié)晶過程本身也伴隨著一定程度的純化,而重結(jié)晶又可除去少量夾雜的蛋白。由于結(jié)晶過程中從未發(fā)現(xiàn)過變性蛋白,因此蛋白的結(jié)晶不僅是純度的一個標志,也是斷定制品處于天然狀態(tài)的有力指標。His ,gst,strep標簽蛋白純化及檢測。
試劑篇:2,細胞碎片等不溶物用離心或過濾的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一細胞組分,如細胞核、染色體、核糖體或可溶性細胞質(zhì)等,則可利用差速離心的方法將它們分開,收集該細胞組分作為下步純化的材料。如果碰上所要蛋白是與細胞膜或膜質(zhì)細胞器結(jié)合的,則必須利用超聲波或去污劑使膜結(jié)構(gòu)解聚,然后用適當介質(zhì)提取。粗分離當?shù)鞍踪|(zhì)提取液(有時還雜有核酸、多糖之類)獲得后,選用一套適當?shù)姆椒?,將所要的蛋白與其他雜蛋白分離開來。一般這一步的分離用鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離等方法。這些方法的特點是簡便、處理量大,既能除去大量雜質(zhì),又能濃縮蛋白溶液。有些蛋白提取液體積較大,又不適于用沉淀或鹽析法濃縮,則可采用超過濾、凝膠過濾、冷凍真空干燥或其他方法進行濃縮。瓊脂糖微球的試劑哪家好?湖北蛋白檢測試劑哪種品牌好
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蛋白質(zhì)純化注意事項:在進行任何一種蛋白質(zhì)純化的時候,都要時刻注意維護它的穩(wěn)定性,保護它的活性,有一些通用的注意事項需要牢記,它們包括:1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內(nèi)進行。2、不要太稀,蛋白濃度維持在μg/mL~mg/mL。3、合適的pH,除非是進行聚焦層析,所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同,防止蛋白質(zhì)的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑,防止蛋白酶對目標蛋白的降解;在純化細胞中的蛋白質(zhì)時,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA對蛋白的污染。5、避免樣品反復凍融和劇烈攪動,以防蛋白質(zhì)的變性。6、緩沖溶液成分盡量模擬細胞內(nèi)環(huán)境。7、在緩沖溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫蘇糖醇)(或β-巰基乙醇),防止蛋白質(zhì)的氧化。8、加1~10mmol/LEDTA金屬螯合劑,防止重金屬對目標蛋白的破壞。9、使用滅菌溶液,防止微生物生長。 ;選試劑上海楚知生物福建離子交換試劑哪里買
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