rcAAV核酸提取操作流程

來源: 發(fā)布時間:2024-01-09

裂解效果不好?多加點裂解液。洗滌效果不好?多加點洗滌液。這是大家在使用核酸提取試劑盒時的慣性思維。但是對于磁珠法而言,每增加一部分液體體積,就減少了更多的磁珠碰撞幾率,而降低磁珠碰撞幾率,會導(dǎo)致吸附率的大幅度下降。所以很多時候,雖然增加裂解液和洗滌液確實能夠起到增強(qiáng)裂解和增強(qiáng)洗滌的作用,但磁珠法提取的中是磁珠吸附核酸的效率,無法保證磁珠碰撞效率是不能保證核酸提取效率的,所以單純增加試劑使用量改善提取效果并不一定完全有效。宿主細(xì)胞殘留檢測項目中,核酸提取時加標(biāo)回收率的要求是多少?rcAAV核酸提取操作流程

磁珠法核酸提取是納米科技與生物技術(shù)的完美結(jié)合,具有其它傳統(tǒng)核酸提取方法不可比擬的優(yōu)勢:(1)用時少,操作簡單快速:整個操作流程基本分為五步(裂解、結(jié)合、洗滌、干燥、洗脫),全程無需離心操作;(2)質(zhì)量穩(wěn)定可靠:游離的磁珠與核酸的結(jié)合量更大,特異性的結(jié)合使得核酸純度更高,且可通過控制磁珠表面基團(tuán)來調(diào)節(jié)核酸回收量;(3)全自動化操作:生物磁珠通過儀器可實現(xiàn)自動化、高通量操作,可實現(xiàn)幾十甚至幾百個樣品的提取,極大提高了檢測效率;上海支原體DNA提取注意事項細(xì)胞核酸提取試劑盒。

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的全自動核酸提取儀是針對生物制品核酸提取的技術(shù)平臺,內(nèi)置專業(yè)優(yōu)化的前處理程序,配套本公司的自動化前處理試劑盒和配套耗材,只需一鍵操作即可完成各類生物材料和制品中的宿主細(xì)胞、微生物、病毒因子等各類微量DNA/RNA的提取純化。需26min即可完成樣品微量核酸的提取純化,解放雙手、縮短實驗操作時間、結(jié)果穩(wěn)定性得到保證。各相關(guān)程序已經(jīng)過全    面驗證,保證前處理結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定。歡迎聯(lián)系!

磁珠法核酸提取的基本原理:核酸結(jié)合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細(xì)胞或組織在裂解液作用下,其中的DNA/RNA被釋放出來。此時經(jīng)過表面修飾的超順磁性氧化硅納米磁珠即與核酸進(jìn)行“特異性結(jié)合”,形成“核酸-磁珠復(fù)合物”。然后在外加磁場的作用下,復(fù)合物即分離出來。蕞經(jīng)過洗脫液洗去非特異性吸附的雜志、去鹽、純化后,即得到欲提取的核酸物質(zhì)。磁珠法核酸提取即可通過手工提取也可通過自動化核酸提取平臺進(jìn)行提取。南京正揚宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒的裝量是多少?

CHO宿主細(xì)胞殘留DNA檢測中,磁珠法核酸提取回收率偏低的原因有哪些?樣品問題:樣品存在抑制;操作原因:①洗滌液配制操作,外加有機(jī)溶劑的體積或純度不正確;②漏加或少加試劑組分;③磁珠保存不當(dāng),冷凍過;④在提取過程中將樣品管高速離心或長時間離心;⑤磁力架不匹配,磁性較弱;自動化核酸提取設(shè)備原因:①自動化核酸提取設(shè)備的磁分離方式設(shè)計有問題、設(shè)備的磁場弱;②使用自動化設(shè)備進(jìn)行核酸提取時所用的參數(shù)設(shè)置不合適;其他原因:①耗材非低吸附耗材;②耗材中有抑制物;③實驗室存在抑制物;宿主細(xì)胞殘留核酸提取時,回收率偏低的原因有哪些?鄭州宿主細(xì)胞殘留DNA提取常見問題

磁珠法核酸提取方式。rcAAV核酸提取操作流程

磁珠法核酸提取過程中的常見誤區(qū)--洗滌次數(shù)越多,洗滌效果越好提取得到的核酸雜質(zhì)過多時,使用者會考慮多進(jìn)行幾次洗滌,以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數(shù)確實有利于提純核酸,但考慮到每次洗滌都會損失一定量的核酸,且增加了核酸斷裂水解的可能性,所以一般來說洗滌次數(shù)控制在2~4次為宜。商業(yè)化核酸提取試劑盒都是經(jīng)過嚴(yán)格驗證的,在使用時嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行洗滌即可,隨意修改洗滌順序、洗滌磁珠、洗滌液的量,很可能會是核酸質(zhì)量下降。rcAAV核酸提取操作流程