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表達(dá)與純化:重組抑肽酶在大腸桿菌中得到了高效表達(dá),并通過純化過程獲得了純度達(dá)到95%以上的產(chǎn)品?;钚则炞C:重組抑肽酶展現(xiàn)出與天然抑肽酶相似的酶學(xué)性質(zhì),能夠有效抑制胰蛋白酶的活性。穩(wěn)定性測試:重組抑肽酶在推薦的儲存條件下(-20oC至2-8oC)具有長達(dá)24個月的穩(wěn)定性。討論生產(chǎn)優(yōu)勢:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有成本低、表達(dá)速度快、易于擴大生產(chǎn)等優(yōu)點。此外,重組抑肽酶無動物源性,減少了病毒污染的風(fēng)險,提高了產(chǎn)品的安全性??蒲袘?yīng)用:重組抑肽酶可廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域,如蛋白純化、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實驗等,提供了一種穩(wěn)定且可靠的實驗工具。工業(yè)生產(chǎn):在工業(yè)生產(chǎn)中,重組抑肽酶可用于重組蛋白藥物的生產(chǎn)過程中,防止蛋白酶降解,提高產(chǎn)品純度和產(chǎn)量。結(jié)論大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶具有高純度、高活性和良好的穩(wěn)定性,是一種理想的科研和工業(yè)用蛋白酶抑制劑。其無動物源性和高生產(chǎn)效率的特點,為生物技術(shù)領(lǐng)域提供了一種安全、經(jīng)濟的替代品。跨膜蛋白的多功能性使它們成為理想的藥物作用靶點,例如四次跨膜蛋白CD20、Claudin18.2。Colivelin
牛凝血酶(Bovine Thrombin),作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。引言凝血酶是血液凝固過程中的關(guān)鍵酶,負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,從而促進(jìn)血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高純度,在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來源與純化:牛凝血酶從牛血漿中提取,并通過一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化?;钚詼y定:利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)底物測定凝血酶活性。應(yīng)用研究:通過體外實驗和體內(nèi)模型,研究牛凝血酶在血液學(xué)、分子生物學(xué)和藥物開發(fā)中的應(yīng)用。結(jié)果分子特性:牛凝血酶由兩條肽鏈組成,分子量約為37 KD,具有高度的專一性和高效的催化能力。生物學(xué)作用:牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽,形成纖維蛋白單體,參與血液凝固和傷口愈合??蒲袘?yīng)用:牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開發(fā)、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗工具等方面展現(xiàn)出重要價值。Recombinant Cynomolgus BSPII Protein,His Tag全長A2aR蛋白可應(yīng)用于免疫、ELISA、SPR(表面等離子共振)、BLI(生物層干涉)和細(xì)胞實驗等場景。
重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,具有很強的位點特異性,嚴(yán)格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃時可達(dá)活性,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃范圍內(nèi)皆有活性(見表1),使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽,通過Ni-NTA樹脂去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。產(chǎn)品性質(zhì)來源(Source)大腸桿菌外觀(Appearance)無色透明液體比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定義(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。純化(Purification)Ni柱親和純化純度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)產(chǎn)品組分運輸與保存方法冰袋運輸。
RecombinantBiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProtein,hFc-AviTag分子別名(Synonyms)Mesothelin;CAK1;MSLN;MPFSMRP表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProteinisexpressedfromHEK293withhFctagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGlu296-Gly580.[Accession|Q13421-2]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto70-80kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedAnti-MSLNAntibody,hFcTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanMSLN,hFcTagwiththeEC50of18.4ng/mldeterminedbyELISA.在生物制藥工業(yè)中,腸激酶用于生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物,通過專一性切割去除不需要的序列,提高藥物純度和活性。
RecombinantBiotinylatedCynomolgusSiglec-10Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)SLG2;SIGLEC10;MGC126774;PRO940表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedCynomolgusSiglec-10ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminus.ItcontainsThr17-Asn552.[Accession|A0A2K5WBX8]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.71kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-82kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutionin25mMMES,150mMNaCl,0.5MArginine(pH5.0).儲存條件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.2aR蛋白在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮著不同的作用,例如在信號傳遞、物質(zhì)轉(zhuǎn)運和細(xì)胞通訊等方面。Recombinant Canine ROR1 Protein,His Tag
人α-凝血酶,一種絲氨酸蛋白酶,是凝血級聯(lián)反應(yīng)中的中心酶,對止血和其他多種生理過程至關(guān)重要。Colivelin
Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.產(chǎn)品性質(zhì)別名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制劑Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.Colivelin