Recombinant Human Notch 3 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-10-21

N末端His標(biāo)簽的泛素蛋白(RecombinantHumanUbiquitinProteinTagged-HisTag,UB)是一種經(jīng)過遺傳工程改造,在其N末端融合了His標(biāo)簽的泛素蛋白。以下是這種蛋白的一些特點:1.**His標(biāo)簽**:N末端His標(biāo)簽是一種常見的融合標(biāo)簽,用于提高蛋白質(zhì)的可溶性和便于通過親和層析進行純化。His標(biāo)簽通常由6到10個組氨酸(His)組成。2.**重組表達**:這種泛素蛋白通常在大腸桿菌(E.coli)或其他宿主細胞中通過重組DNA技術(shù)表達。3.**高度保守**:泛素蛋白是一個76個氨基酸殘基的多肽,在真核生物中高度保守。4.**分子量**:由于N末端添加了His標(biāo)簽,重組泛素蛋白的分子量會略大于天然泛素(約8.5kDa)。5.**純度**:重組泛素蛋白通常具有高純度(>95%bySDS-PAGE),適合用于各種生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗。6.**溶解性**:His標(biāo)簽的添加可以提高蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解性,便于實驗操作。7.**穩(wěn)定性**:凍干粉形式的重組泛素蛋白在-25~-15℃保存,具有較長的有效期,通常為一年。8.**應(yīng)用廣**:N末端His標(biāo)簽的泛素蛋白可用于多種實驗,包括蛋白質(zhì)泛素化、E3泛素連接酶活性測定、蛋白質(zhì)相互作用研究等。通過優(yōu)化crRNA的設(shè)計,可以提高FnCas12a的特異性和靈敏度,例如在microRNA檢測中 。Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag

Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

11A型肺炎多糖鼠單抗在疫苗研發(fā)中主要扮演的角色是作為特異性的識別分子,它可以識別并結(jié)合到肺炎鏈球菌11A型的多糖抗原上。這種單抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具體體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**應(yīng)答**:通過將肺炎多糖與蛋白載體(如乙肝表面蛋白)偶聯(lián),可以提高疫苗的免疫原性,使得接種疫苗的個體能夠產(chǎn)生更高水平的抗體和免疫記憶。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠單抗的制備,可以用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,這對于疫苗的質(zhì)量控制和效力評估至關(guān)重要。3.**促進多糖蛋白結(jié)合疫苗的開發(fā)**:利用單克隆抗體技術(shù),可以開發(fā)出新型的肺炎多糖結(jié)合蛋白載體疫苗,這種疫苗能夠激發(fā)更好的免疫反應(yīng),尤其是提高對抵抗力低下人群(如老人、化療患者及2歲以下嬰兒)的保護效果。4.**提高疫苗的特異性和親和力**:11A型肺炎多糖鼠單抗由于其高度的特異性,可以更精確地靶向肺炎鏈球菌的11A型多糖,從而提高疫苗的預(yù)防效果。5.**疫苗質(zhì)量控制**:單克隆抗體可用于疫苗生產(chǎn)過程中的抗原含量測定,確保疫苗的質(zhì)量和效力,這對于疫苗研發(fā)和生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制至關(guān)重要。Recombinant Mouse CD8 alpha/CD8A Protein,His Tag通過工程化改造,如將FnCas12a與單鏈DNA外切酶融合,可以提高基因編輯效率,擴大FnCas12a可以靶向的范圍 。

Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

EndoS酶在抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)研究中的具體應(yīng)用主要體現(xiàn)在糖鏈定點偶聯(lián)技術(shù)方面。根據(jù)上海藥物研究所的研究進展,EndoS酶被用于實現(xiàn)定點ADC化合物的“一步”制備,這是一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略。該策略利用了新穎截短型糖結(jié)構(gòu)的藥物-連接子和野生型糖苷內(nèi)切酶EndoS2,將小分子細胞毒藥物直接定點連接到抗體糖基化位點,從而克服了傳統(tǒng)糖鏈定點ADC制備策略的限制。具體來說,研究人員通過篩選發(fā)現(xiàn),EndoS2酶可以將二糖底物L(fēng)acNAc轉(zhuǎn)移至去糖抗體N297位糖基化位點,并且LacNAc半乳糖6號位唾液酸化修飾不影響EndoS2的轉(zhuǎn)糖基化活性。這一發(fā)現(xiàn)使得EndoS2和LacNAc的組合可以直接實現(xiàn)野生型抗體的糖基化改造,且EndoS2對多樣化LacNAc修飾的兼容性,可以高效獲得多樣性功能修飾的巖藻糖化或去巖藻糖化的糖工程抗體。此外,研究人員還利用疊氮化修飾的LacNAc底物實現(xiàn)了抗體糖基化位點的“一步”疊氮化修飾,并通過點擊化學(xué)反應(yīng)偶聯(lián)藥物-連接子,實現(xiàn)了“兩步”制備得到定點ADC化合物。

在基因編輯中,除了NLS-Cas9-EGFPNuclease,還有多種技術(shù)可以提高編輯的特異性,這些技術(shù)包括:1.**高保真Cas9變體**:通過工程化改造Cas9蛋白,例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真變體,可以減少脫靶效應(yīng),提高特異性。2.**堿基編輯器(BaseEditors)**:這類編輯器可以在不產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂的情況下直接在特定位置進行單個堿基的轉(zhuǎn)換,從而減少非目標(biāo)編輯。3.**引導(dǎo)編輯器(PrimeEditors)**:由哈佛大學(xué)劉如謙教授團隊開發(fā)的引導(dǎo)編輯器可以在不依賴DNA雙鏈斷裂和同源定向修復(fù)的情況下,實現(xiàn)精細的基因組編輯。4.**CRISPRi和CRISPRa**:這兩種技術(shù)分別用于抑制或激起特定基因的表達,而不切割DNA,從而減少了脫靶風(fēng)險。5.**新型CRISPR系統(tǒng)**:例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ,這些系統(tǒng)可能具有不同的PAM序列要求和更高的特異性。6.**AI輔助設(shè)計**:利用人工智能預(yù)測和優(yōu)化sgRNA的設(shè)計,以減少脫靶效應(yīng)。7.**優(yōu)化遞送系統(tǒng)**:改進CRISPR組分的遞送方法,例如使用核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,可以提高編輯效率和特異性。8.轉(zhuǎn)座子編輯系統(tǒng):利用轉(zhuǎn)座子進行基因組編輯,可以在不依賴DNA雙鏈斷裂的情況下實現(xiàn)大片段DNA序列的插入。

激發(fā)的泛素被轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2的活性位點半胱氨酸殘基上,形成E2-泛素硫酯中間體。

Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

熒光光譜分析是一種強大的技術(shù),可以用來優(yōu)化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優(yōu)化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發(fā)和發(fā)射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜,以確定其比較大激發(fā)波長和比較大發(fā)射波長。-這些波長是EGFP熒光特性的關(guān)鍵參數(shù),可以用于后續(xù)的成像和檢測實驗。2.**優(yōu)化激發(fā)和發(fā)射濾光片**:-根據(jù)EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜,選擇合適的濾光片以比較大化熒光信號并減少背景噪聲。3.**評估熒光量子產(chǎn)率**:-熒光量子產(chǎn)率是衡量熒光效率的一個重要參數(shù),它表示激發(fā)態(tài)分子產(chǎn)生熒光的概率。-通過比較EGFP與其他標(biāo)準(zhǔn)熒光物質(zhì)的熒光強度,可以評估其量子產(chǎn)率。4.**熒光緩沖液的優(yōu)化**:-某些緩沖液成分可能會影響EGFP的熒光特性,如pH值、離子強度和抗氧化劑的存在。-通過改變緩沖液條件,可以優(yōu)化EGFP的熒光強度和穩(wěn)定性。5.**溫度和氧濃度的影響**:-溫度和氧濃度會影響EGFP的熒光特性,包括熒光強度和光穩(wěn)定性。-在熒光光譜分析中,可以通過改變溫度和氧濃度來評估這些因素對EGFP熒光特性的影響。FnCas12a可以識別不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',這增加了它可以靶向的基因組區(qū)域 。Recombinant FITC-Labeled Human FOLR1 Protein,His-Avi Tag

泛素連接酶E3識別特定的靶蛋白,并促進E2上的泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,形成靶蛋白-泛素復(fù)合物。Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag

EndoS,即糖苷內(nèi)切酶S(Endo-S),是一種具有高度特異性的酶,它在生物化學(xué)研究中有著重要應(yīng)用,尤其是在糖蛋白和抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些關(guān)鍵特點:1.**特異性**:EndoS能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈的殼二糖結(jié)構(gòu),即在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間的連接處進行切割。2.**應(yīng)用**:在制備糖鏈定點ADC化合物中,EndoS被用于將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體糖基化位點,提供了一種重要的技術(shù)方法。3.**兼容性**:EndoS對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物,實現(xiàn)抗體糖基化修飾。4.**活性**:EndoS的活性對多肽沒有嚴(yán)格的要求,可以接受蛋白質(zhì)、肽、天門冬酰胺或游離聚糖作為底物。但是,對于具有三、四個支鏈的唾液酸化及去唾液酸化的聚糖,EndoS沒有活性。5.**產(chǎn)品形式**:EndoS通常以帶有His標(biāo)簽的形式存在,便于從反應(yīng)中去除,這在實驗操作中提供了便利。6.**研究進展**:EndoS在去糖基化方法研究中是一個重要的工具,特別是在研究糖蛋白的多肽部分和多糖部分的結(jié)構(gòu)和功能時。

Recombinant Human Notch 3 Protein,His Tag