貴州建庫酵母文庫

來源: 發(fā)布時間:2023-02-14

進(jìn)行了酵母雙雜交文庫的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過雙熒光分子互補(bǔ)實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實(圖c-e)。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá),OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運(yùn)輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá),在5DAF開始***,并在10-30DAF維持高表達(dá)水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒有***差別。酵母文庫 技術(shù)服務(wù)歐易生物分子互作一站式服務(wù)。貴州建庫酵母文庫

歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機(jī)制研究,近日,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“小麥短根長度 1文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個新的 ERF 轉(zhuǎn)錄因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),該基因主要在根中表達(dá)。綜上,本研究證明了 TaSRL1 在生長素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子,并通過與 TaTIFY9 相互作用,整合生長素和 JA 信號,抑制根的生長。TaSRL1-4A 標(biāo)記對小麥根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要意義。黑龍江酵母文庫領(lǐng)域歐易生物21天極速建庫,一個文庫可以同時做單雜、雙雜、三雜,化藥小分子篩選。

歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。

通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動子中的順勢作用元件功能進(jìn)行分析,并對DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。酵母文庫篩選做文庫篩選前,首先需要檢測你的誘餌的自***活性和對酵母的毒性。

文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實驗、不停的花費(fèi)時間驗證而頭禿了。10年酵母雙雜交建庫篩庫經(jīng)驗結(jié)合SMART和GATEWAY建庫技術(shù)優(yōu)勢。浙江酵母文庫

液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應(yīng)用。貴州建庫酵母文庫

酵母單雜交測試:為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫,進(jìn)行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌,進(jìn)行了酵母單雜交測試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡單高效。此外,可通過降低篩選壓力處理,進(jìn)行弱相互作用的檢測。貴州建庫酵母文庫

上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊不斷壯大,現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊,各種專業(yè)設(shè)備齊全。專業(yè)的團(tuán)隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展歐易生物的品牌。公司堅持以客戶為中心、檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。市場為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司主營業(yè)務(wù)涵蓋科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢,堅持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。