通過酵母雙雜篩選實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步研究AaWRKY9蛋白功能，結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白，并通過Y2H、BiFC、CoIP等進(jìn)行了驗(yàn)證確認(rèn)。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負(fù)向調(diào)控因子，在毛狀體和老葉中高表達(dá)，在芽尖和嫩葉中表達(dá)量低。為確認(rèn)AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進(jìn)青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能，通過雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)AaWRKY9與AaJAZ9共表達(dá)時(shí)，其轉(zhuǎn)錄活性被抑制，而使用MeJA處理后，這種抑制作用被抵消，且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)，反向驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。說明JA可以通過降解JAZ9，提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性，促進(jìn)青蒿素生物合成。酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白，蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù)。浙江歐易生物酵母文庫
酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)（圖 D-E）。為進(jìn)一步研究在年齡信號(hào)調(diào)控中的作用機(jī)制，分別構(gòu)建了過表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對(duì)照相比，過表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營(yíng)養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換（圖A），證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止，表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示過表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達(dá)miR156導(dǎo)致的開花延遲，但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活，PtDAL1過表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型，表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲，表明PtMADS11對(duì)開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。安徽品質(zhì)酵母文庫篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗(yàn)。
酵母單雜交測(cè)試：為驗(yàn)證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫，進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌，進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外，可通過降低篩選壓力處理，進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。
酵母文庫實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個(gè)可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應(yīng)用。
酵母文庫:細(xì)菌鞭毛蛋白是一種重要的細(xì)菌毒力因子，可刺激動(dòng)植物細(xì)胞中的分子免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。脊椎動(dòng)物識(shí)別鞭毛蛋白和建立有效免疫反應(yīng)的詳細(xì)機(jī)制已經(jīng)被揭示；然而，無脊椎動(dòng)物是否能夠識(shí)別鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日，山東大學(xué)王顯偉團(tuán)隊(duì)在PLOSPATHOGENS（IF：6.823）上發(fā)表了題為“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究論文，揭示了MjShoc2可以與鞭毛蛋白FlaA互作，引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)，促使對(duì)蝦抵抗細(xì)菌***，為無脊椎動(dòng)物對(duì)鞭毛蛋白的感知機(jī)制提供了見解。該項(xiàng)目中所用的對(duì)蝦酵母文庫由歐易生物構(gòu)建。不懂就問,酵母文庫實(shí)驗(yàn)室究竟長(zhǎng)啥樣?擁有十余年豐富的文庫構(gòu)建。貴州酵母文庫質(zhì)量
歐易生物酵母文庫項(xiàng)目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。浙江歐易生物酵母文庫
文章中酵母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021 年 3 月，揚(yáng)州大學(xué)陳忱教授為通訊作者，在 The Plant Journal 雜志（IF: 6.141）在線發(fā)表了題為“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究論文，報(bào)道了 OsNF-YB9 在調(diào)控水稻種子發(fā)育中的作用機(jī)制。NF-Y轉(zhuǎn)錄因子家族成員LEC1在擬南芥胚胎發(fā)生和種子發(fā)育中發(fā)揮了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是擬南芥LEC1的同源基因。這些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未經(jīng)報(bào)道。浙江歐易生物酵母文庫
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司在科研服務(wù)，科研檢測(cè)，學(xué)術(shù)研究，技術(shù)咨詢一直在同行業(yè)中處于較強(qiáng)地位，無論是產(chǎn)品還是服務(wù)，其高水平的能力始終貫穿于其中。公司始建于2009-03-10，在全國(guó)各個(gè)地區(qū)建立了良好的商貿(mào)渠道和技術(shù)協(xié)作關(guān)系。公司承擔(dān)并建設(shè)完成醫(yī)藥健康多項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目，取得了明顯的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。多年來，已經(jīng)為我國(guó)醫(yī)藥健康行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟(jì)等的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。