超微量分光光度計(jì)注意事項(xiàng):
1、Micro Drop超微量分光光度計(jì)應(yīng)放在干燥的房間內(nèi),使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng),防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
2、使用Micro Drop超微量分光光度計(jì)前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,甲醛檢測(cè)儀以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查,電源接線應(yīng)牢固,通電也要良好,各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再按通電源開關(guān)。
超微量分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。貴州國(guó)產(chǎn)超微量分光光度計(jì)蛋白檢測(cè)
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強(qiáng)度;
I 為透射的單色光強(qiáng)度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長(zhǎng);
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過(guò)處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。
貴州高重復(fù)性超微量分光光度計(jì)熒光分光光度計(jì)的光源和檢測(cè)器是成直角分布的,而紫外可見分光光度計(jì)是成一條直線的。
光譜儀和分光光度計(jì)有什么區(qū)別?
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個(gè)或某段光譜線強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行定量分析的儀器叫做分光光度計(jì)。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因?yàn)橹袊?guó)上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行了國(guó)產(chǎn)化,當(dāng)時(shí)的技術(shù)難點(diǎn)也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計(jì)直接稱作分光光度計(jì),所以分光光度計(jì)也特指紫外可見分光光度計(jì)。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實(shí)也是要有分光組件的,現(xiàn)在都是用光譜儀這個(gè)名詞來(lái)統(tǒng)稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計(jì)范圍要大一些,新一些。而分光光度計(jì)更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計(jì)因?yàn)樗鼈冊(cè)谝话阈缘姆治龉ぷ髦幸仓饕怯脕?lái)定量的,這就造成了“分光光度計(jì)”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
Micro Drop微陣列檢測(cè)功能:
通過(guò)這個(gè)功能可以篩選有效的熒光標(biāo)記雜交探針用于芯片試驗(yàn),這樣避免潛在的不好的探針,可以提高試驗(yàn)效率。Micro Drop可以檢測(cè)熒光染料的吸收光強(qiáng)度,比較低可以檢測(cè)0.2pmol/μl的熒光染料。軟件可以自動(dòng)應(yīng)用相應(yīng)的波長(zhǎng)檢測(cè)樣品的吸光值。
1. 在功能鍵中選擇微陣列。
2. 輸入樣品編號(hào)。
3. 選擇檢測(cè)樣品的類型,默認(rèn)的設(shè)定為DNA,消光因子為50。
4. 選擇濃度單位,默認(rèn)的單位是μg/ml.
5. 使用染料1或者染料2后面的下拉框來(lái)選擇染料,默認(rèn)的染料設(shè)定:染料1(Cy3),染料2(Cy5),如
果*標(biāo)記了一個(gè)染料,在染料2類型上選擇無(wú)。
6. 可以選擇分析校正,默認(rèn)的校準(zhǔn)波長(zhǎng)為340nm,也可以重新輸入一個(gè)校準(zhǔn)波長(zhǎng)。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個(gè)檢測(cè)樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
8. 用干凈的無(wú)塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對(duì)照,空白對(duì)照液體能夠溶解目標(biāo)溶液。空
白對(duì)照液體的pH值和離子濃度應(yīng)和檢測(cè)樣品一樣。
消光系數(shù)是被測(cè)溶液對(duì)光的吸收大小值。
Micro Drop基座檢測(cè)需要的樣本量:
雖然基座檢測(cè)時(shí)樣本的量不是特別關(guān)鍵,但是必須保證兩根光纖之間形成完整的液柱,這樣才能保證兩根光纖之間形成樣本液橋。
決定液滴表面張力的主要因素是溶液中水分子的氫鍵結(jié)合力。通常情況下,溶液中所有的溶質(zhì)(包括:蛋白,DNA,RNA,鹽離子,去垢劑分子)都會(huì)降低表面張力,因?yàn)檫@些分子能夠和水分子的氫鍵產(chǎn)生作用。雖然一般情況下1μl的樣本就足可以檢測(cè)了,但對(duì)于那些表面張力比較小的樣本比較好使用2μl樣本來(lái)檢測(cè)。
現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)表明下列樣本的用量足夠得到準(zhǔn)確重復(fù)性高的檢測(cè)結(jié)果:
核酸水溶液:1μl;
純蛋白:2μl;
Bradford,BCA,Lowry或者蛋白Pierce 660nm試驗(yàn):2μl;
微生物細(xì)胞懸浮液:2μl。
MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自動(dòng)調(diào)整。貴州國(guó)產(chǎn)超微量分光光度計(jì)蛋白檢測(cè)
Lowry法的原理是蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。貴州國(guó)產(chǎn)超微量分光光度計(jì)蛋白檢測(cè)
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測(cè)功能:
Protein BCA檢測(cè)類型:
BCA是一種通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)非純蛋白的濃度的方法,它通常用于稀釋的蛋白濃度檢測(cè),以及那些在紫外區(qū)域含有吸收光雜質(zhì)的蛋白的濃度檢測(cè)。BCA法需要在蛋白定量前構(gòu)建一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。
BCA法是檢測(cè)Cu+1離子的方法,在堿性環(huán)境下,Cu+2離子會(huì)被蛋白還原為Cu+1離子。兩個(gè)聯(lián)喹啉二羧酸BCA分子和一個(gè)Cu+1離子會(huì)形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情況下,以750nm波長(zhǎng)的吸光值為基線,Cu-BCA形成的螯合物在562nm處有比較大吸光值。
常規(guī)檢測(cè)使用試劑/蛋白樣品的體積比為20:1,檢測(cè)濃度范圍為0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA)。當(dāng)使用基座檢測(cè)時(shí),推薦使用4μl樣品和80μlBCA試劑。
微量檢測(cè)使用試劑/樣品的體積比為1:1,可以檢測(cè)蛋白濃度范圍從0.01mg/ml至0.20mg/ml。要準(zhǔn)備足夠的樣品來(lái)做基座檢測(cè),建議使用10μl樣品和10μlBCA試劑(使用PCR管)。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說(shuō)明來(lái)準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。確保在所有檢測(cè)過(guò)程中,每個(gè)樣品的處理時(shí)間及環(huán)境溫度一致。
貴州國(guó)產(chǎn)超微量分光光度計(jì)蛋白檢測(cè)
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司是一家集研發(fā)、制造、銷售為一體的****,公司位于上海市松江區(qū)新橋鎮(zhèn)莘磚公路258號(hào)40幢201室-1,成立于2013-12-19。公司秉承著技術(shù)研發(fā)、客戶優(yōu)先的原則,為國(guó)內(nèi)移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)的產(chǎn)品發(fā)展添磚加瓦。公司主要經(jīng)營(yíng)移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)等產(chǎn)品,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,均通過(guò)醫(yī)藥健康行業(yè)檢測(cè),嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用與全國(guó)30多個(gè)省、市、自治區(qū)。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷緊跟移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)行業(yè)發(fā)展趨勢(shì),研發(fā)與改進(jìn)新的產(chǎn)品,從而保證公司在新技術(shù)研發(fā)方面不斷提升,確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和要求。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司以市場(chǎng)為導(dǎo)向,以創(chuàng)新為動(dòng)力。不斷提升管理水平及移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)產(chǎn)品質(zhì)量。本公司以良好的商品品質(zhì)、誠(chéng)信的經(jīng)營(yíng)理念期待您的到來(lái)!