小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展，如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù)，實現(xiàn)了文庫篩文庫可能，該技術(shù)通過對酵母雙雜常用載體的改造，并結(jié)合高通量測序，可直接獲得AD-BD互作蛋白對。所用方法相當(dāng)巧妙，感興趣的同學(xué)請點擊《當(dāng)酵母雙雜交遇到高通量測序》。鈕老師團(tuán)隊之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標(biāo)記基因，在油松從營養(yǎng)生長到生殖生長的時相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進(jìn)一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動針葉樹的發(fā)育，闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團(tuán)隊利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測序技術(shù)，優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù)，與傳統(tǒng)的篩選測序相比，大幅度節(jié)省了時間和實驗成本。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求。北京篩庫酵母文庫報價
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示，MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1，花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1，結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補(bǔ)成像實驗結(jié)果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱（圖 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制，本研究建立了一個新的模型：MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作，增強(qiáng)了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性，進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下，MdJAZ1 與 MdTRB1 互作，干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合；在 JA 存在的條件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。重慶運用酵母文庫做什么根據(jù)每個客戶的研究目標(biāo)和內(nèi)容靈活定制研究方案。既能提供建庫服務(wù)，也能提供篩庫服務(wù)。
歐易酵母文庫助力蘋果花青素合成調(diào)控機(jī)制研究。近日，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金、由春香教授為共同通訊作者，在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊發(fā)表了題為“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究論文，報道了茉莉酸通過介導(dǎo)JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物誘導(dǎo)蘋果中花青素和原花青素的生物合成。山東農(nóng)業(yè)大學(xué)安建平博士為***作者，文章中酵母文庫實驗由歐易生物協(xié)助完成。
文庫篩選做的好，培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴，你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題，或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對？歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品，經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良，質(zhì)量保證，物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH，使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中，然后121℃高壓滅菌15min，固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用，液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實驗、不停的花費時間驗證而頭禿了。篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗。
進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實驗，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對照相比，MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。酵母雙雜實驗過程中如何選擇核體系或者膜體系? 。陜西酵母文庫領(lǐng)域
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本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，進(jìn)而抑制菌根共生。過表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。北京篩庫酵母文庫報價
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