南京正揚(yáng)生物自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理,提取純化生物制品中殘留的微量宿主細(xì)胞DNA/RNA,產(chǎn)品裝量為100reaction/盒,試劑組分包括樣品稀釋液、裂解液1、裂解結(jié)合液、磁珠懸浮液、洗滌液A、洗滌液B、洗脫液,裂解液1需放置于2-8℃儲(chǔ)存,其余組分均常溫儲(chǔ)存即可,切勿冷藏或冷凍。試劑盒有效期為12個(gè)月。在使用時(shí),需自備金屬浴/水浴鍋、渦旋混勻器、掌上離心機(jī)、高速離心機(jī)等設(shè)備。
南京正揚(yáng)生物自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理,提取純化生物制品中殘留的微量宿主細(xì)胞DNA/RNA,產(chǎn)品使用事項(xiàng)包括以下幾點(diǎn):1.磁珠懸浮液嚴(yán)禁冷凍和離心,以免損傷磁珠,磁珠使用前務(wù)必充分混勻。2.裂解液結(jié)合液、洗滌液A、洗滌液B在低于10℃時(shí)可能出現(xiàn)白色結(jié)晶,若出現(xiàn)沉淀,請(qǐng)37℃水浴重新溶解后使用。3.請(qǐng)盡量在完成樣本純化處理當(dāng)天進(jìn)行后續(xù)的DNA檢測(cè),以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書,并嚴(yán)格按照操作步驟完成操作。 宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒的用途。寧波病毒核酸提取優(yōu)點(diǎn)
核酸提取時(shí),加標(biāo)回收率的定義及注意事項(xiàng):加標(biāo)回收率是指在測(cè)定樣品的同時(shí),于同一樣品的子樣中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定,將其測(cè)定結(jié)果扣除樣品的測(cè)定值,以計(jì)算回收率。加標(biāo)回收設(shè)置的注意事項(xiàng):①同一樣品的子樣取樣體積必須相等;②各類子樣的測(cè)定過(guò)程必須按相同的操作步驟進(jìn)行。③加標(biāo)量不能過(guò)大,一般為待測(cè)物含量的0.5~2.0倍,且加標(biāo)后的總含量不應(yīng)超過(guò)方法的測(cè)定上限。④加標(biāo)物的濃度宜較高,加標(biāo)物的體積應(yīng)很小,一般以不超過(guò)原始試樣體積的1%為好。寧波病毒核酸提取優(yōu)點(diǎn)宿主細(xì)胞殘留核酸提取過(guò)程中有哪些因素會(huì)導(dǎo)致提取效果不佳?
南京正揚(yáng)生物的宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒操作步驟包括實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備、樣品準(zhǔn)備、樣品消化、結(jié)合、洗滌、洗脫。產(chǎn)品第 一次使用之前需要向洗滌液A、洗滌液B中加入指定量的異丙醇,并在管子上做好標(biāo)記。每次實(shí)驗(yàn)前需準(zhǔn)備適量的異丙醇,準(zhǔn)備好2個(gè)溫浴溫度:56℃、70℃。樣品準(zhǔn)備環(huán)節(jié)包括樣品稀釋、加標(biāo)回收測(cè)試品準(zhǔn)備、陰性對(duì)照(NCS)準(zhǔn)備。每個(gè)待測(cè)樣品需做1份樣品原液提取、1份樣品加標(biāo)回收測(cè)試,樣品加標(biāo)回收的回收率能反映出樣品測(cè)試結(jié)果的真實(shí)性。中國(guó)藥典要求加標(biāo)回收率在50%--100%。
磁珠法核酸提取裂解液的作用原理:磁珠法核酸提取是以納米生物磁珠為載體的一種新型核酸提取技術(shù),核酸分子可與磁珠表面的硅羥基發(fā)生特異性識(shí)別與結(jié)合,在外部磁場(chǎng)的作用下發(fā)生聚集或分散,徹底擺脫傳統(tǒng)核酸提取過(guò)程中離心、抽取上清液等手工操作流程,從而實(shí)現(xiàn)核酸的自動(dòng)化提取。廣泛應(yīng)用于臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。磁珠法核酸提取試劑盒一般包括裂解、結(jié)合、洗滌、洗脫四個(gè)主要步驟。核酸提取的質(zhì)量要求。
磁珠法核酸提取過(guò)程中的常見(jiàn)誤區(qū)--洗滌次數(shù)越多,洗滌效果越好提取得到的核酸雜質(zhì)過(guò)多時(shí),使用者會(huì)考慮多進(jìn)行幾次洗滌,以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數(shù)確實(shí)有利于提純核酸,但考慮到每次洗滌都會(huì)損失一定量的核酸,且增加了核酸斷裂水解的可能性,所以一般來(lái)說(shuō)洗滌次數(shù)控制在2~4次為宜。商業(yè)化核酸提取試劑盒都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格驗(yàn)證的,在使用時(shí)嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行洗滌即可,隨意修改洗滌順序、洗滌磁珠、洗滌液的量,很可能會(huì)是核酸質(zhì)量下降。磁珠法核酸提取原理。杭州宿主細(xì)胞殘留DNA提取
支原體核酸提取失敗的原因有哪些?寧波病毒核酸提取優(yōu)點(diǎn)
磁珠法核酸提取的基本原理:首先,磁珠是一類特殊的納微米材料,它們的尺寸通常在零點(diǎn)幾微米到幾微米之間,只為一根頭發(fā)絲直徑的十幾分之一到幾十分之一,肉眼是無(wú)法觀測(cè)到單個(gè)磁珠的。其次,它們具有超順磁性,在磁場(chǎng)中可以向一側(cè)迅速移動(dòng),聚集在一起,而去除磁場(chǎng)后又能夠迅速恢復(fù)到分散狀態(tài)。用于核酸提取的磁珠表面具有特定的性質(zhì),在某些條件下能夠?qū)?span style="color:#f5c81c;">病毒核酸吸附在表面,在另一些條件下又能將病毒核酸從表面釋放下來(lái),用于后續(xù)的檢測(cè)步驟。寧波病毒核酸提取優(yōu)點(diǎn)