河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么

來源: 發(fā)布時間:2021-11-15

歐易生物高級技術(shù)支持陳老師首先給大家介紹了空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的發(fā)展歷程、測序流程及原理。緊接著,歐易生物技術(shù)支持姚老師針對目前空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)表的一系列高分文章進(jìn)行了方案設(shè)計的解析。姜老師給大家詳細(xì)介紹了空間轉(zhuǎn)錄組項目樣本準(zhǔn)備、切片、貼片等實驗過程及注意事項,并帶領(lǐng)大家到實驗室實地觀摩了整個實驗過程,并就其中細(xì)節(jié)進(jìn)行了講解。董老師針對空間轉(zhuǎn)錄組10x Space Ranger的分析原理及結(jié)果進(jìn)行了詳細(xì)解析,并介紹了使用Seurat包進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘的標(biāo)準(zhǔn)分析流程。scRNA-seq 技術(shù)的進(jìn)步啟發(fā)了利用高分辨率轉(zhuǎn)錄組定量分析與空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)的互補性質(zhì)的新方法。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么

空間轉(zhuǎn)錄組的應(yīng)用有哪些?一、構(gòu)建空間轉(zhuǎn)錄組圖譜:借助于空間分辨的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué),建立圖譜可能是在分子水平上研究生物體結(jié)構(gòu)的重要步驟。目前的多項研究通過單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組技術(shù)結(jié)合空間轉(zhuǎn)錄技術(shù),得到多個***的時空轉(zhuǎn)錄組圖譜(相關(guān)研究后續(xù)會在如下專輯更新)。二、描繪胚胎發(fā)育和空間藍(lán)圖:胚胎發(fā)育是一個復(fù)雜的過程,其中動態(tài)變化在生物分子水平上迅速發(fā)生。對這種微觀變化的時間和空間方面的分析都具有挑戰(zhàn)性。預(yù)期使用空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)可以表征胚胎發(fā)育的空間表達(dá)藍(lán)圖。山東空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用空間轉(zhuǎn)錄組組織學(xué)板塊包括樣品的包埋、切片、固定、染色及成像,記錄切片的形態(tài)學(xué)信息。

10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)的準(zhǔn)確性高嗎?下圖是一個將10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)應(yīng)用于小鼠海馬體研究的案例。A圖為腦組織切片的HE染色結(jié)果,從10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果中,可以清晰看到Tmsb4x(B圖)和Selenow(C圖)在海馬體區(qū)域高表達(dá),和已知的研究結(jié)果一致性較高。開展10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組需要做哪些準(zhǔn)備?空間轉(zhuǎn)錄組是一項十分前沿的技術(shù),涉及到很多細(xì)節(jié)方面的準(zhǔn)備工作,例如組織類型的選擇、前期預(yù)實驗的設(shè)計、病理區(qū)域的確認(rèn)等一系列內(nèi)容。而且實驗中存在很多不確定性因素,處理不慎容易導(dǎo)致整個項目失敗。

轉(zhuǎn)錄本的空間位置信息可以通過在原位陣列上捕獲的組織切片中的轉(zhuǎn)錄本來獲取,目前已有多種技術(shù)策略被開發(fā)報道, 如空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)(Spatial Transcriptomics,ST)和 Visium 技術(shù),通過將包含空間位置信息的條形碼、UMI 標(biāo)簽、poly-dT 的探針固定在商用微陣列載玻片上,來捕獲包含 poly(A) 尾巴的轉(zhuǎn)錄本,并獲取全轉(zhuǎn)錄組水平的基因表達(dá)及位置信息。一些無需成像即可計算重建空間基因表達(dá)模式所需信息的技術(shù)也被開發(fā)了出來,其中之一就是是 DNA 顯微技術(shù),它記錄 cDNA 之間的接近度,該信息可用于重建轉(zhuǎn)錄本之間的相對位置。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。

空間基因表達(dá)技術(shù)能夠在保留空間背景信息的同時,多方位測量轉(zhuǎn)錄組譜。然而,現(xiàn)有的分析方法并沒有解決技術(shù)分辨率有限或有效利用空間信息的問題。來自美國的科研團(tuán)隊開發(fā)了BayesSpace,這是一種完全貝葉斯統(tǒng)計方法,它使用來自空間鄰域的信息來增強(qiáng)空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的分辨率并進(jìn)行聚類分析。BayeSpace通過使用的Bioconductor SingleCellExperiment數(shù)據(jù)結(jié)構(gòu)將預(yù)處理數(shù)據(jù)作為輸入,無縫集成到空間轉(zhuǎn)錄組分析工作流中,輸出同樣存儲在SingleCellExperiment對象中,該對象可用于下游分析。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破??臻g轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)主要包括 MERFISH 和 seqFISH。河南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量

研究的***主要集中于人類和小鼠的大腦,而其他***(例如肝臟)的空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究相對滯后。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么

1. 空間轉(zhuǎn)錄組實驗步驟A。切片制備和優(yōu)化:取新鮮組織、冷凍、切片,并進(jìn)行HE染色成像,優(yōu)化確定切片是否覆蓋靶向區(qū)域??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟B。切片固定和透化:將組織切片放置在含有與RNA結(jié)合捕獲探針的載玻片上,并進(jìn)行固定和透化,使細(xì)胞中的 mRNA 得到釋放,并結(jié)合到相應(yīng)的捕獲探針上,從而獲取基因表達(dá)信息??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟c。逆轉(zhuǎn)和文庫構(gòu)建:以捕獲的 RNA 為模板,進(jìn)行 cDNA 合成,和測序文庫制備??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟d。高通量上機(jī)測序:對制備好的測序文庫,進(jìn)行二代高通量短讀長測序??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟e。數(shù)據(jù)可視化分析:結(jié)合HE結(jié)果,確定哪些基因有表達(dá),表達(dá)量高低,以及這些基因的空間位置信息。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么

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