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Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護(hù)了鎳離子免受小分子的進(jìn)攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和脫鹽柱產(chǎn)品哪一家的好?福建定制試劑報(bào)價(jià)
金屬螯合親合層析,是一種新型的應(yīng)用于原**白純化的技術(shù)。該方法通過蛋白質(zhì)表面的一些特殊的氨基酸,使之與金屬離子發(fā)生相互作用,從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行親和純化。這些作用包括配價(jià)鍵結(jié)合、靜電吸附、共價(jià)鍵結(jié)合等,其中以6個(gè)組氨酸殘基組合的融合標(biāo)簽(His-Tag)在原**白表達(dá)中的應(yīng)用**為***。His-Tag可結(jié)合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的結(jié)構(gòu),以便于進(jìn)行下一步的純化及檢測。由于金屬螯合親合層析具有配體簡單、吸附量大、分離條件溫和、通用性強(qiáng)等特點(diǎn),所以可選擇范圍廣,高鹽,存在變性劑以及去垢劑的上樣條件下進(jìn)行純化,His-Tag正逐漸成為分離純化蛋白質(zhì)等生物工程產(chǎn)品***的技術(shù)之一。選試劑到楚知福建抗體純化試劑純化流程GFP標(biāo)簽蛋白的表達(dá)及應(yīng)用。
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹,Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用***的親和標(biāo)簽。它包括兩種類型Strep-tagII和TwinStrep-tagII。Strep-tagII是一個(gè)短肽標(biāo)簽,由8個(gè)氨基酸(WSHPQFEK)組成,可以作為N端或C端標(biāo)簽與蛋白質(zhì)融合,對重組蛋白的影響很小。進(jìn)一步改進(jìn)的TwinStrep-tagII是一個(gè)順序排列的兩個(gè)Strep-tagII序列(通過內(nèi)部氨基酸連接),該標(biāo)簽?zāi)軌蛳馭trep-tagII一樣進(jìn)行溫和、快速的純化。這兩個(gè)標(biāo)簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarmSterptactin中的任一配體。標(biāo)簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強(qiáng)度和應(yīng)用。這兩個(gè)標(biāo)簽和Streptaction和STarmSterptaction的親和力在μg/ml范圍內(nèi),這種高親和性是任何其他現(xiàn)有親和性標(biāo)記系統(tǒng)都無法實(shí)現(xiàn)的。此外,這種結(jié)合標(biāo)簽和配體的靈活性允許在生理?xiàng)l件下純化重組蛋白。
蛋白純化試劑,抗體純化產(chǎn)品rProteinABeads是用于分離和純化單克隆抗體、多克隆抗體或Fc-融合蛋白的通用性親和層析介質(zhì),具體性能見表1。ProteinA是一種分離自金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁蛋白,主要通過Fc片段結(jié)合哺乳動物IgG,但是不與狗lgG結(jié)合,不結(jié)合人lgM、lgD和IgA。蛋白A與蛋白G與不同來源及亞類的免疫球蛋白結(jié)合能力不一樣,具體見表2。天然ProteinA有五個(gè)IgG結(jié)合區(qū)域和一些未知功能的區(qū)域,重組proteinA去除了與白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn),只含有五個(gè)IgG結(jié)合區(qū)域,減少了非特異性吸附。His ,gst,strep標(biāo)簽蛋白純化及檢測。
蛋白純化試劑Anti-HisAntibody產(chǎn)品介紹:His標(biāo)簽是一種分子量很小的標(biāo)簽,通常由6-8個(gè)組氨酸(His)組成,His標(biāo)簽是蛋白純化和檢測的常用標(biāo)簽之一,由于其分子量小,融合至目的蛋白后對蛋白的結(jié)構(gòu)和特性幾乎沒有影響??笻is標(biāo)簽的抗體能對His標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測、定位和純化,從而為廣大科研者提供便利。抗體來源:小鼠交叉反應(yīng):His標(biāo)簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG1來源:293細(xì)胞表達(dá)的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融核酸提取或純化試劑。廣東定制試劑怎么樣
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蛋白純化試劑 Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進(jìn)連接蛋白的正確折疊,增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。Dextrin Beads 6FF可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進(jìn)行溫和洗脫,保護(hù)了標(biāo)簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。問題及解決方案柱子反壓過高 填料被堵塞按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜 (0.22或 0.45μm) 過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達(dá)確保目的蛋白表達(dá)樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用平衡液稀釋細(xì)胞產(chǎn)生大量的淀粉酶影響結(jié)合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達(dá)融合蛋白使麥芽糖結(jié)合位點(diǎn)阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結(jié)合力更換載體柱子結(jié)合時(shí)間太短將樣品與Dextrin Beads 6FF振蕩孵育4度2小時(shí)或更長時(shí)間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹脂充分平衡/洗雜,如樹脂太臟按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。福建定制試劑報(bào)價(jià)
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