隨著疫 情相關(guān)信息的傳播,許多先前不為大眾所知的診斷行業(yè)專業(yè)名詞逐漸變得家喻戶曉,如核酸檢測、試劑盒、咽拭子、假陰性等等。我們?cè)谶M(jìn)行核酸檢測的時(shí)候,通常需要在檢測之前經(jīng)歷核酸提取這一步驟,簡單來說就是將病毒的核酸從我們采集的樣本當(dāng)中提取出來,以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒的優(yōu)點(diǎn)。合肥復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒核酸提取產(chǎn)品
宿主細(xì)胞DNA殘留問題備受關(guān)注。研究表明,生物制品中來源于宿主細(xì)胞的外源性DNA具有傳遞腫 瘤或病毒相關(guān)基因的可能性。各國藥品監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)對(duì)生物制品中宿主細(xì)胞殘留DNA有明確的檢測要求和標(biāo)準(zhǔn)。南京正揚(yáng)生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留核酸提取純化試劑盒及檢測系列產(chǎn)品,可滿足不同宿主及靶標(biāo)的檢測需求,試劑盒靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、符合法規(guī)要求,可以為客戶提供完整的和定制化的整體解決方案。歡迎聯(lián)系我們深圳重組腺相關(guān)病毒核酸提取常見問題支原體核酸提取試劑盒適用的樣品類型。
傳統(tǒng)核酸提取方法和磁珠法核酸提取的優(yōu)缺點(diǎn)比較:傳統(tǒng)核酸提取法磁珠法技術(shù)簡單高質(zhì)量、高通量手工提取自動(dòng)化流程操作繁瑣、費(fèi)時(shí)費(fèi)力免去了復(fù)雜的人工提取不適合大量樣品核酸提取減少酚類、氯仿等有機(jī)試劑對(duì)操作人員傷害不適合臨床分子診斷極大滿足如今對(duì)核酸提取效率的需求
隨著基因檢測、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的如今,傳統(tǒng)核酸提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法核酸提取的優(yōu)勢則愈來愈明顯:R能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作;R不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,安全無毒完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;R與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。R操作簡單、用時(shí)短;R穩(wěn)定可靠:避免人工操作引起的差異及錯(cuò)誤,結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性好;
磁珠法核酸提取常見問題之磁珠殘留:導(dǎo)致磁珠殘留的可能原因:①磁珠原因:所使用的磁珠的粒徑過小、磁珠表面基團(tuán)松散、磁珠的磁含量低;②自動(dòng)化核酸提取設(shè)備原因:自動(dòng)化核酸提取設(shè)備的磁分離方式設(shè)計(jì)有問題、設(shè)備的磁場弱;③操作原因:使用自動(dòng)化設(shè)備進(jìn)行核酸提取時(shí)所用的參數(shù)設(shè)置不合適、使用的磁力架磁性偏弱。磁珠殘留的解決辦法:①篩選、替換匹配的磁珠;②更換磁性強(qiáng)的磁力架;③放慢磁介入速度并延長吸附時(shí)間。歡迎聯(lián)系南京正揚(yáng)的支原體核酸提取試劑盒有哪些優(yōu)勢?
磁珠法核酸提取常見問題之磁珠結(jié)塊:導(dǎo)致磁珠結(jié)塊的可能原因:①磁珠吸附了過多雜質(zhì),包括蛋白、脂質(zhì)、多糖等;②磁珠粒徑太小;③洗滌完畢,乙醇干燥時(shí)間過長。④磁珠磁吸附時(shí)間過長;⑤操作中途含磁珠的樣品管離心速率過高、離心時(shí)間過長;磁珠結(jié)塊的解決辦法:①優(yōu)化裂解液、結(jié)合液配方,將雜質(zhì)裂解并充分消化;②選擇粒徑較大的微球;③縮短干燥時(shí)間;④控制磁珠吸附時(shí)間,磁分離時(shí),待液體變澄清即可將液體吸棄,并及時(shí)將EP管從磁力架上取出;⑤操作過程中切勿高速或長時(shí)間離心;宿主細(xì)胞殘留檢測項(xiàng)目中,核酸提取時(shí)加標(biāo)回收一般如何設(shè)置?南京支原體DNA提取常見問題
南京正揚(yáng)生物有自動(dòng)化核酸提取試劑盒嗎?合肥復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒核酸提取產(chǎn)品
如何評(píng)估磁珠法核酸提取產(chǎn)品的提取效果,可以從以下角度進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品的性能評(píng)估:Purity(純度),具體而言就是磁珠提取后的核酸中含有多少非核酸類的雜質(zhì)殘留,如蛋白、鹽、多糖等。該指標(biāo)通常用吸光度比值(A260/A280和A260/A230)來衡量。Quality(質(zhì)量),磁珠提取后的核酸尤其是較長的基因組核酸應(yīng)保持其完整性,不應(yīng)出現(xiàn)斷裂或降解等現(xiàn)象。該指標(biāo)可通過簡單的凝膠電泳或者復(fù)雜一些的特定PCR及微流控芯片(如AgilentBioanalyzer)進(jìn)行評(píng)估。Recovery(收率),磁珠提取過程應(yīng)當(dāng)盡量將所有的核酸都能從樣本中提取出來。高收率對(duì)于核酸檢測尤其是疾病早期檢測的靈敏度至關(guān)重要,在疾病早期,樣本中的病原體核酸含量通常較低,如果不能高效率地提取到所有核酸,那么很容易出現(xiàn)假陰性,導(dǎo)致漏檢。合肥復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒核酸提取產(chǎn)品