松江區(qū)常見臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證

    對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用，℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在，℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌，某些對(duì)糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時(shí)，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑，避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變（一般使pH降低），可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求，在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在配制培養(yǎng)基過程中，泡沫的存在對(duì)滅菌處理極不利，因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋?，使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生，或適當(dāng)提高滅菌溫度。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求。松江區(qū)常見臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證

    轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10g，磷酸氫二鉀，碳酸鈣3g，硫酸鎂，酵母粉，水1000ml，1%結(jié)晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養(yǎng)基淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基（高氏一號(hào)培養(yǎng)基）可溶性淀粉，硝酸鉀，磷酸氫二鉀，氯化鈉，硫酸鎂，硫酸亞鐵，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調(diào)成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號(hào)，加熱到煮沸時(shí)加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到，分裝后滅菌，備用。面粉瓊脂培養(yǎng)基面粉60g，瓊脂20g，水1000ml把面粉用水調(diào)成糊狀，加水到500ml，放在文火上煮30分鐘。另取500ml水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調(diào)勻，補(bǔ)充水分，調(diào)整pH值到，分裝，滅菌，備用。微藻培養(yǎng)基BG-11培養(yǎng)基NaNO3，K2HPO4·，MgSO4·，CaCl2·CitricAcid（檸檬酸），F(xiàn)erricammoniumcitrate（檸檬酸鐵銨，EDTA(dinatrium-salt)，Na2CO3，A5+Cosolution*（A5溶液1000×）1mlDistilledWater。金山區(qū)特色臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基認(rèn)真負(fù)責(zé)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對(duì)象，二是取材過程。

    兼性厭氧微生物在F值為+，在+。F值與氧分壓和pH有關(guān)，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對(duì)穩(wěn)定的條件下，可通過增加通氣量（如振蕩培養(yǎng)、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑，從而增加F值；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。例如，在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對(duì)所用器材及工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。對(duì)培養(yǎng)基而言，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。

    培養(yǎng)基制備基本方法編輯語音培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì)，再依據(jù)自己的使用目的加以選用，記錄其來源。培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號(hào)。**終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，**好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化，也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

    其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基葡萄糖5%，尿素，硫化銨，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉，七水合硫酸鎂，七水合硫酸鐵，酵母膏，孟加拉紅，Ashby無氮培養(yǎng)基富集好氧自生固氮菌甘露醇1%，磷酸二氫鉀，七水合硫酸鎂，氯化鈉，二水合硫酸鈣，碳酸鈣培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基編輯語音EMB培養(yǎng)基常用于鑒別蛋白胨10g，乳糖5g，蔗糖5g，磷酸氫二鉀2g，伊紅，美藍(lán)，蒸餾水1000g，2216E培養(yǎng)基配方分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方蛋白胨5g，酵母膏1g，磷酸高鐵，瓊脂15-20g，陳海水1000ml，煮沸氫氧化鈉（5%）的溶液調(diào)pH值伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可用于檢測(cè)水中大腸桿菌的含量首先按以下組成配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基。蛋白胨10g，NaCl5g瓊脂15-20g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL，調(diào)節(jié)pH為。滅菌后，冷卻至60℃左右，再按下面的比例，在無菌操作條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液以及美藍(lán)水溶液。搖勻后，立即倒平板。溶液中的乳糖在高溫下會(huì)破壞，因此一般使用壓力為70kPa、溫度為115℃的條件滅菌20分鐘?；A(chǔ)培養(yǎng)基100mL，20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL，培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基編輯語音天然培養(yǎng)基是指來自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基。1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。普陀區(qū)專注臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基售后服務(wù)

取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。松江區(qū)常見臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證

    應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，**后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會(huì)有***的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項(xiàng)編輯語音培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細(xì)菌、***及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果。松江區(qū)常見臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證

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