Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein

pA-MNase（蛋白A-微球菌核酸酶）在以下實(shí)驗(yàn)中特別有用：1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**：這是一種用于研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的技術(shù)，pA-MNase在此技術(shù)中用于在免疫沉淀后切割染色質(zhì)DNA，以分析特定蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合位點(diǎn)。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**：這是一種蛋白質(zhì)-基因組互作研究技術(shù)，pA-MNase在此技術(shù)中用于在目標(biāo)蛋白質(zhì)被抗體識(shí)別后，通過(guò)核酸酶活性切割附近的DNA，從而釋放與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術(shù)相比傳統(tǒng)的ChIP-Seq具有實(shí)驗(yàn)周期短、信噪比高、可重復(fù)性好以及細(xì)胞投入量低的優(yōu)勢(shì)，尤其適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、**以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。3.**染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)**：pA-MNase在染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中用于染色質(zhì)片段化，它在核小體間DNAlinker上進(jìn)行切割保持了核小體的完整性，并且由于其溫和的酶解條件，消除了超聲功率的可變性和超聲過(guò)程中染色質(zhì)乳化所帶來(lái)的負(fù)面影響。4.**去除核酸污染**：pA-MNase也可用于去除細(xì)胞裂解液中的核酸，以減少樣品的粘度，這對(duì)于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)尤為重要。

Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個(gè)步驟：1.**識(shí)別與結(jié)合**：-Cre重組酶首先識(shí)別并分別結(jié)合兩個(gè)LoxP序列的兩個(gè)反向重復(fù)序列，形成一個(gè)二聚體。2.**四聚體形成**：-兩個(gè)二聚體互相靠近，形成由四個(gè)Cre分子與兩個(gè)LoxP位點(diǎn)結(jié)合形成的四聚體復(fù)合物。3.**DNA切割與交換**：-Cre重組酶在每個(gè)LoxP位點(diǎn)的間隔序列中引導(dǎo)單鏈切割，產(chǎn)生帶有3’端羥基的斷裂。每個(gè)LoxP位點(diǎn)的兩個(gè)單鏈分別被切割。切割產(chǎn)生的自由3’端與對(duì)側(cè)的3’端進(jìn)行交換和重連，形成Holliday交叉結(jié)構(gòu)。4.**分子重組與解旋**：-Holliday交叉結(jié)構(gòu)通過(guò)Cre酶的作用被解旋并重組，形成新的重組產(chǎn)物。這個(gè)過(guò)程導(dǎo)致兩個(gè)LoxP位點(diǎn)之間的DNA序列被刪除、反轉(zhuǎn)或易位，具體效果取決于LoxP序列的排列方式（方向和位置）。5.**條件性基因編輯**：-通過(guò)建立特異性Cre小鼠，該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)，可在特定細(xì)胞或組織或全身表達(dá)Cre重組酶。與帶有Lox位點(diǎn)的Flox小鼠雜交，子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠，實(shí)現(xiàn)條件性基因打靶（表達(dá)或敲除靶基因）。Recombinant Human Jagged 1/JAG1 Protein,His TagUBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶，其在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣，主要包括以下幾個(gè)方面：1.**PCR產(chǎn)物的純化**：磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA，有效去除酶、dNTP、鹽類(lèi)等雜質(zhì)，回收率高，產(chǎn)物純度好，可以直接應(yīng)用于PCR、連接、測(cè)序、NGS建庫(kù)等下游實(shí)驗(yàn)。2.**基因組DNA的提取**：適用于從血液、唾液、口腔拭子和動(dòng)物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA，提取的DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，適合高通量工作站的自動(dòng)化提取。3.**質(zhì)粒DNA的提取**：磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA，通過(guò)精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。4.**DNA片段的分離**：有許多類(lèi)型的DNA分離試劑盒可供選擇，包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測(cè)序協(xié)議進(jìn)行分離，在這種情況下，可以用能選擇分子大小的磁珠來(lái)分離片段。5.**自動(dòng)化和高通量操作**：磁珠法試劑盒適合手工操作，也可用于自動(dòng)化工作站或核酸自動(dòng)提取儀，實(shí)現(xiàn)高通量操作。6.**分子生物學(xué)研究**：磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進(jìn)化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用，為遺傳病研究、篩查等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。

使用BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads（血液基因組DNA提取試劑盒，磁珠法）進(jìn)行血液樣本中基因組DNA的提取，主要步驟如下：1.**實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備**：準(zhǔn)備抗凝全血樣本（如EDTA抗凝血），移液器及無(wú)菌，15ml離心管，無(wú)水乙醇，70%乙醇，干凈的吸水紙，渦旋振蕩器，金屬浴/水浴，臺(tái)式離心機(jī)等。2.**樣本處理**：取適量血液樣本，根據(jù)試劑盒要求，可能需要將血液體積調(diào)整至特定量，例如200μl，并可能需要加入PBS緩沖液。3.**裂解血液細(xì)胞**：向血液樣本中加入蛋白酶K和細(xì)胞裂解液，渦旋混勻后，置于金屬浴或水浴中進(jìn)行裂解，通常在65°C孵育10-15分鐘，并在此期間定期混勻。4.**DNA與磁珠結(jié)合**：向裂解后的樣本中加入異丙醇和磁珠懸浮液，渦旋混勻后，室溫放置一段時(shí)間，以便于基因組DNA與磁珠結(jié)合。5.**磁珠分離**：將樣本置于磁力架上，待磁珠聚集后，小心移除上清液，去除雜質(zhì)。6.**洗滌磁珠**：向磁珠中加入漂洗液和洗滌液，進(jìn)行洗滌以去除殘留的蛋白質(zhì)和鹽分，然后再次使用磁力架分離磁珠，移除洗滌液。

蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）是一種特殊的融合蛋白，它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶（MNase，MicrococcalNuclease）的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**融合表達(dá)產(chǎn)物**：pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達(dá)產(chǎn)物，因此它同時(shí)具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**：由于其雙重功能，pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究，特別是在ChIC（ChromatinImmunocleavage）和CUT&RUN（CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease）技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**：ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的細(xì)胞壁表面蛋白，分子量為42kDa，能特異性地與哺乳動(dòng)物免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）結(jié)合，通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶（MNase）的特性**：MNase是一種核酸內(nèi)切酶，能夠降解核酸，常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸，減少細(xì)胞裂解液的粘度，以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測(cè)序。5.**反應(yīng)條件**：MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer，需要補(bǔ)充100μg/ml重組白蛋白，分子生物學(xué)級(jí)，并在37°C下孵化。許多Probe qPCR Mix (2×)產(chǎn)品采用熱啟動(dòng)DNA聚合酶，能減少非特異性擴(kuò)增，提高反應(yīng)的靈敏度和特異性 。Recombinant Human SIRP alpha V4 Protein,His-Avi Tag

泛素蛋白的C末端通常通過(guò)酰胺鍵與靶蛋白的氨基團(tuán)連接在一起，最常見(jiàn)的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團(tuán)相連。Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag

BstDNAPolymerase,LargeFragment（嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段）是一種經(jīng)過(guò)改造的酶，它來(lái)源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillusstearothermophilus）DNA聚合酶I，通過(guò)重組技術(shù)在大腸桿菌中表達(dá)并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性，但不具有5'→3'的核酸外切酶活性，因此它在等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)中非常有用，如環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）和滾環(huán)擴(kuò)增（RCA）等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**等溫?cái)U(kuò)增**：BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強(qiáng)的鏈置換能力，適用于多種等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，這些反應(yīng)通常在50-68°C之間進(jìn)行，比較好反應(yīng)溫度為65°C。2.**快速測(cè)序**：由于其高聚合酶活性，BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測(cè)序，特別是對(duì)于高GC含量的DNA模板或微量（納克量級(jí)）DNA模板的測(cè)序。3.**全基因組擴(kuò)增**：BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴(kuò)增（WGA），這是一種在不需要熱循環(huán)儀的情況下擴(kuò)增整個(gè)基因組DNA的技術(shù)。4.**高dUTP耐受性**：與BstDNAPolymerase2.0相比，BstDNAPolymerase,LargeFragment在進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增時(shí)不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力，這使得它在某些應(yīng)用中更具優(yōu)勢(shì)。Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag