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DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯化芐具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細(xì)胞壁的特性。本制品利用了氯化芐的這一特性,將植物樣品凍結(jié)融解后,再使用PipetTip的前面將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比,省去了液氮研磨等煩瑣步驟,有利于一次性處理大量樣品。而且,本制品經(jīng)過了改良,熱處理時(shí)間只需15分鐘,使用本制品從實(shí)驗(yàn)開始至水相回收只需30分鐘時(shí)間。得到的基因組DNA可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增及限制酶處理等。RNA提取的關(guān)鍵是避免RNA的降解和污染。北京血漿DNA提取公司
外泌體DNA提取過程:1、將吸附柱放入收集管內(nèi),將700μL上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),12,000rpm4℃離心1分鐘,棄收集管內(nèi)廢液;將剩余溶液轉(zhuǎn)移至吸附柱內(nèi),12,000rpm4℃離心1分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。2、將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL洗滌液A至吸附柱內(nèi),靜置2分鐘,12,000rpm4℃離心1分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。3、將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL洗滌液B至吸附柱內(nèi),12,000rpm4℃離心1分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。4、按每份樣本40μL取洗脫液(如10份提取樣本,即取400μL洗脫液),放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預(yù)熱。5、將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000rpm4℃離心2分鐘,離去殘留的洗滌液。6、取出吸附柱,放入新的1.5mL離心管內(nèi),加入上述預(yù)熱的40μL洗脫液,靜置3分鐘,12,000rpm4℃離心1分鐘,收集DNA溶液。7、-20℃保存,或直接用于下一步實(shí)驗(yàn)。深圳血液DNA提取哪家劃算DNA提取需要通過添加RNase消化RNA。
DNA提取試劑盒的保存方式:室溫。低溫保存可能會(huì)有沉淀析出。如果發(fā)生析出現(xiàn)象,請于50℃溶解后,再于室溫保存。DNA提取試劑盒主要可以分為以下幾大類:小量全血基因組DNA提取試劑盒、中量全血基因組DNA提取試劑盒、組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒、中量/大量組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒、全血/組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒、CTAB植物基因DNA提取試劑盒、新型植物基因組DNA提取試劑盒、酵母基因組DNA提取試劑盒、M13噬菌體單鏈基因組DNA提取試劑盒。
microRNA提取方法及步驟:頭一次使用前請先在70%乙醇、WashSolution1瓶和WashSolution2/3瓶中加入指定量乙醇!a.收集<107懸浮細(xì)胞到一個(gè)1.5ml離心管。(對(duì)于貼壁細(xì)胞,孔板培養(yǎng)和細(xì)胞瓶培養(yǎng)可以直接裂解,盡可能吸干凈所有培養(yǎng)液殘留后直接加入1ml的Lysis/Bindingbuffer,迅速輕搖使Lysis/Bindingbuffer充分和瓶底所有細(xì)胞接觸裂解細(xì)胞并滅活RNA酶,輕輕用移液槍反復(fù)吹打混勻。)b.13,000rpm離心10秒(或者300g離心5分鐘),使細(xì)胞沉淀下來。完全吸棄上清,留下細(xì)胞團(tuán),注意不完全棄上清會(huì)稀釋裂解液導(dǎo)致產(chǎn)量純度降低。c.輕彈管壁將細(xì)胞沉淀完全松散重懸,加入1mlLysis/Bindingbuffer,渦旋或者吹打,充分裂解混勻。RNA提取可以用于研究RNA的功能和相互作用。
DNA提取定量:分光光度法:測定DNA在A260的光吸收,計(jì)算濃度。雙鏈DNA:A260*稀釋倍數(shù)*50(ug/ml)單鏈DNA:A260*稀釋倍數(shù)*40(ug/ml)單鏈核苷酸DNA:A260*稀釋倍數(shù)*20(ug/ml).瓊脂糖平板法:在含溴乙錠的瓊脂糖平板上滴1-5ul樣品DNA和已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品,放置數(shù)小時(shí)后檢測。微型凝膠電泳:將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)電泳,染色,比較熒光強(qiáng)度。DNA提取之貯存:短期儲(chǔ)存:4℃或-20℃存放于TE緩沖液中。長期貯存:在70%乙醇,或在DNA溶液中加一滴氯仿,-70℃保存。若DNA分子量小或一片模糊,表明DNA有降解。北京血漿DNA提取公司
DNA提取的樣品準(zhǔn)備之生物組織:液氮?jiǎng)驖{法。北京血漿DNA提取公司
DNA提取的幾種方法介紹,以稀鹽酸溶液提取DNA時(shí),加入適量去污劑,如SDS可有助于蛋白質(zhì)與DNA的分離.在提取過程中為抑制組織中的DNase對(duì)DNA的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,并稱SSC溶液,提取DNA。陰離子去污劑法:用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質(zhì)變性,可以直接從生物材料中提取DNA.由于細(xì)胞中DNA與蛋白質(zhì)之間常借靜電引力或配位鍵結(jié)合,因?yàn)殛庪x子去污劑能夠破壞這種價(jià)鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA。北京血漿DNA提取公司
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