Recombinant Human BCMA Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-12-03

T5核酸外切酶(T5Exonuclease)具有以下特點和技術(shù)應用:1.**降解方向**:T5核酸外切酶按照5'→3'方向降解雙鏈或單鏈DNA。2.**起始消化位置**:T5核酸外切酶既能從單鏈或雙鏈DNA的5'末端起始消化,也可以從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)處起始消化。3.**對超螺旋雙鏈DNA的作用**:T5核酸外切酶無法降解超螺旋雙鏈DNA。4.**單鏈DNA核酸內(nèi)切酶活性**:T5核酸外切酶還具有單鏈DNA核酸內(nèi)切酶活性。5.**應用領(lǐng)域**:-用于Gibson組裝,這是一種在恒溫條件下有效連接帶有多個重疊序列片段的技術(shù)。-從完全連接的環(huán)狀雙鏈DNA中去除不完全連接產(chǎn)物。-降解堿裂解質(zhì)粒提取方法中產(chǎn)生的變性DNA,增加超螺旋DNA比例,提高DNA克隆和轉(zhuǎn)染效率。-降解質(zhì)粒樣品中污染的線性化和切刻DNA。6.**操作條件**:推薦在37℃溫育30分鐘,之后加入EDTA至終濃度為20mM終止反應。7.**儲存條件**:-25~-15℃保存,有效期3年。8.**注意事項**:避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止本品失活。這些特點和技術(shù)應用使得T5核酸外切酶在分子生物學實驗中,尤其是在DNA克隆和基因片段組裝中,具有重要的應用價值。Cas12a還可以高效地在一些重要的工業(yè)鏈霉菌菌株中產(chǎn)生編輯,這些菌株由于毒性而不能使用SpCas9進行編輯。Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag

Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag,標準物質(zhì)

在質(zhì)粒DNA提取過程中,確保DNA的完整性和活性至關(guān)重要,這通常涉及以下幾個關(guān)鍵因素:1.**溫和的裂解條件**:選擇適當?shù)牧呀夥椒▽τ诒3諨NA的完整性至關(guān)重要。對于大于15kb的質(zhì)粒DNA,應采用溫和的裂解方法,如將細菌懸浮于等滲的葡萄糖溶液中,加入溶菌酶和EDTA破壞細胞壁和細胞膜,以減少對質(zhì)粒DNA的機械剪切力,從而保護其完整性。2.**避免過度裂解**:在質(zhì)粒提取過程中,并非裂解時間越長越好。過長的裂解時間可能會造成基因組DNA片段的污染,影響質(zhì)粒的純度。3.**適當?shù)南礈旌拖疵?*:在純化過程中,適當?shù)南礈炜梢匀コ鞍踪|(zhì)和其他雜質(zhì),但過度洗滌可能會導致DNA的損失。洗脫步驟中,確保洗脫液完全浸潤柱膜,以保證結(jié)合在柱膜上的質(zhì)粒得以充分洗脫,避免因洗脫體積過小而影響質(zhì)粒得率。4.**避免DNA的降解**:在提取過程中,添加核酸酶抑制劑可以防止DNA被核酸酶降解。同時,避免長時間將DNA暴露在室溫下,以及避免多次凍融循環(huán),這些都有助于保護DNA的完整性。5.**低溫操作**:盡量在低溫條件下進行提取操作,以減少核酸酶的活性,從而保護DNA的完整性。

Recombinant Mouse TPO ProteinCRISPR-Cas12a(以前稱為Cpf1)是一種類II型V型內(nèi)切酶,偏好富含胸腺嘧啶的原間隔短回文重復序列鄰近基序。

Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag,標準物質(zhì)

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一種來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。這種酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶結(jié)構(gòu)域,因此它具有鏈置換活性,可以用于重組酶聚合酶擴增(RPA)等恒溫擴增技術(shù)。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些關(guān)鍵特性和應用:1.**活性定義**:在37°C條件下,30分鐘內(nèi)將10nmol的dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量定義為1個活性單位(U)。2.**熱失活條件**:75°C,20分鐘。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**儲存條件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事項**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配對的突出末端,因而不適用于生成平齊末端。-25°C時BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同溫度下Klenow片段(3'-5'exo-)的兩倍。6.**應用**:-隨機引物法標記。-cDNA第二條鏈的合成。-單個dA的加尾。-鏈置換的DNA合成。

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù)來純化質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它通常包括高性能納米磁珠和獨特的緩沖體系組合,通過裂解菌體后釋放的DNA,能夠有效地結(jié)合于磁珠表面,漂洗除雜后獲得高質(zhì)量的目的質(zhì)粒。以下是磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的一些主要特點和應用:1.**快速簡便**:操作步驟簡單,無需多次離心,整個抽提過程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**:可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA質(zhì)量高,完整性好,OD260/280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/230比值大于2.0。3.**適用性廣**:適用于1-5mL小體積高通量菌液質(zhì)粒抽提,且抽提所得的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等各種下游分子生物學實驗。4.**自動化兼容**:可整合移液法自動化儀器和磁棒法自動化儀器進行高通量提取實驗。5.**安全性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環(huán)保和安全。6.**成本效益**:相比傳統(tǒng)的離心柱法,磁珠法可以減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒,且操作更為簡便快捷。7.**操作靈活**:磁珠的使用量可靈活調(diào)節(jié),適合不同體積和濃度的樣品處理。盡管Ultra-Long Master Mix設計用于長片段擴增,但在某些情況下,可能出現(xiàn)非特異性擴增,需要通過優(yōu)化引物。

Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag,標準物質(zhì)

BstDNA聚合酶對dUTP的耐受性對實驗結(jié)果有以下影響:1.**防止交叉污染**:BstDNA聚合酶具有較高的dUTP耐受性,這意味著它可以在反應體系中添加dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)的情況下工作,有效防止LAMP產(chǎn)物的交叉污染,確保數(shù)據(jù)的準確性。2.**保持靈敏度和擴增效率**:即使在引入dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng),使用dUTP替換dTTP的情況下,BstDNA聚合酶的靈敏度及擴增效率不受影響。實驗數(shù)據(jù)顯示,在反應體系中添加dUTP對BstDNA聚合酶的擴增靈敏度和效率沒有負面影響。3.**提高實驗的可靠性**:由于BstDNA聚合酶能夠在高濃度的dUTP存在下保持活性,這使得它在進行等溫擴增時更加可靠,尤其是在需要防止DNA污染的實驗中。4.**兼容dUTP/UDG系統(tǒng)**:BstDNA聚合酶對dUTP的耐受性好,高度兼容dUTP/UDG系統(tǒng),這對于避免交叉污染和提高實驗結(jié)果的準確性至關(guān)重要。綜上所述,BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性為等溫擴增實驗提供了一個重要的優(yōu)勢,即在保持高靈敏度和擴增效率的同時,能夠有效防止交叉污染,從而提高實驗結(jié)果的可靠性和準確性。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒,它結(jié)合了反轉(zhuǎn)錄和PCR擴增步驟。Recombinant Human SIGIRR Protein,hFc Tag

Cpf1是一種新發(fā)現(xiàn)的類2/型V CRISPR-Cas DNA內(nèi)切酶,在不同系統(tǒng)中顯示出一系列的活性。Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag

牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在實驗室中的使用主要涉及以下幾個步驟:1.**DNA載體連接**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I可以用于DNA載體連接,特別是在TOPO克隆載體制備中。它能夠識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT],并與DNA形成共價連接形成穩(wěn)定復合物,遇到DNA的5’-OH基團后,重新連接形成完整DNA鏈。2.**接頭連接**:-在NGS建庫中,牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I可用于接頭連接。這包括將含有特定序列的接頭A和接頭B與酶一起孵育,以實現(xiàn)DNA片段的連接。3.**操作步驟**:-**質(zhì)粒解旋**:將超螺旋質(zhì)粒DNA與牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I混合,在37°C下孵育5-15分鐘,以實現(xiàn)質(zhì)粒的解旋。-**接頭連接**:將接頭A(含CCCTT序列)和接頭B(含5’OH)與牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I混合,在37°C下孵育5-15分鐘,以實現(xiàn)接頭的連接。4.**注意事項**:-雙鏈接頭A通常5’端做NH2封閉修飾,以防止自連接;接頭A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再長的尾巴會導致連接效率大幅下降。-雙鏈接頭B的5’端必須包含-OH。-由于該酶應用廣,在不同的實驗中使用策略不同,需要靈活運用,并根據(jù)具體文獻進行調(diào)整。


Recombinant Human BCMA Protein,His-Avi Tag