基于10XGeomics動態(tài)微流控技術，利用Tn5轉(zhuǎn)座酶酶切開放染色質(zhì)，形成短片段，單細胞ATAC測序在表觀基因組學水平上，揭示單細胞染色質(zhì)的可及性問題，區(qū)分細胞異質(zhì)性，獲得開放染色質(zhì)的位置、轉(zhuǎn)錄因子的結合位點、核小體的調(diào)控區(qū)域和染色質(zhì)狀態(tài)等信息，是單細胞表觀遺傳學的重要突破：分析每個細胞數(shù)千個獨特的染色質(zhì)開放區(qū)域，識別細胞類型和細胞狀態(tài)；識別重要的轉(zhuǎn)錄因子，進行譜系和發(fā)育追蹤；探究驅(qū)動細胞類型和狀態(tài)之間基因表達差異的非編碼序列；探究細胞類型特異性和基因調(diào)控網(wǎng)絡特征等。是當前重要的多組學研究基因表達和表觀遺傳學的手段。單細胞測序技術提供了單個細胞水平下的科學研究視角。陜西二代測序單細胞測序數(shù)據(jù)分析
機體為響應各種應激，其細胞會從一種功能“狀態(tài)”轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N功能“狀態(tài)”；當細胞在不同狀態(tài)之間轉(zhuǎn)變時，往往會經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄重組，導致一些基因被沉默，一些基因被重新“喚醒”，但純化這些瞬態(tài)細胞進行研究是很困難或不可能的；scRNA-seq擬時序分析可以讓我們在不需要純化的情況下查看這些細胞狀態(tài)。擬時序分析，即根據(jù)不同細胞亞群基因表達量隨時間的變化情況，構建細胞譜系發(fā)育，但這里的時間并不是真時間，而是一個虛擬的時間，是指的細胞與細胞之間的轉(zhuǎn)化和演替的順序和軌跡。即使在同一個樣本中，也會存在多種不同的細胞形態(tài)。因此，不論測定了多少樣本，我們都可以采用擬時序分析對樣本中的細胞轉(zhuǎn)化和變化進行描述。北京10X Chromium X單細胞測序商業(yè)化服務深度的單細胞測序數(shù)據(jù)解讀助力醫(yī)療健康大時代。
現(xiàn)有的單細胞測序技術陣營在幾個主要領域存在差別。一個是分隔單個細胞以在其中進行微反應的物理平臺。在這個空間，單個細胞的內(nèi)容物釋放，轉(zhuǎn)錄本或其他生物分析物被標記或添加索引，以便下游識別?，F(xiàn)有技術的另一個主要區(qū)別是如何添加索引，就像生成測序文庫所涉及的流程步驟一樣。10XGenomics單細胞測序平臺采用動態(tài)微流控技（Drop-Seq具有類似的技術原理）。從橫向孔道中逐一輸入凝膠微珠，其中一列縱向孔道輸入細胞，凝膠微珠與細胞碰撞后會吸附在凝膠微珠上，并通過微流控技術，將之輸入到第二縱向孔道，即油相孔道中。這時候，就形成了一個個油滴并輸出并收集在EP管中。每一個油滴中會落入一個細胞以及一個凝膠微珠，那么在每一個凝膠微珠中上長滿了不同的CellBarcode和UMIBarcode連接形成的序列，再加上一端PolyT的抓手，構成我們的捕獲凝膠微珠。而這個凝膠微珠抓手就會使用oligodT抓住mRNA構建文庫。
基于10XNextGEM技術，單細胞測序一次實驗可以同時檢測近萬個細胞，可在一個樣本中同時獲3端mRNA表達譜、如需和免疫組庫（TCR和BCR）的數(shù)據(jù)進行聯(lián)合時，即某些研究還需結合基因的表達譜和V(D)J數(shù)據(jù)進行復雜組織樣本的是影響免疫應答分析，監(jiān)測免疫療法的效果，研究疾病發(fā)生、發(fā)展的分子機制，可進行單細胞免疫組庫測序：烈冰單細胞免疫組庫平臺具備：1000+項目經(jīng)驗，一次實驗可同時獲取1000-20000個細胞的文庫構建，獲得轉(zhuǎn)錄組和免疫組數(shù)據(jù)；具備完善的免疫組庫測序和實驗質(zhì)控流程，獲取V(D)J全長序列的配對信息；豐富的免疫組庫測序和數(shù)據(jù)分析經(jīng)驗，實現(xiàn)專屬個性化數(shù)據(jù)分析服務，搭配單細胞分析云平臺，一鍵導出交互性的動態(tài)結果報告。搭建多種測序數(shù)據(jù)的生物信息分析平臺，5000+項目檢驗，真實可信賴。
細胞計數(shù)和活力評估在評估樣本質(zhì)量時，需要在細胞清洗和過濾之后測定細胞活力，這一點至關重要。測定細胞活力有許多種方法，烈冰多年單細胞測序經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)臺盼藍法在鑒定活細胞與死細胞的比例時效果很好。細胞計數(shù)的準確性以及目標回收量和實際回收量之間的一致性，取決于我們了解樣本中有多少個細胞。一旦過濾和清洗完成，可采用細胞計數(shù)設備（如血球計數(shù)器或自動細胞計數(shù)儀）進行定量。這些設備不但能提供準確的細胞計數(shù)，還能計算出向微流體芯片上樣適量細胞所需的細胞懸液體積。單細胞多組學測序可識別重要的轉(zhuǎn)錄因子，進行譜系和發(fā)育追蹤。北京10X單細胞測序數(shù)據(jù)分析可視化
單細胞測序是高通量測序下的又一重大技術突破。陜西二代測序單細胞測序數(shù)據(jù)分析
10×Genomics單細胞方案要求使用具有較高活性的單細胞懸液。在實際實驗中，我們發(fā)現(xiàn)因為樣本類型和制備單細胞懸液方法的不同，容易出現(xiàn)單細胞懸液中死亡細胞的比例較高的情況。去除單細胞懸液中的死細胞和其他污染物對獲得高質(zhì)量數(shù)據(jù)是至關重要的。這是因為，死亡的細胞易裂解導致其中的RNA釋放出來。這種cell-freeRNA會導致檢測的背景噪聲，并會影響單細胞數(shù)據(jù)的質(zhì)量。因此當樣本活性較差時，對細胞懸液中細胞活性檢測后，需要進行一般死細胞去除的工作（一般懸液活性小于70%時考慮此操作），以保證較高的上機捕獲細胞的質(zhì)量。陜西二代測序單細胞測序數(shù)據(jù)分析
上海烈冰生物醫(yī)藥科技有限公司致力于醫(yī)藥健康，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求。烈冰生物作為醫(yī)藥健康的企業(yè)之一，為客戶提供良好的單細胞測序，生物大數(shù)據(jù)云分析平臺，空間轉(zhuǎn)錄組測序，單細胞多組學測序。烈冰生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念，影響并帶動團隊取得成功。烈冰生物始終關注醫(yī)藥健康市場，以敏銳的市場洞察力，實現(xiàn)與客戶的成長共贏。