細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。有哪些領域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?江蘇品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒
該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確江西哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒價格使用EdU細胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。
EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性
測定ATP水平檢測細胞增殖活細胞需要不斷以ATP的形式輸入自由能,因此通過檢測ATP的增加水平可檢測細胞增殖。ATPBioluminescenceAssayKitHSII及ATPBioluminescenceAssayKitCLSII是通過經典的熒光素酶發(fā)光對ATP檢測定量的試劑盒。前者主要應用于高靈敏度檢測極低濃度ATP的實驗,后者主要應用于當有持續(xù)信號產生而需要高重復性結果的實驗。DNA的合成的檢測:DNA的新組裝合成是細胞生長的必要條件,故經常被用來進行細胞增殖、細胞活力及凋亡的檢測。BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細胞的DNA中,可通過對BrdU及EdU的檢測,從而對DNA的合成量進行測定。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢如何?
EU新生RNA檢測試劑產品簡介細胞內新生RNA的變化是評價細胞活性的重要指標。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細胞RNA轉錄時期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EU的RNA分子中,這樣就可以進行較快的的熒光檢測RNA的轉錄活性。本試劑盒將直接測定細胞內新生RNA的變化。傳統(tǒng)的檢測新生RNA的方法為以放射性同位素標記RNA等方法然后進行Southernblot進行檢測。但是這種方法需要放射性同位素標記及后續(xù)的復雜操作步驟。利用EU標記新生RNA的檢測方法不需要劇烈的RNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、RNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加便捷、靈敏和準確,能在細胞水**映新生RNA轉錄活性的狀況。該試劑只需要簡單的操作步驟,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內涵篩選儀進行新生RNA的轉錄活性。試劑組分產品編號試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細胞固定液1×15ml反應緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運輸及保存方式藍冰運輸。-20℃避光長期保存。EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領域有哪些?湖南哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書
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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。江蘇品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒