pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術中,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結構域為ProteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結構域為Tn5轉(zhuǎn)座酶,能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉(zhuǎn)座復合體后隨機插入靶DNA中。4.**應用廣**:適用于CUT&Tag技術、高通量測序建庫、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細胞、以及表觀遺傳學等研究領域。5.**操作簡便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟,可以在一步反應中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時。6.**低細胞投入量**:CUT&Tag技術允許從低至60個細胞的樣本中獲得結果,甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米分離技術和細菌細胞的SDS堿裂解法從菌體中提取高質(zhì)量質(zhì)粒DNA的實驗工具。以下是一些關于磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的關鍵信息:1.**操作簡便性**:-操作快速簡單,可以在60分鐘內(nèi)完成96個不同樣品的提取,實現(xiàn)質(zhì)粒提取的高通量化和自動化。2.**高純度和高產(chǎn)量**:-抽提得到的質(zhì)粒純度高,OD260/OD280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/OD230比值大于2.0,可以直接用于轉(zhuǎn)化、DNA測序、PCR和酶切等后續(xù)實驗。3.**試劑盒組件**:-包含BufferMP1、BufferMP2、BufferMP3、PureMagBeads、BufferMPB、TEBuffer(pH8.0)、RNaseA等組分。4.**應用范圍**:-適用于從大腸桿菌中抽提小量質(zhì)粒,所得質(zhì)??芍苯佑糜诩毎D(zhuǎn)染、DNA測序、PCR等實驗。5.**效率和純度**:-與同類產(chǎn)品相比,提取效率更高,獲得質(zhì)粒的純度更高;與柱式法相比,可減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒。6.**注意事項**:-例如,SgMagBeads需要充分洗滌和干燥,以保證無乙醇殘留,并且在吸取上清時避免吸入SgMagBeads。7.**保存條件**:-室溫保存,有效期一年。磁珠長期不使用時,可以4℃保存以延長保存時間。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒通過以下方式實現(xiàn)高靈敏性:1.**熒光探針技術**:試劑盒采用熒光標記的DNA探針,這種探針在沒有Benzonase核酸酶的樣品中穩(wěn)定存在且不產(chǎn)生熒光信號。當樣品中含有核酸酶殘留時,核酸酶會切割熒光標記的DNA探針,導致熒光信號的增強。這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量,實現(xiàn)高靈敏度檢測。2.**熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)**:該技術利用了供體(Donor)和受體(Acceptor)熒光基團間的相互作用。在未切割狀態(tài)下,供體的熒光被受體淬滅,而一旦DNA探針被Benzonase切割,供體熒光基團與受體分離,熒光信號增強,從而實現(xiàn)高靈敏度的檢測。3.**優(yōu)化的底物探針**:試劑盒中的Benzonase底物是一種合成的DNA寡核苷酸探針,其一端具有VIC熒光基團,另一端具有BHQ1淬滅基團。這種設計使得在底物被切割后,VIC熒光不再被BHQ1淬滅,從而可以非常靈敏地檢測到Benzonase核酸酶活性。4.**高靈敏度的檢測范圍**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這遠低于常規(guī)同類產(chǎn)品的檢測限。
Lambda核酸外切酶的活性表現(xiàn)在其高度特異性和過程性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。以下是一些關鍵點,描述了Lambda核酸外切酶的活性特征:1.**高度過程性(HighlyProcessive)**:Lambda核酸外切酶是一種高度過程性的5'→3'外切酶,這意味著它能夠連續(xù)消化多個核苷酸,而不需要在每一步之后重新結合底物。2.**底物特異性(SubstrateSpecificity)**:該酶選擇性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA鏈,對單鏈DNA和非磷酸化DNA表現(xiàn)出低活性。3.**活性定義(ActivityDefinition)**:一個活性單位定義為在37°C下,30分鐘內(nèi)在50μl反應體積中,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer和1μg聲波破碎的雙鏈[3H]-DNA底物,產(chǎn)生10nmol酸溶性脫氧核苷酸所需的酶量。4.**反應條件(ReactionConditions)**:通常在37°C下進行孵育,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer,該緩沖液包含67mMGlycine-KOH,2.5mMMgCl2,50μg/mlBSA,pH值為9.4。5.**熱失活(HeatInactivation)**:通過在75°C下加熱10分鐘可以使Lambda核酸外切酶失活。6.**特定活性(SpecificActivity)**:Lambda核酸外切酶的特定活性為50,000單位/毫克蛋白。
合成互補DNA(cDNA)的試劑盒是一種實驗室工具,用于從RNA模板通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成DNA。逆轉(zhuǎn)錄是一種酶促反應,其中RNA模板被逆轉(zhuǎn)錄酶(一種特殊的DNA聚合酶)讀取,并根據(jù)RNA序列合成一條互補的DNA鏈。這個過程在分子生物學研究中非常重要,因為它允許科學家從RNA樣品中獲取遺傳信息,并進行進一步的分析和應用。cDNA合成試劑盒通常包含以下關鍵組分:1.**逆轉(zhuǎn)錄酶**:一種特殊的酶,能夠以RNA為模板合成DNA鏈。例如,M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶是一種常用的逆轉(zhuǎn)錄酶。2.**RNase抑制劑**:一種蛋白質(zhì),可以防止RNA樣品在實驗過程中被環(huán)境中的RNase酶降解。3.**緩沖液**:提供適宜的化學環(huán)境,保證逆轉(zhuǎn)錄酶的活性和反應的順利進行。4.**dNTPs**:四種去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP和dTTP),是合成DNA鏈的原料。5.**引物**:短的單鏈DNA或RNA基礎片段,用于啟動cDNA的合成。常見的引物類型包括oligo(dT)引物(針對mRNA的poly(A)尾)、隨機引物或特異性引物。6.**水**:通常是無核酸酶的水,以避免樣品被污染。將MAGE-A3基因序列克隆到一個表達載體中,該載體通常包含有抗生物質(zhì)抗性基因、啟動子、核糖體結合位點。Recombinant Human CD98 Protein,hFc Tag
使用體外轉(zhuǎn)錄技術合成gRNA,確保gRNA的質(zhì)量和純度,這對后續(xù)實驗的成功至關重要 。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的高重復性和準確性主要得益于以下幾個方面:1.**基于熒光探針的檢測方案**:該試劑盒使用熒光標記的DNA探針,當探針被Benzonase核酸酶切割時,會產(chǎn)生熒光信號,這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量。此方法成功避免了ELISA檢測方法的一些限制,例如抗體的親和性能差異、非特異性反應以及蛋白濃度差異的問題。2.**高靈敏度**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這為準確檢測提供了技術保障。3.**操作簡便快速**:檢測過程簡單,只需加入BenzDetectionSolution和待檢樣品,在定量PCR儀上15分鐘內(nèi)即可完成檢測,減少了操作過程中可能出現(xiàn)的人為誤差。4.**標準曲線的建立**:試劑盒中提供了不同濃度的標準品,通過這些標準品可以建立標準曲線,從而準確計算出樣品中的Benzonase殘留量。5.**環(huán)境控制**:建議在超凈工作臺或生物安全柜等潔凈環(huán)境中進行檢測,以避免樣品受環(huán)境核酸酶的影響,保證檢測結果的準確性。Recombinant Human HMGB1(His Tag)