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原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究的重要組成。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟直接分離的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞,具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。原代肝細(xì)胞與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量與輔助因子水平濃度與正常生理濃度貼合,滿足在接近生理狀態(tài)情況下研究藥物代謝和毒性的需求,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。同時(shí),利用原代肝細(xì)胞在體外進(jìn)行研究,無(wú)須擔(dān)心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理問(wèn)題,也減少了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開支。目前,原代肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究,包括探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;預(yù)測(cè)并解釋藥物—藥物間的相互作用;研究藥物的細(xì)胞毒性等。立沃生物同一批次的原代肝細(xì)胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復(fù)性,可以為客戶提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。珠海雞原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染,這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來(lái)自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來(lái)去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽(yáng)離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對(duì)細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡(jiǎn)單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測(cè)試劑盒來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測(cè)結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測(cè)試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來(lái)減少endotoxin的污染。例如,使用無(wú)菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過(guò)度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問(wèn)題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。江蘇羊原代肝細(xì)胞立沃生物原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)合作服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)合作、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目合作等。
在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),選擇合適的培養(yǎng)條件非常重要,以下是一些選擇培養(yǎng)條件的建議:1.培養(yǎng)基:選擇適合肝細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,如William'sE培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基等。不同的培養(yǎng)基成分可能會(huì)影響肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。2.溫度和濕度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)溫度通常為37°C,濕度為95%左右。在培養(yǎng)過(guò)程中,需要保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度和濕度穩(wěn)定。3.氧氣含量:肝細(xì)胞需要充足的氧氣供應(yīng),因此需要選擇透氣性好的培養(yǎng)容器,并保持培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣含量充足。4.細(xì)胞密度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō),肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度不宜過(guò)高,以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。5.細(xì)胞因子:在培養(yǎng)過(guò)程中,可以添加一些細(xì)胞因子,如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等,以促進(jìn)肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。6.培養(yǎng)時(shí)間:肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō),肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能??傊?,選擇合適的培養(yǎng)條件需要考慮多方面的因素,包括培養(yǎng)基、溫度、濕度、氧氣含量、細(xì)胞密度、細(xì)胞因子和培養(yǎng)時(shí)間等。在選擇培養(yǎng)條件時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定,以確保肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。
原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問(wèn)題,而且還存在著種屬差異、生理反應(yīng)差異等問(wèn)題;而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活、細(xì)胞分化等問(wèn)題。因此,Organ-on-a-chip的出現(xiàn),填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等,為后續(xù)研究保駕護(hù)航。
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primary hepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;6.預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用;7.研究藥物的細(xì)胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)和研究的相關(guān)技術(shù)對(duì)于提升相關(guān)試驗(yàn)的成功率非常有幫助。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑,包括細(xì)胞復(fù)蘇、鋪板、維持培養(yǎng)基和培養(yǎng)酶等。珠海雞原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞不能傳代和長(zhǎng)期培養(yǎng),會(huì)丟失肝細(xì)胞分化特性與功能,通過(guò)誘導(dǎo)去分化做成肝祖細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)。珠海雞原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞是指從動(dòng)物或人體肝臟中分離出來(lái)的原始肝細(xì)胞,它們沒有經(jīng)過(guò)傳代培養(yǎng),保留了肝細(xì)胞的天然特性和功能。原代肝細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,例如:1.藥物代謝和毒性研究:原代肝細(xì)胞可以用于評(píng)估藥物的代謝和毒性,以及藥物對(duì)肝細(xì)胞的影響。2.肝臟疾病研究:原代肝細(xì)胞可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制、病理生理學(xué)和治療方法。3.生物制藥:原代肝細(xì)胞可以用于生產(chǎn)生物制藥,例如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子和肝細(xì)胞的再生因子等。原代肝細(xì)胞的分離和培養(yǎng)技術(shù)比較復(fù)雜,需要嚴(yán)格的操作和控制條件,以確保肝細(xì)胞的存活率和功能。珠海雞原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)