無錫上清外泌體公司

來源: 發(fā)布時間:2023-12-09

當(dāng)外泌體在1983年頭次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、疙瘩侵襲等方方面面。有研究表明疙瘩來源的外泌體參與到疙瘩細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了疙瘩的生長與侵襲。外泌體通過調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)和疙瘩微環(huán)境,在疙瘩免疫治著中的作用日益受到關(guān)注。無錫上清外泌體公司

外泌體的物理表征方法:常用的外泌體物理表征方法是基于顯微鏡的方法,例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、低溫電子顯微鏡和原子力顯微鏡;動態(tài)光散射;納米粒子跟蹤分析;可調(diào)電阻脈沖傳感;和單個EV分析等。用于分析外泌體濃度、定量和概況的分子生物方法主要包括:實時定量PCR、數(shù)字PCR技術(shù)(基于芯片的dPCR、液滴數(shù)字PCR、ddPCR)、蛋白質(zhì)免疫印跡、全基因組測序(next-generationsequencing)、exome-targetedsequencing(下一代測序)、微陣列圖譜技術(shù)和ELISA技術(shù)等。血液外泌體芯片檢測外泌體富集、分離和檢測是當(dāng)前外泌體研究的熱點之一。

外泌體(細(xì)胞外囊泡)目前被認(rèn)為是通過生物活性脂質(zhì)、蛋白質(zhì)以及RNA來進行細(xì)胞之間的通訊,同樣外泌體也是目前研究較深入的細(xì)胞外囊泡,外泌體的直徑只有我們頭發(fā)直徑的百萬分之一(30~150nm),當(dāng)多泡體與細(xì)胞膜融合時釋放到細(xì)胞外的時候,富含許多生物活性分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、轉(zhuǎn)移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細(xì)胞外,這樣一來就可以被微環(huán)境中的靶細(xì)胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠(yuǎn)處。而外泌體與“目標(biāo)”進行交流方式主要有兩種途徑,一是通過胞吞作用被攝入到細(xì)胞內(nèi);二是通過膜融合的方式來與靶細(xì)胞膜進行融合,接著就會直接釋放其中含有的物質(zhì)以及信息至靶標(biāo)細(xì)胞,其實外泌體的作用形式是相互的靶細(xì)胞分泌含有細(xì)胞特異性RNA的外泌體作用于周圍細(xì)胞后可誘導(dǎo)其表型重組而獲得組織特異性的表型,而周圍細(xì)胞分泌的外泌體則可以通過調(diào)控蛋白表達來調(diào)控細(xì)胞的生理過程。

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而打開細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。手動超高速離心和自動化離心儀器的分離效果可能存在差異。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式:一是色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍。二是微流控分離法,該方法通過負(fù)壓及震蕩等機械原理分離外泌體,產(chǎn)量純度均具有較大幅度提高,但需要特定設(shè)備配合。外泌體分離方法之納米粒徑分析法:確定性橫向位移依賴于顆粒流動路徑的變化,而顆粒流動路徑取決于顆粒尺寸。這種方法雖然比較簡單,但是需要使用掃描電鏡技術(shù)、動態(tài)光散射技術(shù)、納米粒子跟蹤分析技術(shù)、單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)技術(shù)等。對于外泌體大小、形態(tài)、外泌體的濃度、zeta電位等分析也可以使用粒度分析儀。外泌體在疙瘩微環(huán)境中的參與,反映了其具有的高度的異質(zhì)性和復(fù)雜性。天津組織提取外泌體分離報價

分離過程中避免對外泌體結(jié)構(gòu)和功能造成影響至關(guān)重要。無錫上清外泌體公司

外泌體衍生物miRNA的重要應(yīng)用:miRNA是一類主要的小分子、單鏈、非編碼RNA分子,其成熟形式的長度在20到22個核苷酸(NT)之間,在幾乎所有生物途徑中發(fā)揮重要作用,包括細(xì)胞生長、增殖、分化、免疫反應(yīng),細(xì)胞凋亡,代謝和疙瘩發(fā)生。外泌體在體液中的主要作用是可以保護miRNA,防止其生物分子在非生理條件下(多次凍融循環(huán)、長期儲存和極端pH)降解。據(jù)報道,外泌體來源的miRNA在-20°C下可保持穩(wěn)定長達5年,并且對凍融循環(huán)具有抵抗力.這也使外泌體成為病癥和其他疾病的潛在生物標(biāo)志物。miRNA與包括病癥在內(nèi)的許多疾病的發(fā)病機制有關(guān),并且還被證明被遠(yuǎn)端或附近的受體細(xì)胞吸收作為外泌體中的貨物,作為細(xì)胞間通訊的一種方法,可能會影響發(fā)病機制。所以,外泌體可以被看作是miRNA轉(zhuǎn)移至目標(biāo)受體細(xì)胞的載體。無錫上清外泌體公司