Recombinant Cynomolgus NKp46/NCR1/CD335 Protein

使用PreScissionProtease進(jìn)行蛋白質(zhì)切割后，可以采用以下方法來提高產(chǎn)品的純度：1.**親和層析**：利用GST標(biāo)簽或His標(biāo)簽等進(jìn)行一步或多步親和層析，以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**：根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷特性，使用陽離子或陰離子交換層析進(jìn)一步純化蛋白質(zhì)。3.**凝膠滲透層析**：通過分子大小的排阻，去除分子量較大或較小的雜質(zhì)。4.**反向?qū)游?*：使用反相高效液相色譜（HPLC）技術(shù)，根據(jù)蛋白質(zhì)與固定相的疏水相互作用進(jìn)行分離。5.**超濾/透析**：使用超濾膜或透析袋去除低分子量的雜質(zhì)，如鹽分、緩沖液成分或小分子蛋白質(zhì)。6.**二次親和層析**：在初次親和層析后，可以進(jìn)行二次親和層析以進(jìn)一步提高純度。7.**蛋白質(zhì)純化柱**：使用商業(yè)化的蛋白質(zhì)純化柱，如GST-Sepharose或Ni-NTA柱，進(jìn)行快速純化。8.**等電聚焦電泳**：通過等電聚焦電泳（IEF）分離具有不同等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)。9.**SDS-PAGE**：使用SDS-PAGE凝膠電泳分析蛋白質(zhì)的純度，并可通過凝膠切片回收相對純凈的蛋白質(zhì)條帶。10.**質(zhì)譜分析**：利用質(zhì)譜技術(shù)鑒定蛋白質(zhì)的確切質(zhì)量和序列來確保蛋白質(zhì)的純度和正確性。泛素分子可以通過其內(nèi)部的賴氨酸殘基（如Lys48）與其他泛素分子形成多聚泛素鏈。Recombinant Cynomolgus NKp46/NCR1/CD335 Protein,hFc Tag

EndoS糖苷內(nèi)切酶S在抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）研究中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在糖鏈定點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)上。通過上海藥物所的研究，開發(fā)了一種新穎的糖鏈定點(diǎn)ADC制備策略，利用EndoS2這種糖苷內(nèi)切酶，可以將小分子細(xì)胞毒藥物“一步”定點(diǎn)連接到抗體的糖基化位點(diǎn)，實現(xiàn)了糖鏈定點(diǎn)ADC化合物的制備。定點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)相比傳統(tǒng)的隨機(jī)偶聯(lián)具有更好的方法指數(shù)，能夠提高ADC的均一性和穩(wěn)定性，是當(dāng)前ADC領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。在抗體的Fc結(jié)構(gòu)域N297位，這是一個保守的糖基化位點(diǎn)，通過在該位點(diǎn)引入細(xì)胞物質(zhì)，可以形成具有優(yōu)勢的糖鏈定點(diǎn)ADC化合物（glycosite-specificADCs,gsADCs）。此外，EndoS2對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性，能夠高效獲得功能修飾的糖工程抗體，并且可以用于抗體的內(nèi)吞成像研究及糖鏈延伸等功能化研究。研究人員通過這種“一步”制備策略得到的糖鏈定點(diǎn)ADC化合物，在結(jié)構(gòu)均一性、親水性、體外穩(wěn)定性以及體外活性方面表現(xiàn)良好，并且在體內(nèi)瘤抑制活性方面，相比陽性對照ADC化合物，在低載藥量的情況下具有更強(qiáng)的抑制效果。EndoS酶的這些應(yīng)用，不僅展示了其在簡化ADC制備流程中的潛力，還有助于推動定點(diǎn)ADC藥物的深入發(fā)展，為未來的生物藥物開發(fā)提供了新的思路和方法。Recombinant Mouse CD27 Ligand/CD70 Protein,hFc Tag在cDNA末端快速擴(kuò)增（RACE）技術(shù)中，Ultra-Long Master Mix 可以用來擴(kuò)增5'和3'末端的長片段cDNA。

大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶（Aprotinin）是一種通過基因工程技術(shù)在大腸桿菌中生產(chǎn)的蛋白酶抑制劑，具有以下特性和應(yīng)用：1.**來源**：重組抑肽酶是通過大腸桿菌（E.coli）表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的，確保了無動物源性成分，減少了病毒污染的風(fēng)險。2.**結(jié)構(gòu)**：它是一種單體球狀蛋白，由58個氨基酸組成，具有三個交聯(lián)二硫鍵的單個多肽鏈。3.**功能**：作為一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑，重組抑肽酶能夠抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶等的活性。4.**應(yīng)用**：在生物技術(shù)過程中，重組抑肽酶可以替代動物源性抑肽酶，用于重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性，以及在細(xì)胞培養(yǎng)等過程中。5.**產(chǎn)品信息**：通常以粉末形式提供，具有明確的貨號和規(guī)格，如1mg或10mg的包裝。6.**產(chǎn)品性質(zhì)**：包括外觀、溶解度、純度、蛋白含量、酶濃度和活性定義等詳細(xì)參數(shù)。7.**儲存條件**：凍干粉在2~8℃保存，有效期為2年。8.**使用方法**：推薦的結(jié)合pH>6.0，在pH<3.0的條件下不結(jié)合，可直接使用0.9%NaCl溶解，溶解后可-20℃儲存。9.**注意事項**：產(chǎn)品作科研用途，操作時需穿著實驗服并佩戴一次性手套。

通過SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠電泳）和Westernblot（西方印跡）可以有效地檢測帶有His標(biāo)簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進(jìn)行這些檢測的步驟：###SDS-PAGE步驟：1.**樣品準(zhǔn)備**：-將重組泛素蛋白溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中，通常含有還原劑（如DTT或β-巰基乙醇）以斷裂二硫鍵。-將樣品在95-100°C下加熱5分鐘以變性蛋白質(zhì)。2.**凝膠準(zhǔn)備**：-根據(jù)需要的分辨率選擇合適的凝膠濃度（例如，12%或15%凝膠用于檢測20-100kDa的蛋白質(zhì)）。3.**上樣**：-將變性后的樣品加入到凝膠的相應(yīng)孔中，同時加入分子量標(biāo)記物作為參照。4.**電泳**：-在恒定電壓或恒定電流下進(jìn)行電泳，直到樣品在凝膠中充分分離。5.**染色**：-使用考馬斯亮藍(lán)或其他蛋白質(zhì)染色劑對凝膠進(jìn)行染色，以可視化蛋白質(zhì)條帶。6.**分析**：-通過比較樣品條帶與分子量標(biāo)記物，評估蛋白質(zhì)的分子量和純度。###Westernblot步驟：1.**轉(zhuǎn)膜**：-將SDS-PAGE分離的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到PVDF或硝酸纖維素膜上。2.**封閉**：-使用封閉液（如5%脫脂奶粉或1%BSA溶液）封閉膜上未被蛋白占據(jù)的部分，以減少非特異性結(jié)合。3.**一抗孵育**：-使用特異性識別His標(biāo)簽的抗體（一抗）與膜上的蛋白質(zhì)孵育，通常在4°C過夜。Cpf1是一種新發(fā)現(xiàn)的類2/型V CRISPR-Cas DNA內(nèi)切酶，在不同系統(tǒng)中顯示出一系列的活性。

重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白，Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴（Gilamonster）的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1（GLP-1）具有53%的序列同源性，并與相同的膜受體相互作用。重組Exendin-4在體內(nèi)增強(qiáng)依賴葡萄糖的胰島素分泌，抑制不適當(dāng)?shù)母咭雀叩难撬胤置?，并減慢胃排空。它還在體外和動物模型中促進(jìn)β細(xì)胞增殖和新生。重組Exendin-4是通過大腸桿菌表達(dá)的合成DNA序列編碼的39個氨基酸的Exendin-4。重組Exendin-4的特點(diǎn)包括：-分子量約為4.2kDa，是一個非糖基化的單一多肽鏈，包含39個氨基酸。-具有調(diào)節(jié)血糖水平、減少胰島素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血紅蛋白（HbA1c）和刺激β細(xì)胞生長以促進(jìn)胰島素產(chǎn)生等多種生物活性。-通常以凍干粉的形式提供，需要在無菌條件下用無菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水溶液復(fù)溶。-純度高于96%，通過SDS-PAGE和HPLC分析確定。-內(nèi)毒的素含量低于10EU/mg，通過LAL方法測定。在實驗中，可以通過以下方法來優(yōu)化重組Exendin-4的熒光特性：1.選擇合適的激發(fā)和發(fā)射波長。2.優(yōu)化激發(fā)和發(fā)射濾光片。3.評估熒光量子產(chǎn)率。4.調(diào)整緩沖液條件，包括pH值和離子強(qiáng)度。5.控制溫度和氧濃度。Multiplex Probe qPCR Mix 已預(yù)混了低濃度ROX參比染料，適用于需要低濃度ROX校正的熒光定量PCR儀 。Recombinant Human ANXA2 Protein,His Tag

Probe qPCR Mix (2×) 支持多重qPCR，即在單個反應(yīng)中同時檢測多個靶標(biāo)基因 。Recombinant Cynomolgus NKp46/NCR1/CD335 Protein,hFc Tag

NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白，它在N端和C端都添加了核定位信號（NLS），這使得它能夠更有效地進(jìn)入細(xì)胞核并進(jìn)行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導(dǎo)RNA（gRNA）形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白（RNP）復(fù)合物，可以在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核，從而誘導(dǎo)特定的DNA雙鏈斷裂，實現(xiàn)基因編輯。與傳統(tǒng)的mRNA或質(zhì)粒系統(tǒng)相比，使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉(zhuǎn)錄和翻譯過程，因此可以避免將外源DNA插入基因組的風(fēng)險，這對于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點(diǎn)包括：1.無DNA：系統(tǒng)不添加外部DNA，降低了插入外源DNA的風(fēng)險。2.高切割效率：雙NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核。3.低脫靶效應(yīng)：Cas9核酸酶的瞬時表達(dá)提高了切割的特異性。4.節(jié)省時間：無需轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA，以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時的體內(nèi)基因編輯。產(chǎn)品的保存條件通常是在-25~-15℃，有效期為一年。使用時，可以根據(jù)推薦的反應(yīng)體系進(jìn)行體外DNA裂解實驗，并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率。具體產(chǎn)品的詳細(xì)信息和應(yīng)用指南，可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。Recombinant Cynomolgus NKp46/NCR1/CD335 Protein,hFc Tag