江蘇鵝原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基

原代肝細(xì)胞是藥物早期研究的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞模型。藥物通過肝臟代謝后，大多數(shù)藥物的毒性被消除，但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì)，因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型，尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí)，原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用。 原代肝細(xì)胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對(duì)于乙肝病毒的研究需要對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)；一些嚴(yán)重肝臟疾病的細(xì)胞移植研究也要涉及到對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增。因此，原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。立沃生物原代肝細(xì)胞有著嚴(yán)格的體外培養(yǎng)規(guī)范和質(zhì)量監(jiān)測(cè)機(jī)制，努力讓客戶收到的每一管細(xì)胞都放心的。江蘇鵝原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基

不同物種的原代肝細(xì)胞在貼壁時(shí)間上存在差異。以小鼠為例，其原代肝細(xì)胞可能在培養(yǎng)基中需1個(gè)小時(shí)開始貼壁，而其他物種則需要4-6小時(shí)左右。這是由于不同物種的細(xì)胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，貼壁時(shí)間是一個(gè)重要的指標(biāo)。一般來說，原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)基中貼壁后，細(xì)胞的代謝活性和功能會(huì)得到提高，因此貼壁時(shí)間越短，細(xì)胞的生物學(xué)活性就越高。但是，如果貼壁時(shí)間過短，細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)脫落或死亡等情況，因此需要根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整。 另外，原代肝細(xì)胞的貼壁能力也與細(xì)胞的新鮮程度有關(guān)。新鮮分離的原代肝細(xì)胞一般需要4-6小時(shí)才能貼壁，而經(jīng)過冷凍保存的細(xì)胞則需要更長(zhǎng)的時(shí)間。因此，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要根據(jù)細(xì)胞的新鮮程度和貼壁時(shí)間進(jìn)行合理的調(diào)整。 需要注意的是，幾乎所有物種的原代肝細(xì)胞都可以貼壁，但不同物種的細(xì)胞在培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基配方等方面存在差異。因此，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要根據(jù)具體物種和實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行合理的選擇和調(diào)整，以確保細(xì)胞的生物學(xué)活性和代謝功能得到有效的發(fā)揮。江蘇鵝原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基貼壁原代肝細(xì)胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。

原代肝細(xì)胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外，也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來源的供體數(shù)，分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究：①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究；②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用；③研究藥物的細(xì)胞毒性等。

原代肝細(xì)胞有三種常用的分離方法，每種方法都有對(duì)應(yīng)的原理。原代肝細(xì)胞是從動(dòng)物體內(nèi)分離出來的未經(jīng)過傳代的肝細(xì)胞，具有很高的生物學(xué)活性和生理功能，是研究肝臟生理和病理的重要材料。目前，分離原代肝細(xì)胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中，兩步膠原酶灌流法是一種比較常用的方法，因?yàn)樗鼘?duì)肝細(xì)胞的損傷作用較小，可以提高肝細(xì)胞的產(chǎn)量和活力。 在兩步膠原酶灌流法中，首先需要使用螯合劑來螯合肝臟中的鐵離子，以避免膠原酶的活性受到抑制。然后，將肝臟灌注膠原酶，使其分解膠原纖維，從而釋放出肝細(xì)胞。這種方法可以分離出數(shù)量多且活力好的肝細(xì)胞，適用于各種動(dòng)物的肝臟，包括小鼠、大鼠、豬等。 直接剪切法是將肝臟切成小塊，將手術(shù)取得的肝組織切成小塊,直接置于簡(jiǎn)單培養(yǎng)液中即可。這種方法簡(jiǎn)單易行，但對(duì)肝細(xì)胞的損傷較大，產(chǎn)量和活力較低。 組織塊消化法是將肝臟切成小塊，然后用胰酶等消化酶消化，分離出肝細(xì)胞。這種方法產(chǎn)量較高，但對(duì)肝細(xì)胞的損傷也較大。 分離原代肝細(xì)胞是肝臟生理和病理研究的重要前提。不同的分離方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的方法。立沃生物的原代肝細(xì)胞是從肝組織上分離下來立即凍存的細(xì)胞，屬于P0代，擁有肝臟原先的酶水平和理化性質(zhì)。

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分可以讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中貼壁效果更好。例如膠原蛋白、基質(zhì)膠或人纖維鏈接蛋白，這些成分可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境，從而提升細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)能力。 膠原蛋白是一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)成分，它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中，加入膠原蛋白可以讓原代肝細(xì)胞更好地附著在培養(yǎng)皿上，從而促進(jìn)原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。 基質(zhì)膠是一種含有多種細(xì)胞外基質(zhì)成分的復(fù)合物，它可以提供更加復(fù)雜和多樣化的細(xì)胞外環(huán)境。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中，加入基質(zhì)膠可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的復(fù)雜環(huán)境，從而提高細(xì)胞的適應(yīng)性和生長(zhǎng)能力。此外，基質(zhì)膠還可以促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用和信號(hào)傳遞，從而增強(qiáng)原代肝細(xì)胞的功能和穩(wěn)定性。 人纖維鏈接蛋白是一種重組的細(xì)胞外基質(zhì)成分，它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。 加入細(xì)胞外基質(zhì)成分可以可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境，讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中更好地生長(zhǎng)和分化，從而提高細(xì)胞的狀態(tài)和穩(wěn)定性。原代肝細(xì)胞是一種重要的體外研究模型，可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。鵝原代肝細(xì)胞貼壁

原代肝細(xì)胞擁有肝臟的特性和功能，可用于研究肝臟疾病的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞增殖，是有效的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀＝K鵝原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基

   在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，是否需要添加血清？在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加血清。血清是一種含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的液體，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。血清中含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，可以為細(xì)胞提供能量和營養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。此外，血清中還含有多種生長(zhǎng)因子，如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等，可以促進(jìn)肝細(xì)胞的分化和增殖。然而，血清中也含有一些雜質(zhì)和微生物，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能產(chǎn)生不利影響。因此，在使用血清時(shí)，需要選擇高質(zhì)量的血清，并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè)，以確保血清的質(zhì)量和安全性。此外，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，也可以使用無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基中不含有或含有較少的血清成分，可以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響，提高細(xì)胞的純度和穩(wěn)定性。但是，無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基的成本較高，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮徒?jīng)濟(jì)條件來選擇。總之，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加血清。在選擇血清時(shí)，需要選擇高質(zhì)量的血清，并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè)。此外，也可以選擇無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基，以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響。江蘇鵝原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基