小歐從2018年即開始關注酵母雜交與高通量測序相結合的技術發(fā)展，如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術，實現(xiàn)了文庫篩文庫可能，該技術通過對酵母雙雜常用載體的改造，并結合高通量測序，可直接獲得AD-BD互作蛋白對。所用方法相當巧妙，感興趣的同學請點擊《當酵母雙雜交遇到高通量測序》。鈕老師團隊之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標記基因，在油松從營養(yǎng)生長到生殖生長的時相轉變過程中起重要作用。為了進一步理解年齡效應如何驅動針葉樹的發(fā)育，闡明與DAL1相關的蛋白互作網(wǎng)絡很關鍵。鈕老師團隊利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術結合NGS測序技術，優(yōu)化得到了Y2H-seq技術，與傳統(tǒng)的篩選測序相比，大幅度節(jié)省了時間和實驗成本。2酵母展示質量技術酵母展示技術,共收錄30多個行業(yè),涵蓋多行業(yè)資料一鍵下載。上海發(fā)展酵母文庫報價
酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉錄因子中，***GL1促進HIV-2轉錄。***GL1在免疫細胞中***表達，并與HIV的其他轉錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細胞中，***GL1過表達后，與LTR連接的螢火素酶表達上升近2倍，說明***GL1是一個轉錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內容中，對應用其他技術（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對HIV轉錄調控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復制和潛伏期提供了見解，但并沒有直接評估轉錄因子的結合和功能。文章中也對酵母單雜交技術與其他互作組技術（如Chip-seq、motif預測）進行了比較分析，發(fā)現(xiàn)eY1H技術對已識別因子的驗證率為30-60%，同等或優(yōu)于其他技術。山西實力酵母文庫專業(yè)化的篩庫流程，多重質檢保證質量。初篩+復篩提高目標陽性克隆質粒精確度。
通過酵母雙雜交進行篩選，結果顯示 SWC6 可以在藍光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣，酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍光下與 SWC6 相互作用（圖 D）。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 E-L）證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結合是藍光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復合物亞基，負責催化 H2A.Z 在染色質上的替換。已報道 SWR1 復合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 A-H）顯示，CRY1、CRY2 可以藍光依賴性與 ARP6 結合。
利用酵母文庫進行雙雜交篩選，結果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明，兩者的結合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結構域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結合（圖 C-D）。細胞外降解實驗顯示，與對照相比，MdRGL3a 與過表達 MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育，會導致 MdRGL3a 的降解加快；而與抑制 MdBT2 表達的愈傷組織的總蛋白共同孵育，會導致 MdRGL3a 的降解減緩（圖 A）。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（圖 B）。改變 MdRGL3a 表達量并不影響 MdBT2 的降解。以上結果表明，MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。進口試劑高服務質量市場份額大酵母文庫。
酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明，MdTRB1可以正向調節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進而負向調控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調節(jié)提供了新見解。Gateway方法酵母雙雜交文庫構建核系統(tǒng)與膜系。江西建庫酵母文庫報價
歐易生物一直助力于各酵母文庫實驗室更好的使用該項技術，探索生命科學奧秘。上海發(fā)展酵母文庫報價
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機制研究，近日，中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學王翔副教授為共同通訊作者，在 Journal of Experimental Botany 雜志（IF： 6.992）在線發(fā)表了題為“小麥短根長度 1文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個新的 ERF 轉錄因子基因 TaSRL1 （SHORT ROOT LENGTH 1），該基因主要在根中表達。綜上，本研究證明了 TaSRL1 在生長素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調控因子，并通過與 TaTIFY9 相互作用，整合生長素和 JA 信號，抑制根的生長。TaSRL1-4A 標記對小麥根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要意義。上海發(fā)展酵母文庫報價
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