早期空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的另一條發(fā)展路線是基因捕獲和增強子捕獲篩選,開發(fā)于二十世紀八十年代,當(dāng)時 DNA 測序通量正在增加,動物基因組是新開放的前沿領(lǐng)域。果蠅和小鼠的篩選是在八十年代后期進行的,目的是觀察未靶向且通常未知的基因表達情況。隨著通量的增加,增強子和基因捕獲技術(shù)在九十年代成為空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的技術(shù),直到 WMISH 在九十年代后期興起。WMISH 技術(shù)的自動化程度較高,避免了對轉(zhuǎn)基因品系的依賴,同時由于在二十一世紀初獲得物種的參考基因組信息變得越來越便利,探針設(shè)計因此也更為方便。作者借助空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)探究人類心臟在發(fā)育過程中的基因表達特征和細胞圖譜變化。天津空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
空間轉(zhuǎn)錄組(Spatial Transcriptomics)就是將基因的表達情況與關(guān)注的組織切片的免疫化學(xué)染色圖像進行整合,從而將組織內(nèi)不同細胞的基因表達信息定位到組織的原始空間位置上去,進而直接觀測組織中不同部位功能區(qū)基因表達的差異??臻g轉(zhuǎn)錄組技術(shù)利用了常規(guī)的原位技術(shù)和組學(xué)技術(shù)兩方面的優(yōu)勢。目前已發(fā)表的關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)有主要有 Spatial Transcriptomics, Slide-seq, LCM-seq, seqFISH, MERFISH, Liver single cell zonation, Geo-seq 和 Tomo-seq, 涉及物種有人、小鼠、果蠅、秀麗隱桿線蟲、斑馬魚、擬南芥、楊樹和云杉等。吉林品質(zhì)空間轉(zhuǎn)錄組空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)和 10X Visium 依靠這種微陣列技術(shù),區(qū)別在于微陣列載玻片上的組織上的轉(zhuǎn)錄本信息。
空間轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術(shù),與bulk RNA-seq或單細胞轉(zhuǎn)錄組測序相比,空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失,使得我們在檢測基因表達的同時獲得基因在組織內(nèi)部的空間位置信息。已發(fā)表的關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)有Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。這些方法或是在細胞數(shù)量上限制較大,或是存在有效測序深度不足等問題。正是由于空間轉(zhuǎn)錄組可以從多維度解析生物學(xué)過程的特點,近年來關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組無論是在技術(shù)開發(fā),還是大規(guī)模應(yīng)用或商業(yè)化,都得到蓬勃發(fā)展。
10xVisium空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)原理為將新鮮冷凍的組織切片,置于文庫制備載玻片上,經(jīng)過固定、染色和透化后,釋放出mRNA,mRNA與空間條形碼捕獲探針相結(jié)合,從而捕獲基因表達信息。然后將捕獲的mRNA合成cDNA并制備測序文庫進行測序,并對數(shù)據(jù)進行可視化分析??臻g轉(zhuǎn)錄組技術(shù)作為當(dāng)今**前沿的科研技術(shù),相信很多老師都希望將其運用于自己的課題中,快速發(fā)表高分文章。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。有很多其他類型的分析可用于空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù),包括基因模式的識別,空間區(qū)域的轉(zhuǎn)錄組定義等。
1. 10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組用于文庫構(gòu)建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm,包含5000個被條形碼標記的點(barcoded spots),每個點的直徑為55 μm,點和點之間中心的距離為100 μm,并且每個點都有一個barcode序列。10X Visium空間轉(zhuǎn)錄組的實驗主要分為兩部分:組織學(xué)板塊和組學(xué)板塊。組織學(xué)板塊包括樣品的包埋、切片、固定、染色及成像,記錄切片的形態(tài)學(xué)信息;組學(xué)板塊包括cDNA的合成、擴增、接頭連接和測序,記錄切片的轉(zhuǎn)錄本信息和空間位置信息 ??臻g轉(zhuǎn)錄組相關(guān)的顯微解剖技術(shù)通常分為兩類:機械和光學(xué)。四川空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域
許多當(dāng)前時代空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)的基礎(chǔ)都是在自七十年代以來的幾十年間建立的。天津空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
當(dāng)前的技術(shù)主要有四種策略:1、基于組學(xué)實驗結(jié)合空間重建的計算策略。這種計算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中重構(gòu)細胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局。2、激光切割與NGS測序結(jié)合的策略?;贚CM的轉(zhuǎn)錄組學(xué)或基因組學(xué)成功地獲得了單個細胞的空間轉(zhuǎn)錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復(fù)用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構(gòu)成***的巨大背景中,可能具有一定價值。3、基于熒光物質(zhì)原位的轉(zhuǎn)錄組學(xué)。基于圖像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué)在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉(zhuǎn)錄本積累等復(fù)雜背景中提取單個細胞。4、基于寡核苷酸的空間條碼加上NGS測序。費用較高且無法在單個細胞中獲得轉(zhuǎn)錄組。天津空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司位于聯(lián)航路1188號25幢,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團隊。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進取為宗旨,以建歐易生物產(chǎn)品為目標,努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不僅*提供專業(yè)的檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準文件或許可證件為準)一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。,同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢。